ISO 17468:2023

NORME ISO
INTERNATIONALE 17468
Deuxième édition
2023-11
Microbiologie de la chaîne
alimentaire — Exigences et
recommandations techniques pour le
développement ou la révision d'une
méthode de référence normalisée
Microbiology of the food chain — Technical requirements and
guidance on the establishment or revision of a standardized reference
method
Numéro de référence
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© ISO 2023
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Publié en Suisse
ii
Sommaire Page
Avant-propos .iv
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives .1
3 Termes et définitions . 2
4 Procédure technique de normalisation d’une nouvelle méthode de référence .3
4.1 Généralités . 3
4.2 Étapes techniques . 4
4.2.1 Étape 1: sélection de la ou des méthodes (obligatoire) . 4
4.2.2 Étape 2: optimisation de la ou des méthodes (facultative) . 4
4.2.3 Étape 3: étude d’évaluation de la ou des méthodes (recommandée) . 4
4.2.4 Étape 4: étude «en conditions réelles» (recommandée) . 5
4.2.5 Étape 5: sélection d’une méthode de référence candidate pour validation
supplémentaire (obligatoire) . 6
4.2.6 Étape 6: étude interlaboratoires (obligatoire) . 6
5 Procédure technique de révision d’une méthode de référence normalisée .7
Annexe A (informative) Logigramme des étapes techniques pour le développement ou la
révision d’une méthode de référence normalisée . 9
Annexe B (informative) Recommandations relatives aux études d’optimisation visant à
comparer deux options dans le cadre de l’élaboration d’une nouvelle méthode de
référence normalisée ou de la révision d’une telle méthode .10
Bibliographie .13
iii
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document
a été rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2
(voir www.iso.org/directives).
L’ISO attire l’attention sur le fait que la mise en application du présent document peut entraîner
l’utilisation d’un ou de plusieurs brevets. L’ISO ne prend pas position quant à la preuve, à la validité
et à l’applicabilité de tout droit de brevet revendiqué à cet égard. À la date de publication du présent
document, l’ISO n’avait pas reçu notification qu’un ou plusieurs brevets pouvaient être nécessaires à sa
mise en application. Toutefois, il y a lieu d’avertir les responsables de la mise en application du présent
document que des informations plus récentes sont susceptibles de figurer dans la base de données de
brevets, disponible à l’adresse www.iso.org/brevets. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié tout ou partie de tels droits de brevet.
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion
de l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir www.iso.org/iso/fr/avant-propos.html.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-
comité SC 9, Microbiologie, en collaboration avec le comité technique CEN/TC 463, Microbiologie de la
chaîne alimentaire, du Comité européen de normalisation (CEN), conformément à l’Accord de coopération
technique entre l’ISO et le CEN (Accord de Vienne).
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 17468:2016), qui a fait l’objet d’une
révision technique.
Les principales modifications sont les suivantes:
— un renvoi est fait non seulement à l’ISO 16140-2, mais également à l’ISO 16140-4 et à l’ISO 16140-6;
— une nouvelle étape facultative, "l’optimisation de la ou des méthodes". En outre, une nouvelle
annexe fournissant des recommandations relatives aux études d’optimisation des méthodes, en
vue de comparer deux options possibles lors de l’élaboration d’une nouvelle méthode de référence
normalisée ou de sa révision;
— l’ajout du cas des méthodes de confirmation et de typage;
— l’évaluation de la nature d’un changement (mineur ou majeur) lors de la révision d’une méthode de
référence normalisée.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www.iso.org/fr/members.html.
iv
NORME INTERNATIONALE ISO 17468:2023(F)
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Exigences et
recommandations techniques pour le développement ou la
révision d'une méthode de référence normalisée
1 Domaine d’application
Le présent document établit des exigences et des recommandations techniques pour le développement
ou la révision de méthodes de référence normalisées pour l’analyse des micro-organismes dans:
— les produits destinés à la consommation humaine;
— les produits destinés à l’alimentation animale;
— les échantillons environnementaux dans les zones de production et de manipulation des aliments;
— les échantillons prélevés au stade de la production primaire.
