ISO 15952:2018

ISO/TC 190/SC 4
Date: 2018‐06 Deleted: 2016‐12‐15
ISO/TC 190/SC 4/WG 2
Secretariat: AFNOR
Soil quality — Effects of pollutants on juvenile land snails (Helicidae) — Determination
of the effects on growth by soil contamination
Qualité du sol — Effets des polluants vis-à-vis des escargots juvéniles (Helicidae) —
Détermination des effets sur la croissance par contamination du sol
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Deleted: /FDIS
Contents Page
1 Scope . . . . . . . 1
2 Normative references . . . . . 1
3 Terms and definitions . . . . . 2
4 Principle . . . . . . . 3
5 Test environment . . . . . . 3
6 Reagents . . . . . . . 3
7 Apparatus . . . . . . . 5
8 Storage and preparation of the samples . . . 5
9 Procedure . . . . . . . 6
10 Reference substance . . . . . 9
11 Calculations and expression of results . 10
12 Validity of test . 12
13 Test report . 13
Annex A (normative) Static method . 14
Annex B (informative) Breeding technique for snails . 15
Annex C (informative) Example of composition of snail feed . 20
Annex D (informative) Example of table of data . 21
Annex E (informative) Example of results with Helix aspersa aspersa . 22
Annex F (informative) Determination of the effects on growth by food contamination . 25
Annex G (informative) Test performance with other snail species . 29
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iii
Deleted: /FDIS
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national
standards bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally
carried out through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a
technical committee has been established has the right to be represented on that committee.
International organizations, governmental and non‐governmental, in liaison with ISO, also take part in
the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all
matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see the following
URL: www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 190, Soil quality, Subcommittee SC 4,
Biological characterization.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 15952:2006), which has been technically
revised.
iv © ISO 2018 – All rights reserved

Deleted: /FDIS
Introduction
Because of the limited amount of data available concerning toxicity of contaminants on soil organisms,
the ecotoxicity of soils and waste are cause for serious concern at both national and international levels.
Currently available tests use soil‐fauna organisms restricted to annelid (earthworms and
Enchytraeidae) and arthropod phyla (insects: Collembola and Coleoptera). Among the latter, two
[6]
standards assess acute toxicity [earthworms (ISO 11268‐1) and coleoptera larvae and three other
[3] [2]
standards address sublethal effects of soil contaminants on reproduction (earthworms , Collembola ,
[4]
Enchytraeidae ). In the biological cycles of organisms, it appears that growth is, like reproduction, a
fundamental ecophysiological parameter to be taken into consideration for the sustainability of species
[38]
and ecosystems .
Snails are relevant ecological indicators for assessing the quality of soils(See References [16][18] to
[20][32][33][40] to [42]), as they are characteristic of the soil surface layer (saprophagous and
phytophagous) of which a large part of the biological cycle takes place in the soil (egg‐laying, hatching,
[7][18][29]
initial stages of development, hibernation, etc.) . During the other phases of their cycle, they eat
soil and are in contact with the soil via their moist pedal sole (foot) covered with mucus and participate
in the permanent exchanges with the soil (water, mineral salts, excrement and finally shell and organic
[7][18][31]
matter when they die) . In addition, they constitute an important link between plants, fauna and
soil microorganisms. They correspond fully to the criteria for a good biological indicator: easy to sample
and identify, they are widely distributed; they accumulate contaminants (See References[9],[11] to
[15],[17][18][22][24][29][30],[33] to [48]); their ecological and physiological characteristics are well‐
[7][10][32] [22][26][32]
known ; and they are now easy to breed under controlled conditions . Their susceptibility
to common contaminants of their environment has been demonstrated (See References [11] to
[16],[19] to [28],[30],[33] to [38],[37] to [48]).
This International Standard describes a method for determining the effects on survival and growth of
young snails of substances, preparations (i.e. a mixture or solution composed of two or more
substances), soils or waste materials added to an artificial or a natural soil. The described method is
thus applicable to test contaminated soils or to compare different uncontaminated soils. The
recommended species is Helix aspersa aspersa Müller (also commonly called: common garden snail,
brown garden snail, garden snail, land snail, “Petit‐Gris”; synonyms: Cantareus aspersus, Cornu
[56]
aspersum ). Among land snails (stylommatophoran pulmonate gastropod molluscs of the Helicidae
family), Helix aspersa aspersa Müller is the most ubiquitous. This palearctic species can be acclimated to
regions with different types of climate: Mediterranean, oceanic temperate, midcontinental temperate
and even tropical. Helix aspersa aspersa Müller is of European origin and has been introduced into all
[10]
parts of the world. They are now on all continents except Antarctica .
