Microbiologie de la chaîne alimentaire — Recherche et dénombrement de Cryptosporidium et Giardia dans les légumes verts frais à feuilles et les fruits à baies — Amendement 1: Études de validation des méthodes et caractéristiques de performance

General Information

Status
Published
Publication Date
18-Jun-2026
Technical Committee
ISO/TC 34/SC 9 - Microbiology
Current Stage
6060 - International Standard published
Start Date
19-Jun-2026
Due Date
23-Jul-2026
Completion Date
19-Jun-2026

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ISO 18744:2016/Amd 1:2026 - Microbiology of the food chain — Detection and enumeration of Cryptosporidium and Giardia in fresh leafy green vegetables and berry fruits — Amendment 1: Method validation studies and performance characteristics

Release Date:19-Jun-2026
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ISO 18744:2016/Amd 1:2026 - Microbiologie de la chaîne alimentaire — Recherche et dénombrement de Cryptosporidium et Giardia dans les légumes verts frais à feuilles et les fruits à baies — Amendement 1: Études de validation des méthodes et caractéristiques de performance

Release Date:19-Jun-2026
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Relations

Effective Date
12-Feb-2026
Effective Date
03-Aug-2024
Effective Date
27-Jul-2024

Overview

ISO 18744:2016/Amd 1 is an amendment to the international standard ISO 18744:2016, focusing on the microbiology of the food chain-specifically, the detection and enumeration of Cryptosporidium and Giardia in fresh leafy green vegetables and berry fruits. This amendment introduces method validation studies and performance characteristics, aiming to enhance the precision and reliability of food safety testing methods for these protozoan parasites.

The amendment is relevant for laboratories, regulatory agencies, food producers, and quality assurance professionals working in the area of food safety, microbiological testing, and fresh produce monitoring. By incorporating the latest performance data and validation requirements, it supports harmonized laboratory practices and improves the accuracy of detecting and quantifying these pathogens in food.

Key Topics

  • Method Validation: Outlines validation approaches for detection and enumeration methods, including interlaboratory studies that assess method reproducibility and reliability across different labs.
  • Performance Characteristics: Details important metrics such as specificity, sensitivity, limit of detection (LOD), standard deviation of laboratory effects, and intraclass correlation coefficient (ICC), which are crucial indicators of method performance.
  • Updated References: Replaces earlier references with the latest edition, such as referencing ISO 7218:2024 for general requirements and guidelines for microbiological examinations.
  • Sample Matrices Covered: Focuses on fresh leafy green vegetables (e.g., lettuce) and berry fruits (e.g., raspberries), recognized as significant vehicles for foodborne protozoan infections.
  • Laboratory Reproducibility: Discusses results from UK-based interlaboratory trials, analyzing how frequently different laboratories obtain similar outcomes to establish reliability.
  • Centrifugation Protocols: Provides practical updates and notes on sample preparation steps to optimize parasite recovery rates.

Applications

  • Food Safety Testing: Enhances the capacity of laboratories to reliably detect and enumerate Cryptosporidium and Giardia in produce, addressing key concerns in the food chain.
  • Regulatory Compliance: Assists food industry stakeholders in aligning with international best practices and complying with regulatory standards for microbiological testing of fresh produce.
  • Quality Assurance: Supports the development of consistent quality control protocols in food production facilities, thereby minimizing contamination risks and boosting consumer safety.
  • Research and Method Development: Provides a framework for microbiologists and method developers to evaluate and improve detection techniques for protozoan pathogens using validated performance indicators.
  • Accreditation: Offers a reference point for certification bodies assessing laboratory competence in accordance with ISO/IEC 17025 and similar standards.

Related Standards

  • ISO 18744:2016: The main standard detailing procedures for detecting and enumerating Cryptosporidium and Giardia in fresh produce.
  • ISO 7218:2024: Sets out the guidelines and general requirements for microbiological methods in the food chain, now referenced throughout the amended standard.
  • ISO 16140-2:2016: Provides principles and protocols for the validation of alternative (proprietary) microbiological methods, particularly for laboratory studies.
  • CEN/TC 463: The European Committee for Standardization’s technical committee collaborating on food chain microbiology.
  • ISO/IEC 17025: General requirements for the competence of testing and calibration laboratories, relevant for labs seeking accreditation to perform these methods.