Le présent document spécifie les stades techniques du développement d’une nouvelle méthode de
référence normalisée et de la révision d’une méthode de référence normalisée existante. Il inclut, en
particulier, les exigences et les recommandations applicables à la validation de la méthode sélectionnée.
Le présent document est destiné à être mis en œuvre en particulier par l’ISO/TC 34/SC 9 et sa structure
équivalente au niveau du CEN, à savoir le CEN/TC 463.
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s'applique (y compris les
éventuels amendements)
ISO 5725-2, Exactitude (justesse et fidélité) des résultats et méthodes de mesure — Partie 2: Méthode de
base pour la détermination de la répétabilité et de la reproductibilité d'une méthode de mesure normalisée
ISO 11133, Microbiologie des aliments, des aliments pour animaux et de l'eau — Préparation, production,
stockage et essais de performance des milieux de culture
ISO 16140-1:2016, Microbiologie de la chaîne alimentaire — Validation des méthodes — Partie 1:
Vocabulaire
ISO 16140-2:2016, Microbiologie de la chaîne alimentaire — Validation des méthodes — Partie 2: Protocole
pour la validation de méthodes alternatives (commerciales) par rapport à une méthode de référence
1)
ISO 16140-2:2016/Amd.1:— , Microbiologie de la chaîne alimentaire — Validation des méthodes —
Partie 2: Protocole pour la validation de méthodes alternatives (commerciales) par rapport à une méthode
de référence — Amendement 1: Révision de l’évaluation des données des études de comparaison de méthodes
qualitatives, des calculs de RLOD de l'étude interlaboratoires ainsi que du calcul et de l’interprétation de
l’étude de justesse relative, et ajout d’un protocole pour la détermination de la stérilité commerciale pour
des produits spécifiques
ISO 16140-6:2019, Microbiologie de la chaîne alimentaire — Validation des méthodes — Partie 6: Protocole
pour la validation de méthodes alternatives (commerciales) pour la confirmation microbiologique et le
typage
1) En cours d’élaboration. Etape au moment de la publication: ISO 16140-2:2016/DAmd.1:2023.
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions de l’ISO 16140-1 ainsi que les suivants
s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse https:// www .electropedia .org/
3.1
méthode de référence candidate
méthode sélectionnée qui est susceptible de devenir la méthode de référence normalisée (3.7)
3.2
organisateur de l’EIL
laboratoire organisateur
laboratoire ayant la responsabilité de gérer toutes les activités techniques et statistiques que
l’organisation de l’étude interlaboratoires implique
[SOURCE: ISO 16140-1:2016, 2.45, modifié – «que l’étude de validation impliquent, c’est-à-dire l’étude
comparative des méthodes et l’étude interlaboratoires» a été remplacé par «que l’organisation de l’étude
interlaboratoires implique» et la Note 1 à l’article a été supprimée.]
3.3
participant à l’EIL
laboratoire participant
technicien de laboratoire individuel, qui travaille de manière totalement indépendante vis-à-vis d’autres
participants de l’EIL et qui utilise différents ensembles d’échantillons ou prises d’essai sélectionné(e)s
en aveugle
[SOURCE: ISO 16140-1:2016, 2.13, modifié – «collaborateur» a été remplacé par «participant à l’EIL ».]
3.4
étude interlaboratoires
étude menée par plusieurs laboratoires analysant des échantillons identiques au même moment, dont
les résultats sont utilisés pour estimer les caractéristiques de performance de la méthode de référence
candidate
Note 1 à l'article: L’étude interlaboratoires vise à déterminer la variabilité des résultats obtenus par les différents
laboratoires ayant analysé des échantillons identiques.
[SOURCE: ISO 16140-1:2016, 2.33, modifié – «les paramètres de performance de la méthode alternative»
a été remplacé par «les caractéristiques de performance de la méthode de référence candidate».]
3.5
stade de prénormalisation
stade technique qui précède le stade de normalisation et qui comprend les différentes étapes décrites
dans le présent document
Note 1 à l'article: Le stade de normalisation débute par l’étape proposition, à savoir le vote d’une proposition
de nouveau sujet de travail (ISO/NP) pour l’inclusion du sujet de travail dans le programme de travail
de l’ISO/TC 34/SC 9.