Indeed, in their natural environment, snails integrate the contaminants by contact (with various
substrates such as soil, soil leachates, plant litter), by ingestion (of plants and soil), as well as through
[7][29]
the respiratory tract . So, for specific testing purposes (evaluation of pesticide toxicity, for example),
another test design, which is focussed on exposure via food uptake, is optionally available (Annex F and
Reference [6]).
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v
Deleted: /FDIS
Soil quality — Effects of pollutants on juvenile land snails
(Helicidae) — Determination of the effects on growth by soil
contamination
1 Scope
This document specifies a semi‐static method for determining the effects of contaminants on growth
and survival of young snails, usually Helix aspersa aspersa Müller. The animals are exposed via the
cutaneous and digestive route using a test substrate (artificial or natural soil according to the objective
of the study) to which defined amounts of the following are added:
— substances, mixtures or preparations;
— soils (contaminated or of unknown quality) or waste materials.
This test takes into account the possible changes in the test substance, preparation, soil or waste
material because the test mixtures are prepared and renewed every week during the 28‐day test
period.
A static method may be implemented in addition to the semi‐static method (optional). This method is
described in Annex A.
This method does not apply to substances for which the air/soil partition coefficient is greater than one,
or to substances with vapour pressure exceeding 300 Pa, at 25 °C.
2 Normative references
Deleted: ISO 10390, Soil
quality — Determination of
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content pH¶

constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
Deleted:
ISO 10390, Soil quality — Determination of pH Deleted: ISO 10694, Soil
quality — Determination of organic
and total carbon after dry
ISO 18400‐206, Soil quality — Sampling — Part 206: Guidance on the collection, handling and storage of
combustion (elementary
soil for the assessment of biological functional and structural endpoints in the laboratory
analysis)¶

ISO 10694, Soil quality — Determination of organic and total carbon after dry combustion (elementary
Deleted:
analysis)
Deleted:
ISO 11268‐1, Soil quality — Effects of pollutants on earthworms — Part 1: Determination of acute toxicity
Deleted:
to Eisenia fetida/Eisenia andrei
Deleted: ISO 11274, Soil
quality — Determination of the
ISO 11269‐2:2012, Soil quality — Determination of the effects of pollutants on soil flora — Part 2: Effects
water-retention characteristic —
of contaminated soil on the emergence and early growth of higher plants
Laboratory methods¶
ISO 11465, Soil quality —
Determination of dry matter and
ISO 11274, Soil quality — Determination of the water-retention characteristic — Laboratory methods
water content on a mass basis —
Gravimetric method¶
ISO 11465, Soil quality — Determination of dry matter and water content on a mass basis — Gravimetric
EN 14735, Characterization of
method
waste — Preparation of waste
samples for ecotoxicity tests¶
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Deleted: /FDIS
EN 14735, Characterization of waste — Preparation of waste samples for ecotoxicity tests
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— IEC Electr
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 15952
Deuxième édition
2018-06
Qualité du sol — Effets des polluants
vis-à-vis des escargots juvéniles
(Helicidae) — Détermination
des effets sur la croissance par
contamination du sol
Soil quality — Effects of pollutants on juvenile land snails (Helicidae)
— Determination of the effects on growth by soil contamination
Numéro de référence
©
ISO 2018
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être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Tél.: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
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Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 2
4 Principe . 3
5 Environnement de l’essai . 3
6 Réactifs . 4
7 Appareillage . 5
8 Stockage et préparation des échantillons . 6
8.1 Sol à soumettre à essai . 6
8.2 Déchets . 6
9 Mode opératoire. 6
9.1 Préparation de l’essai . 6
9.1.1 Sélection des concentrations à soumettre à essai . 6
9.1.2 Préparation des mélanges d’essai . 7
9.2 Répartition du mélange d’essai . 8
9.3 Introduction de la nourriture . 8
9.4 Introduction du réactif biologique . 9
9.5 Manipulations pendant les essais . 9
9.5.1 Généralités . 9
9.5.2 Soins de routine . 9
9.5.3 Tâche hebdomadaire . 9
10 Substance de référence .10
11 Calculs et expression des résultats .11
11.1 Calculs .11
11.2 Expression des résultats .12
12 Validité de l’essai .14
13 Rapport d’essai .14
Annexe A (informative) Méthode statique .16
Annexe B (informative) Technique d’élevage des escargots .17
Annexe C (informative) Exemple de composition de la nourriture pour escargots .22
Annexe D (informative) Exemple de tableau de données .23
Annexe E (informative) Exemple de résultats avec Helix aspersa aspersa .24
Annexe F (informative) Détermination des effets sur la croissance par contamination
de la nourriture .28
Annexe G (informative) Autres espèces d’escargots adéquates .32
Bibliographie .33
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 190, Qualité du sol, sous-comité SC 4,
Caractérisation biologique.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 15952:2006), qui a fait l’objet d’une
révision technique.