Practical Value

ISO 18744:2016/Amd 1 ensures that detection and enumeration methods for Cryptosporidium and Giardia are rigorously validated, scientifically robust, and widely harmonized. By adhering to these protocols, laboratories and food safety authorities can significantly reduce the risk of foodborne outbreaks linked to protozoan contamination in fresh leafy greens and berry fruits, thus safeguarding public health and strengthening confidence in fresh produce markets.

For further information and implementation guidelines, consult the latest revisions of the referenced ISO standards and contact your national standards body or relevant accreditation authority.

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ISO 18744:2016/Amd 1:2026 - Microbiology of the food chain — Detection and enumeration of Cryptosporidium and Giardia in fresh leafy green vegetables and berry fruits — Amendment 1: Method validation studies and performance characteristics

Release Date:19-Jun-2026
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ISO 18744:2016/Amd 1:2026 - Microbiologie de la chaîne alimentaire — Recherche et dénombrement de Cryptosporidium et Giardia dans les légumes verts frais à feuilles et les fruits à baies — Amendement 1: Études de validation des méthodes et caractéristiques de performance

Release Date:19-Jun-2026
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Frequently Asked Questions

ISO 18744:2016/Amd 1:2026 is a standard published by the International Organization for Standardization (ISO). Its full title is "Microbiology of the food chain — Detection and enumeration of Cryptosporidium and Giardia in fresh leafy green vegetables and berry fruits — Amendment 1: Method validation studies and performance characteristics". This standard covers: Microbiology of the food chain — Detection and enumeration of Cryptosporidium and Giardia in fresh leafy green vegetables and berry fruits — Amendment 1: Method validation studies and performance characteristics

Microbiology of the food chain — Detection and enumeration of Cryptosporidium and Giardia in fresh leafy green vegetables and berry fruits — Amendment 1: Method validation studies and performance characteristics

ISO 18744:2016/Amd 1:2026 is classified under the following ICS (International Classification for Standards) categories: 07.100.30 - Food microbiology. The ICS classification helps identify the subject area and facilitates finding related standards.

ISO 18744:2016/Amd 1:2026 has the following relationships with other standards: It is inter standard links to EN ISO 18744:2016/FprA1, ISO/IEC TR 27599:2025, ISO 18744:2016. Understanding these relationships helps ensure you are using the most current and applicable version of the standard.

ISO 18744:2016/Amd 1:2026 is available in PDF format for immediate download after purchase. The document can be added to your cart and obtained through the secure checkout process. Digital delivery ensures instant access to the complete standard document.

Standards Content (Sample)


International
Standard
ISO 18744
First edition
Microbiology of the food chain —
2016-04-01
Detection and enumeration of
Cryptosporidium and Giardia in
AMENDMENT 1
fresh leafy green vegetables and
2026-06
berry fruits
AMENDMENT 1: Method validation
studies and performance
characteristics
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Recherche et
dénombrement de Cryptosporidium et Giardia dans les
légumes verts frais à feuilles et les fruits à baies
AMENDEMENT 1: Études de validation des méthodes et
caractéristiques de performance
Reference number
ISO 18744:2016/Amd.1:2026(en) © ISO 2026

ISO 18744:2016/Amd.1:2026(en)
© ISO 2026
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on
the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below
or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: +41 22 749 01 11
Email: copyright@iso.org
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii
ISO 18744:2016/Amd.1:2026(en)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee
has been established has the right to be represented on that committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely
with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are described
in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the different types
of ISO document should be noted. This document was drafted in accordance with the editorial rules of the
ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
ISO draws attention to the possibility that the implementation of this document may involve the use of (a)
patent(s). ISO takes no position concerning the evidence, validity or applicability of any claimed patent
rights in respect thereof. As of the date of publication of this document, ISO had not received notice of (a)
patent(s) which may be required to implement this document. However, implementers are cautioned that
this may not represent the latest information, which may be obtained from the patent database available at
www.iso.org/patents. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and expressions
related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to the World Trade
Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9,
Microbiology, in collaboration with the European Committee for Standardization (CEN) Technical Committee
CEN/TC 463, Microbiology of the food chain, in accordance with the Agreement on technical cooperation
between ISO and CEN (Vienna Agreement).
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.