3.6
étude «en conditions réelles»
étude d’une ou de plusieurs méthodes, menée dans différents laboratoires, à l’aide de leurs propres
échantillons de routine, donnant la préférence à des échantillons contaminés naturellement
3.7
méthode de référence normalisée
méthode de référence décrite dans une norme
Note 1 à l'article: Voir l’ISO 16140-1 pour la définition de «méthode de référence».
4 Procédure technique de normalisation d’une nouvelle méthode de référence
4.1 Généralités
La validation d’une méthode en vue de sa normalisation comme méthode de référence comprend six
étapes techniques (voir 4.2):
— étape 1: sélection de la ou des méthodes (obligatoire);
— étape 2: optimisation de la ou des méthodes (facultative);
— étape 3: étude d’évaluation de la ou des méthodes (recommandée);
— étape 4: étude «en conditions réelles» (recommandée) (cette étape ne s’applique pas aux méthodes
de confirmation et de typage);
— étape 5: sélection d’une méthode de référence candidate pour validation supplémentaire (obligatoire);
— étape 6: étude interlaboratoires (obligatoire).
Les cinq premières étapes techniques correspondent au stade de prénormalisation et sont généralement
exécutées en amont du lancement du processus de normalisation. L’étape 6 (voir 4.2.6) est généralement
exécutée au cours du processus de normalisation (de préférence après le stade comité [ISO/CD] et avant
le stade enquête [ISO/DIS]).
Le logigramme des étapes techniques pour le développement d’une nouvelle méthode de référence
normalisée est donné à l’Annexe A.
Le groupe de travail chargé d’organiser les études sur une méthode qualitative doit envisager l’inclusion
d’une prise d’essai de taille supérieure à, par exemple, 10 g ou 25 g, lorsque cela est pertinent et
réalisable. Cela facilitera l’utilisation de la méthode de référence normalisée sans qu’il ne soit nécessaire
de procéder à une validation supplémentaire lorsque l’on utilise en routine une prise d’essai plus grande.
EXEMPLE Détection de Salmonella dans des prises d’essai de 375 g de préparation pour nourrissons.
Il convient de ne pas partager publiquement les informations relatives aux études menées aux
étapes 1 à 6 avant que ces études ne soient terminées. Une fois ces dernières terminées, il convient
de rendre publiques toutes les données pertinentes obtenues aux étapes 1 à 6, en les présentant dans
une publication scientifique ou dans un rapport. Le rapport associé à chaque méthode de référence
normalisée peut être mis à disposition sur le portail de maintenance des normes ISO (https:// standards
.iso .org/ iso/ ) et/ou en incluant un lien dans la bibliographie de la méthode de référence normalisée
vers le site web où le rapport est accessible au public.
NOTE Les données, par exemple celles concernant l’inclusivité et l’exclusivité, peuvent être dérivées d’études
antérieures à condition que les données publiées à l’origine soient traçables ou que celles-ci soient disponibles
sur le portail de maintenance des normes ISO associé à la méthode de référence normalisée.
Les caractéristiques de performance obtenues à partir de l’étude interlaboratoires (étape 6, voir
également 4.2.6) doivent être incorporées dans la méthode de référence normalisée correspondante.
4.2 Étapes techniques
4.2.1 Étape 1: sélection de la ou des méthodes (obligatoire)
Des informations en provenance de différentes sources (par exemple, méthodes normalisées nationales
ou régionales, articles scientifiques sur les méthodes avec des données d’évaluation, rapports
d’évaluation ou de validation des méthodes, praticabilité de la méthode) doivent être compilées dans le
but de sélectionner une ou plusieurs méthodes de référence candidates. Le groupe de travail chargé de
l’élaboration de la norme (appelé «le groupe de travail» ci-après) doit choisir une ou plusieurs méthodes
de référence candidates d’après les informations disponibles.
4.2.2 Étape 2: optimisation de la ou des méthodes (facultative)
Si, après l’étape de sélection de la ou des méthodes (voir 4.2.1), une (ou plusieurs) méthode(s) de
référence candidate comprend deux options pour un facteur (par exemple, milieu de culture, pour la
durée d’incubation, la température d’incubation), une étude d’optimisation de la (ou des) méthode(s)
comparant les deux options peut être menée.