iv © ISO 2018 – Tous droits réservés

Introduction
En raison du nombre limité de données disponibles sur la toxicité des contaminants sur les organismes
vivant dans le sol, l’écotoxicité des sols et des déchets sont très préoccupants tant au niveau national
qu’au niveau international. Les essais actuellement disponibles utilisent les organismes de la faune
du sol limités aux embranchements annélides (vers de terre et Enchytraeidae) et des arthropodes
(insectes: Collemboles et Coléoptères). Parmi ces derniers, deux normes évaluent la toxicité aiguë (vers
[6]
de terre (ISO 11268-1) et larves de coléoptères et trois autres normes traitent des effets sublétaux
[3] [2] [4]
des contaminants du sol sur la reproduction (vers de terre, Collemboles, Enchytraeidae ). Dans
les cycles biologiques des organismes, il semble que la croissance est, tout comme la reproduction, un
paramètre écophysiologique fondamental à prendre en considération pour la viabilité des espèces et
[38]
des écosystèmes .
Les escargots sont des indicateurs écologiques pertinents pour l’évaluation de la qualité des sols (voir
Références [16], [18] à [20], [32], [33], [40] à [42]), étant donné qu’ils sont caractéristiques de la couche
superficielle du sol (saprophages et phytophages) et qu’une grande partie de leur cycle biologique a lieu
[7][18][29]
dans le sol (ponte, éclosion, premiers stades du développement, hibernation, etc.). Pendant les
autres phases de leur cycle, ils ingèrent du sol et sont en contact avec celui-ci par l’intermédiaire de leur
sole pédieuse humide (pied), recouverte de mucus, et participent aux échanges permanents avec le sol
(eau, sels minéraux, excréments, puis finalement la coquille et la matière organique quand ils meurent).
[7][18][31]
De plus, ils représentent un lien important entre les plantes, la faune et les micro-organismes
du sol. Ils répondent pleinement aux critères d’un bon indicateur biologique: faciles à collecter et à
identifier, ils présentent une large répartition, ils accumulent les contaminants (voir Références [9], [11]
à [15], [17], [18], [22], [24], [29], [30], [33] à [48]), leurs caractéristiques écologiques et physiologiques
[7],[10],[32] [22]
sont bien connues et ils sont, à présent, faciles à élever dans des conditions contrôlées.
[26][32]
Leur sensibilité aux contaminants courants dans leur environnement a été démontrée (voir
Références [11] à [16], [19] à [28], [30], [33] à [38], [37] à [48]).
La présente Norme internationale décrit une méthode pour déterminer les effets sur la survie et la
croissance des escargots juvéniles de substances, de préparations (c’est-à-dire un mélange ou une
solution composé d’au moins deux substances), de sols ou de déchets ajoutés à un sol artificiel ou naturel.