iii
ISO 18744:2016/Amd.1:2026(en)
Microbiology of the food chain — Detection and
enumeration of Cryptosporidium and Giardia in fresh leafy
green vegetables and berry fruits
AMENDMENT 1: Method validation studies and performance
characteristics
Contents
Add the following text after Annex C:
Annex D (informative) Method validation studies and performance characteristics
2. Normative references
Replace ISO 7218:2007 with ISO 7218:2024.
Clause 6, first sentence
Replace the text in brackets with the following:
in accordance with ISO 7218:2024
7.2, first sentence
Replace the text in brackets with the following:
in accordance with ISO 7218:2024, 9.2.
7.3, first sentence
Replace the text in brackets with the following:
in accordance with ISO 7218:2024, 9.3.
7.4, first sentence
Replace the text in brackets with the following:
in accordance with ISO 7218:2024, 9.4.

ISO 18744:2016/Amd.1:2026(en)
8.1, NOTE 1
Replace the text with the following:
Centrifugation at 2 500g can result in a very compact pellet. A lower speed of 1 100g for 10 min with no
braking has been reported to give at least equivalent recoveries of Cryptosporidium oocysts and Giardia
cysts.
8.1, i)
Replace the text with the following:
Centrifuge the eluate at 2 500g for 10 min with no braking.

8.1, NOTE 2
Replace the text with the following:
Centrifugation at 2 500g can result in a very compact pellet. A lower speed of 1 100g for 10 min with no
braking has been reported to give at least equivalent recoveries of Cryptosporidium oocysts and Giardia
cysts.
8.2, g)
Replace the text with the following:
Centrifuge the eluate at 2 500g for 10 min with no braking.

8.2, NOTE 2
Replace the text with the following:
Centrifugation at 2 500g can result in a very compact pellet. A lower speed of 1 100g for 10 min with no
braking has been reported to give at least equivalent recoveries of Cryptosporidium oocysts and Giardia
cysts.
8.2, k)
Replace the text with the following:
Centrifuge the eluate at 2 500g for 10 min with no braking.

8.2, NOTE 3
Replace the text with the following:
Centrifugation at 2 500g can result in a very compact pellet. A lower speed of 1 100g for 10 min with no
braking has been reported to give at least equivalent recoveries of Cryptosporidium oocysts and Giardia
cysts.
ISO 18744:2016/Amd.1:2026(en)
8.5.2.2, NOTE 1, third sentence
Replace the text with the following:
Some Cryptosporidium species have diameters up to 8 μm (e.g. C. andersoni and C. muris, which can be
associated with infections in immunocompromised persons in rare cases).

10.1, first sentence
Replace the text with the following:
The result should be given as the presence or absence of Cryptosporidium oocysts and/or Giardia cysts
detected per weight of fresh produce sample examined.

10.2, i)
Replace the text with the following:
the presence or absence of Cryptosporidium oocysts and Giardia cysts, and any relevant details regarding
their identification and verification (e.g. size, DAPI-staining, morphological details);

After Annex C
Add the following as Annex D:
ISO 18744:2016/Amd.1:2026(en)
Annex D
(informative)
Method validation studies and performance characteristics
D.1 Background
The performance data for detection of Cryptosporidium on fresh leafy green vegetables and berry fruits
and for detection of Giardia on fresh leafy green vegetables (unpublished data, used with permission)
were calculated from the interlaboratory study organized by the Central Science Laboratory (CSL), Sand
[9]
Hutton, York, UK. The study was organized in 2001. The collaborators were all in the UK. The samples
tested in the study were Webb’s lettuce and raspberries. The samples were tested at three different levels of
contamination (low, medium and high), plus non-contaminated samples were tested. Artificial contamination
was performed by the organizing laboratory. The study was supported by the UK Food Standards Agency.
The test method used in the CSL interlaboratory trial was described
...