L’Annexe B fournit des recommandations sur la manière de comparer ces deux options, et sur la manière
de faire un choix pour la méthode à normaliser et à évaluer (voir 4.2.3).
Si la ou les méthodes de référence candidates ne comprennent aucun facteur avec options, passer
directement à l’étape 3 (voir 4.2.3).
4.2.3 Étape 3: étude d’évaluation de la ou des méthodes (recommandée)
4.2.3.1 Généralités
Il convient qu’une étude d’évaluation de la ou des méthodes de référence candidates (voir 4.2.1 et
4.2.2) soit menée, généralement par un seul laboratoire, bien que plusieurs laboratoires puissent être
impliqués.
Si plusieurs méthodes de référence candidates sont évaluées à cette étape, il convient que le résultat
de l’étude d’évaluation permette au groupe de travail concerné de réduire le nombre de méthodes de
référence candidates, pour qu’il n’en reste idéalement qu’une seule (étape 5, voir également 4.2.5).
Le groupe de travail doit vérifier que la ou les méthodes de référence candidates fonctionnent en
utilisant des milieux de culture préparés en laboratoire à partir des ingrédients individuels décrits
dans la ou les méthodes de référence candidates.
4.2.3.2 Méthodes de détection et de quantification
Lorsqu’elle est menée, l’étude d’évaluation de la ou des méthodes permet d’estimer les caractéristiques
de performance énumérées ci-dessous et vise à les évaluer pour un grand nombre de types (d’aliments)
et de matrices (d’aliments), au sein des catégories (d’aliments) étudiées, représentatives du domaine
d’application de la méthode. Conformément à l’ISO 16140-2:2016, 5.1.3.1, si la méthode est destinée à
être appliquée à une vaste gamme d’aliments, alors au moins cinq catégories d’aliment doivent être
étudiées. Si la méthode doit être validée pour un nombre limité de catégories d’aliments, alors seules
ces catégories ont besoin d’être étudiées. Outre les catégories d’aliments, il est possible d’inclure comme
catégories supplémentaires des échantillons d’aliments pour animaux et d’aliments pour animaux de
compagnie, des échantillons environnementaux et des échantillons du stade de la production primaire.
NOTE Le groupe de travail peut évaluer, éventuellement par le biais d’un état des lieux auprès des
utilisateurs, s’il est suffisant de valider la méthode pour un nombre restreint de catégories (d’aliments).
Il convient que cette étude réponde aux exigences de l’étude de validation de méthodes dans un seul
laboratoire sans méthode de référence, comme indiqué dans l’ISO 16140-4:
— pour les méthodes qualitatives:
— approche factorielle (conformément à l’ISO 16140-4:2020, 5.1.2): sensibilité, niveau de détection
(LOD ), inclusivité/exclusivité; ou
— approche conventionnelle (conformément à l’ISO 16140-4:2020, 6.1.2): spécificité, LOD ,
sensibilité, inclusivité/exclusivité;
— pour les méthodes quantitatives:
— approche factorielle (conformément à l’ISO 16140-4:2020, 5.2.2): justesse relative, profil
d’exactitude, étude de fidélité interne (répétabilité et reproductibilité interne), inclusivité/
exclusivité; ou
— approche conventionnelle (conformément à l’ISO 16140-4:2020, 6.2.2): justesse relative, profil
d’exactitude, étude de fidélité interne (répétabilité et reproductibilité interne), inclusivité/
exclusivité et, le cas échéant, limite de quantification.
4.2.3.3 Méthodes de confirmation et de typage
Lorsqu’elle est menée, l’étude d’évaluation de la ou des méthodes doit satisfaire aux exigences de l’étude
de comparaison de méthodes pour la validation de méthodes alternatives (commerciales) en ce qui
concerne les procédures de confirmation microbiologique et de typage, comme indiqué dans l’Article 6
de l’ISO 16140-6:2019 sur l’inclusivité et l’exclusivité. Comme il n’y a pas de comparaison avec une
méthode de référence, comparer les résultats de l’inclusivité et de l’exclusivité directement à l’identité
des souches
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