La méthode décrite est donc applicable aux essais de sols contaminés ou à la comparaison de différents
sols non contaminés. L’espèce recommandée est Helix aspersa aspersa Müller (aussi communément
appelée: escargot petit-gris, escargot de jardin, Petit-Gris; synonymes: Cantareus aspersus, Cornu
[56]
aspersum ). Parmi les escargots terrestres (mollusques gastéropodes pulmonés stylommatophores
de la famille Helicidae), Helix aspersa aspersa Müller est le plus répandu. Cette espèce paléarctique
peut s’acclimater à des régions présentant des climats de types différents: méditerranéen, océanique
tempéré, continental tempéré, voire tropical. Helix aspersa aspersa Müller est d’origine européenne et
a été introduit dans le monde entier. Ces escargots se trouvent à présent sur tous les continents hormis
[10]
l’Antarctique .
Dans leur environnement naturel, les escargots assimilent les cont
...

ISO/TC 190/SC 4
Deleted: 05‐12
Date: 2018‐06
Deleted: /FDIS
ISO/TC 190/SC 4
Secrétariat: AFNOR
Qualité du sol — Effets des polluants vis-à-vis des escargots juvéniles (Helicidae)
— Détermination des effets sur la croissance par contamination du sol
Soil quality — Effects of pollutants on juvenile land snails (Helicidae) — Determination of
the effects on growth by soil contamination
Type du document : Norme internationale
Sous‐type du document :
Stade du document : (50) Approbation
Langue du document : F
Deleted: /FDIS
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le
droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir
www.iso.org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant les
références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www.iso.org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www.iso.org/avant‐propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 190, Qualité du sol, sous‐comité SC 4,
Caractérisation biologique.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 15952:2006), qui a fait l’objet d’une
révision technique.
© ISO 2018 – Tous droits réservés
ii
Deleted: /FDIS
Introduction
En raison du nombre limité de données disponibles sur la toxicité des contaminants sur les organismes
vivant dans le sol, l’écotoxicité des sols et des déchets sont très préoccupants tant au niveau national
qu’au niveau international. Les essais actuellement disponibles utilisent les organismes de la faune du
sol limités aux embranchements annélides (vers de terre et Enchytraeidae) et des arthropodes
(insectes: Collemboles et Coléoptères). Parmi ces derniers, deux normes évaluent la toxicité aiguë (vers
[6]
de terre (ISO 11268‐1) et larves de coléoptères et trois autres normes traitent des effets sublétaux des
[3] [2] [4]
contaminants du sol sur la reproduction (vers de terre, Collemboles, Enchytraeidae ). Dans les
cycles biologiques des organismes, il semble que la croissance est, tout comme la reproduction, un
paramètre écophysiologique fondamental à prendre en considération pour la viabilité des espèces et
[38]
des écosystèmes .
Les escargots sont des indicateurs écologiques pertinents pour l’évaluation de la qualité des sols (voir
Références [16], [18] à [20], [32], [33], [40] à [42]), étant donné qu’ils sont caractéristiques de la couche
superficielle du sol (saprophages et phytophages) et qu’une grande partie de leur cycle biologique a lieu
[7][18][29]
dans le sol (ponte, éclosion, premiers stades du développement, hibernation, etc.). Pendant les
autres phases de leur cycle, ils ingèrent du sol et sont en contact avec celui‐ci par l’intermédiaire de leur
sole pédieuse humide (pied), recouverte de mucus, et participent aux échanges permanents avec le sol
(eau, sels minéraux, excréments, puis finalement la coquille et la matière organique quand ils
[7][18][31]
meurent). De plus, ils représentent un lien important entre les plantes, la faune et les micro‐
organismes du sol. Ils répondent pleinement aux critères d’un bon indicateur biologique: faciles à
collecter et à identifier, ils présentent une large répartition, ils accumulent les contaminants (voir
Références [9], [11] à [15], [17], [18], [22], [24], [29], [30], [33] à [48]), leurs caractéristiques
[7],[10],[32]
écologiques et physiologiques sont bien connues et ils sont, à présent, faciles à élever dans des
[22][26][32]
conditions contrôlées. Leur sensibilité aux contaminants courants dans leur environnement a
été démontrée (voir Références [11] à [16], [19] à [28], [30], [33] à [38], [37] à [48]).