Norme
internationale
ISO 18744
Première édition
Microbiologie de la chaîne
2016-04-01
alimentaire — Recherche et
dénombrement de Cryptosporidium
AMENDEMENT 1
et Giardia dans les légumes verts
2026-06
frais à feuilles et les fruits à baies
AMENDEMENT 1: Études de validation
des méthodes et caractéristiques de
performance
Microbiology of the food chain — Detection and enumeration of
Cryptosporidium and Giardia in fresh leafy green vegetables and
berry fruits
AMENDMENT 1: Method validation studies and performance
characteristics
Numéro de référence
ISO 18744:2016/Amd.1:2026(fr) © ISO 2026

ISO 18744:2016/Amd.1:2026(fr)
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2026
Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii
ISO 18744:2016/Amd.1:2026(fr)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux. L’ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a
été rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir
www.iso.org/directives).
L’ISO attire l’attention sur le fait que la mise en application du présent document peut entraîner l’utilisation
d’un ou de plusieurs brevets. L’ISO ne prend pas position quant à la preuve, à la validité et à l’applicabilité de
tout droit de brevet revendiqué à cet égard. À la date de publication du présent document, l’ISO n’avait pas
reçu notification qu’un ou plusieurs brevets pouvaient être nécessaires à sa mise en application. Toutefois,
il y a lieu d’avertir les responsables de la mise en application du présent document que des informations
plus récentes sont susceptibles de figurer dans la base de données de brevets, disponible à l’adresse
www.iso.org/brevets. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir identifié tout ou partie de
tels droits de propriété.
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données pour
information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion de
l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au
commerce (OTC), voir www.iso.org/avant-propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 9,
Microbiologie, en collaboration avec le comité technique CEN/TC 463, Microbiologie de la chaîne alimentaire,
du Comité européen de normalisation (CEN) conformément à l’Accord de coopération technique entre l’ISO
et le CEN (Accord de Vienne).
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes se
trouve à l’adresse www.iso.org/fr/members.html.

iii
ISO 18744:2016/Amd.1:2026(fr)
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Recherche et
dénombrement de Cryptosporidium et Giardia dans les
légumes verts frais à feuilles et les fruits à baies
AMENDEMENT 1: Études de validation des méthodes et
caractéristiques de performance
Sommaire
Ajouter le texte suivant après l’Annexe C:
Annexe D (informative) Études de validation des méthodes et caractéristiques de performance
2. Références normatives
Remplacer “ISO 7218:2007” par “ISO 7218:2024”.
Article 6, première phrase
Remplacer le texte entre parenthèses par le suivant:
conformément à l’ISO 7218:2024.
7.2, première phrase
Remplacer le texte entre parenthèses par le suivant:
conformément à l’ISO 7218:2024, 9.2.
7.3, première phrase
Remplacer le texte entre parenthèses par le suivant:
conformément à l’ISO 7218:2024, 9.3.
7.4, première phrase
Remplacer le texte entre parenthèses par le suivant:
conformément à l’ISO 7218:2024, 9.4.