La présente Norme internationale décrit une méthode pour déterminer les effets sur la survie et la
croissance des escargots juvéniles de substances, de préparations (c’est‐à‐dire un mélange ou une
solution composé d’au moins deux substances), de sols ou de déchets ajoutés à un sol artificiel ou
naturel. La méthode décrite est donc applicable aux essais de sols contaminés ou à la comparaison de
différents sols non contaminés. L’espèce recommandée est Helix aspersa aspersa Müller (aussi
communément appelée: escargot petit‐gris, escargot de jardin, Petit‐Gris; synonymes: Cantareus
[56]
aspersus, Cornu aspersum ). Parmi les escargots terrestres (mollusques gastéropodes pulmonés
stylommatophores de la famille Helicidae), Helix aspersa aspersa Müller est le plus répandu. Cette
espèce paléarctique peut s’acclimater à des régions présentant des climats de types différents:
méditerranéen, océanique tempéré, continental tempéré, voire tropical. Helix aspersa aspersa Müller est
d’origine européenne et a été introduit dans le monde entier. Ces escargots se trouvent à présent sur
[10]
tous les continents hormis l’Antarctique .
Dans leur environnement naturel, les escargots assimilent les contaminants par contact (avec des
substrats variés tels que le sol, les lixiviats du sol et la litière végétale), par ingestion (de plantes et de
[7][29]
sol), de même que par les voies respiratoires. Ainsi, pour des objectifs particuliers (évaluation de la
toxicité d’un pesticide, par exemple), une autre méthode d’essai basée sur l’exposition par ingestion
d’aliments est disponible en option (Annexe F et Référence [6]).
© ISO 2018 – Tous droits réservés
iii
Deleted: PROJET FINAL DE
NORME INTERNATIONALE ISO 15952:2018(F)
Deleted: /FDIS
Qualité du sol — Effets des polluants vis-à-vis des escargots
juvéniles (Helicidae) — Détermination des effets sur la
croissance par contamination du sol
1 Domaine d’application
Le présent document s’applique à une méthode semi‐statique pour la détermination des effets de
contaminants sur la croissance et la survie d’escargots juvéniles, généralement Helix aspersa aspersa
Müller. Les animaux sont exposés par les voies cutanée et digestive à un substrat d’essai (sol artificiel
ou naturel selon l’objectif de l’étude) auquel sont ajoutées des quantités définies:
— de substances, de mélanges ou de préparations;
— de sols (contaminés ou de qualité inconnue) ou de déchets.
Cet essai prend en considération les changements éventuels de la substance d’essai, de la préparation,
du sol ou des déchets, étant donné que les mélanges d’essai sont préparés et renouvelés chaque
semaine pendant la période d’essai de 28 jours.
Il est admis de mettre en œuvre une méthode statique en sus de la méthode semi‐statique (facultatif).
Cette méthode est décrite dans l’Annexe A.
Cette méthode ne s’applique pas aux substances dont le coefficient de partage air/sol est supérieur à 1,
ou pour lesquelles la pression de vapeur est supérieure à 300 Pa à 25 °C.
2 Références normatives
Les documents suivants cités dans le texte constituent, pour tout ou partie de leur contenu, des
exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour les
références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les éventuels
amendements)
ISO 10390, Qualité du sol — Détermination du pH
Deleted: ISO 10390, Qualité
du sol — Détermination du
pH¶
ISO 18400‐206, Qualité du sol — Échantillonnage — Partie 206: Lignes directrices pour la collecte, la

manipulation et la conservation de sols destinés à l’évaluation de paramètres biologiques fonctionnels et
structurels en laboratoire
Deleted:
ISO 10694, Qualité du sol — Dosage du carbone organique et du carbone total après combustion sèche Deleted: ISO 10694, Qualité
du sol — Dosage du carbone
(analyse élémentaire)
organique et du carbone total après
combustion sèche (analyse
ISO 11268‐1, Qualité du sol — Effets des polluants vis-à-vis des vers de terre — Partie 1: Détermination de
élémentaire)¶
la toxicité aiguë vis-à-vis de Eisenia fetida/Eisenia andrei

Deleted:
ISO 11269‐2:2012, Qualité du sol — Détermination des effets des polluants sur la flore du sol — Partie 2:
Deleted:
Effets des sols contaminés sur l'émergence et la croissance des végétaux supérieurs
Deleted:
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Deleted: /FDIS
ISO 11274, Qualité du sol — Détermination de la caractéristique de la rétention en eau — Méthodes de Deleted: ISO 11274, Qualité du sol —
Détermination de la caractéristique de la
laboratoire
rétention en eau — Méthodes de
laboratoire¶
ISO 11465, Qualité du sol — Détermination de la teneur pondérale en matière sèche et en eau — Méthode
ISO 11465, Qualité du sol —
gravimétrique
Détermination de la teneur pondérale en
matière sèche et en eau — Méthode
gravimétrique¶
EN 14735, Caractérisation des déchets — Préparation des échantillons de déchets en vue d’essais
EN 14735, Caractérisation des
écotoxicologiques
déchets — Préparation des échantillons de
déchets en vue d’essais
3 Termes et définitions
écotoxicologiques¶
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http://www.electropedia.org/
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https://www.iso.org/obp
3.1
substrat d’essai
sol artificiel ou sol naturel utilisé comme témoin et comme substrat de dilution
3.2
matrice
sol ou déchet soumis à l’essai
3.3
mélange d’essai
mélange de la substance d’essai, de la préparation ou de la matrice avec le substrat d’essai (3.1)
3.4
croissance
augmentation de la biomasse, c’est‐à‐dire de la masse fraîche totale (corps et coquille) des
organismes entre le début et la fin de l’essai
Note 1 à l’article: Elle s’exprime sous forme d’un coefficient de croissance k .
CC,m
3.5
croissance
augmentation du diamètre maximal de la coquille entre le début et la fin de l’essai
Note 1 à l’article: Elle est exprimée sous forme d’un coefficient de croissance k .
CC,d
3.6
concentration efficace
CEx
concentration à laquelle est décelé un effet spécifique; x est le pourcentage (10, 25, 50) de cet effet, par
exemple inhibition de la croissance
EXEMPLE CE est la concentration estimée pour réduire la croissance, à la fin de l’essai, de 50 % par rapport
au témoin (CE et CE pour la croissance de la biomasse et de la coquille, respectivement).
50,m 50,d
3.7
concentration létale médiane
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CL
concentration de la substance d’essai, de la préparation présente à l’origine ou concentration de la
matrice entraînant la mort de 50 % des escargots soumis à l’essai
3.8
concentration minimale avec effet observé
CMEO
concentration la plus basse soumise à l’essai, à laquelle il est observé que la substance d’essai a un effet
statistiquement significatif (p < 0,05) par rapport au témoin
Note 1 à l’article: Toutes les concentrations d’essai supérieures à la CMEO ont un effet nocif supérieur ou égal à
ceux observés à la CMEO. Lorsqu’il n’est pas possible de satisfaire ces deux conditions, il convient d’expliquer dans
le détail comment a été sélectionnée la CMEO (et par conséquent la CSEO).
3.9
concentration sans effet observable
CSEO
concentration de l’essai immédiatement inférieure à la CMEO, qui, lorsqu’elle est comparée à celle du
témoin, ne produit aucun effet statistiquement significatif (p > 0,05) pendant un temps d’exposition
donné
Note 1 à l’article: La CSEO est la concentration immédiatement inférieure à la CMEO.
Note 2 à l’article: Dans le cas de 3.6, 3.7, 3.8 et 3.9, les résultats sont exprimés:
— en masse sèche de la substance d’essai ou de la préparation par masse sèche du substrat d’essai (3.1);
— en pourcentage de la masse de la matrice soumise à l’essai dans le mélange d’essai (exprimé en masse sèche).
4 Principe
Des escargots terrestres juvéniles (généralement Helix aspersa aspersa Müller) sont exposés pendant
une période de 28 jours à des mélanges d’essai contenant la substance d’essai, la préparation ou la
matrice à différentes concentrations. Les mélanges d’essai sont fraîchement préparés et renouvelés tous
les 7 jours.
En fonction des objectifs de l’étude, les mélanges d’essai peuvent être préparés avec du sol
artificiel (6.3.2) ou un sol naturel adapté (6.3.3).
Pendant l’essai, les escargots sont nourris avec un aliment non contaminé.
Les effets sur la croissance (biomasse et diamètre de la coquille) et sur la survie sont mesurés après
28 jours d’exposition (facultativement, les effets peuvent être mesurés tous les 7 jours pendant
28 jours).
Les résultats obtenus au cours de l’es
...