ISO 18744:2016/Amd.1:2026(fr)
8.1, NOTE 1
Remplacer le texte par ce qui suit:
Une centrifugation à 2 500g peut produire un culot très compact. Une vitesse moins élevée de 1 100g pendant
10 min sans frein s’est révélée donner des rendements de récupération d’oocystes de Cryptosporidium et de
kystes de Giardia au moins équivalents.
8.1, i)
Remplacer le texte par ce qui suit:
Centrifuger l’éluat à 2 500g pendant 10 min sans frein.
8.1, NOTE 2
Remplacer le texte par ce qui suit:
Une centrifugation à 2 500g peut produire un culot très compact. Une vitesse moins élevée de 1 100 g pendant
10 min sans frein s’est révélée donner des rendements de récupération d’oocystes de Cryptosporidium et de
kystes de Giardia au moins équivalents.
8.2, g)
Remplacer le texte par ce qui suit:
Centrifuger l’éluat à 2 500g pendant 10 min sans frein.
8.2, NOTE 2
Remplacer le texte par ce qui suit:
Une centrifugation à 2 500g peut produire un culot très compact. Une vitesse moins élevée de 1 100g pendant
10 min sans frein s’est révélée donner des rendements de récupération d’oocystes de Cryptosporidium et de
kystes de Giardia au moins équivalents.
8.2, k)
Remplacer le texte par ce qui suit:
Centrifuger l’éluat à 2 500g pendant 10 min sans frein.
8.2, NOTE 3
Remplacer le texte par ce qui suit:
Une centrifugation à 2 500g peut produire un culot très compact. Une vitesse moins élevée de 1 100g pendant
10 min sans frein s’est révélée donner des rendements de récupération d’oocystes de Cryptosporidium et de
kystes de Giardia au moins équivalents.
8.5.2.2, NOTE 1, troisième phrase
Remplacer le texte par ce qui suit:
ISO 18744:2016/Amd.1:2026(fr)
Certaines espèces de Cryptosporidium ont des diamètres pouvant atteindre 8 μm (par exemple, C. andersoni
et C. muris, qui peuvent être associées à des infections chez des personnes immunodéprimées dans de rares
cas).
10.1, première phrase
Remplacer le texte par ce qui suit:
Il convient d’exprimer le résultat sous la forme de présence ou l’absence d’oocystes de Cryptosporidium et/ou
de kystes de Giardia détectés par masse d’échantillon de produit frais examiné.

10.2, i)
Remplacer le texte par ce qui suit:
la présence ou l’absence d’oocystes de Cryptosporidium et de kystes de Giardia, ainsi que toute information
pertinente concernant leur identification et vérification (par exemple, taille, coloration au DAPI,
caractéristiques morphologiques);

Après l’Annexe C
Ajouter ce qui suit sous forme d’Annexe D:

ISO 18744:2016/Amd.1:2026(fr)
Annexe D
(informative)
Études de validation des méthodes et caractéristiques de
performance
D.1 Contexte
Les données de performance relatives à la recherche de Cryptosporidium sur les légumes verts frais à
feuilles et les fruits à baies et à la recherche de Giardia sur les légumes verts frais à feuilles (données non
publiées, utilisées sur autorisation) ont été calculées à partir de l’étude interlaboratoires organisée par le
[9]
Central Science Laboratory (CSL) de Sand Hutton, près de York au Royaume-Uni . L’étude date de 2001.
Les laboratoires participants se trouvaient tous au Royaume-Uni. Les échantillons soumis à essai dans le
cadre de l’étude étaient de la laitue (variété Webb) et des framboises. Des échantillons ont été soumis à
trois niveaux de contamination différents (faible, moyen et élevé), en plus d’échantillons non contaminés. La
contamination artificielle a été réalisée par le laboratoire organisateur. L’étude a été soutenue par l’Agence
britannique des normes alimentaires de l’époque.
La méthode d’essai utilisée dans l’essai interlaboratoires CSL a été décrite par la Référence [8].Cette méthode
a servi de base à l’ISO 18744:2016.
Pour chaque étude interlaboratoires, le LOD , son intervalle de confiance à 95 %, l’écart-type des effets de
laboratoire et le coefficient de corrélation intraclasse (CCI) ont été estimés à l’aide des méthodes décrites
dans la Référence [26]. Plus précisément, dans le cas des études interlaboratoires relatives à Cryptosporidium
sur la laitue et à Cryptosporidium sur les framboises, le LOD et son intervalle de confiance à 95 % ont été
estimés sur la base d’un modèle logarithme-logarithme complémentaire (LLC) à effet fixe. Dans le cas de
l’étude interlaboratoires relative à la Giardia sur la laitue, tous les paramètres ont été estimés sur la base
d’un modèle LLC à intercept aléatoire, qui est généralement recommandé pour une étude interlaboratoires
dans l’ISO 16140-2:2016, Annexe F. Cependant, il n’a pas été possible d
...