ISO 11133:2014/Amd 2:2020

DRAFT AMENDMENT
ISO 11133:2014/DAM 2
ISO/TC 34/SC 9 Secretariat: AFNOR
Voting begins on: Voting terminates on:
2017-12-12 2018-03-06
Microbiology of food, animal feed and water —
Preparation, production, storage and performance testing
of culture media
AMENDMENT 2
Microbiologie des aliments, des aliments pour animaux et de l'eau — Préparation, production, stockage et
essais de performance des milieux de culture
AMENDEMENT 2
ICS: 07.100.20; 07.100.30
Member bodies are requested to consult relevant national interests in ISO/TC
147/SC 4 before casting their ballot to the e-Balloting application.
THIS DOCUMENT IS A DRAFT CIRCULATED
This document is circulated as received from the committee secretariat.
FOR COMMENT AND APPROVAL. IT IS
THEREFORE SUBJECT TO CHANGE AND MAY
NOT BE REFERRED TO AS AN INTERNATIONAL
STANDARD UNTIL PUBLISHED AS SUCH.
IN ADDITION TO THEIR EVALUATION AS
ISO/CEN PARALLEL PROCESSING
BEING ACCEPTABLE FOR INDUSTRIAL,
TECHNOLOGICAL, COMMERCIAL AND
USER PURPOSES, DRAFT INTERNATIONAL
STANDARDS MAY ON OCCASION HAVE TO
BE CONSIDERED IN THE LIGHT OF THEIR
POTENTIAL TO BECOME STANDARDS TO
WHICH REFERENCE MAY BE MADE IN
Reference number
NATIONAL REGULATIONS.
ISO 11133:2014/DAM 2:2017(E)
RECIPIENTS OF THIS DRAFT ARE INVITED
TO SUBMIT, WITH THEIR COMMENTS,
NOTIFICATION OF ANY RELEVANT PATENT
RIGHTS OF WHICH THEY ARE AWARE AND TO
©
PROVIDE SUPPORTING DOCUMENTATION. ISO 2017

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the requester.
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Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the meaning of ISO specific terms and expressions related to conformity assessment,
as well as information about ISO's adherence to the World Trade Organization (WTO) principles in the
Technical Barriers to Trade (TBT) see the following URL: www.iso.org/iso/foreword.html.
The committee responsible for this document is ISO/34, Food products, Subcommittee SC 9, Microbiology.
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ISO 11133:2014/DAM 2:2017(E)
Microbiology of food, animal feed and water —
Preparation, production, storage and performance testing
of culture media
AMENDMENT 2
Annex K
(normative)

Performance testing of confirmation media and reagents
K.1  General
This Annex specifies control strains for the performance testing of confirmation and characterization
media, reagents, dyes, stains and materials described in standards for the microbiological examination
of samples from the food chain and water.
For the microbiological media and reagents under test, the inoculum used is a subculture of an isolated
colony. Therefore the method of performance testing for these products is qualitative.
The shortest permissible incubation time in the International Standard should be used for the positive
control organism(s), whilst the longest permissible incubation time should be used for the negative
control organisms.
The strains chosen in Table K.1 have been selected preferentially from those already cited in
ISO 11133:2014. If a suitable strain was not available from this source, a strain from the catalogue of
[20]
organisms compiled by the World Data Centre for Microorganisms (WDCM) has been selected.
In most cases, more than one control strain has been listed in Table K1 for both positive and negative
reactions. The user may choose any of the strains cited for positive and negative reactions. Refer to the
relevant standard for the expected results for the target organism.
If control strains for performance testing of confirmation media and reagents are already specified
in the International Standard, for example as in ISO 10272 (Campylobacter) and ISO 10273 (Yersinia
enterocolitica), they have not been included in Table K.1. In addition, serological reagents have not been
included.
If commercially-sourced media or reagents are used, follow the manufacturer’s instructions, including
time, temperature and conditions of performance. If the instructions do not include control strains,
choose a positive and a negative strain from Table K.1.
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Table A.1 — Control strains for confirmation media and reagents included in ISO standards
from ISO/TC 34/SC 9, ISO/TC34/SC 5 and ISO/TC 147/SC 4
b
Confirmation me- WDCM
a
ISO Standard Function Control strains Characteristic reactions
dium/ reagent numbers
Positive reaction:
00024
Yellow to brick red after
Pseudomonas aeruginosa 00025
adding 1-2 drops of Ness-
00026
ler’s reagent
Acetamide broth Detection of ammonia
with Nessler’s 16266 production from aceta-
00012
reagent mide
Negative reaction:
00013
Escherichia coli
No yellow to brick red
00090
colour
00179
00012
Positive reaction:
00013
Blue colonies with sur-
Escherichia coli
00179 rounding medium blue/
Acetate agar
green
00090
21567 Growth on acetate
(Sodium acetate
Negative reaction:
agar)
Shigella.sonnei 00127
No growth or very weak
growth, no colour change
Shigella flexneri 00125
of the medium (remains
green)
00007
Positive reaction:
Clostridium perfringens 00080
Purplish colour
Acid phosphatase Detection of acid phos-
14189
00174
reagent phatase
Negative reaction:
Clostridium bifermentans 00079
No purplish colour
Positive reaction:
Vibrio
00137
turbidity and violet/pur-
Detection of L-Arginine
fluvialis
Arginine dihydro-
ple colour
21872
lase saline medium
dihydrolase
00037 Negative reaction:
Vibrio parahaemolyticus
00185 yellow colour
00009
Enterococcus faecalis 00087
Positive reaction:
00176
Tan to black colour in the
surrounding medium
00177
Enterococcus faecium
00178
Bile-aesculin-azide Detection of aesculin
7899-2
agar hydrolysis
Aerococcus viridans 00061
00012
Negative reaction:
00013
No tan to black colour in
Escherichia coli
the surrounding medium
00090
00179
a
Strain free of choice
b
Make reference to the reference strain catalogue available on http://www.wfcc.info for information on culture collection strain numbers and contact
details [20]
c
Some national restrictions and directions may require the use of a different serovar. Make reference to national requirements relating to the choice of
Salmonella serovars
d
Non-toxigenic strain of E.coli serotype O157
e
Weak coagulase - producing strain of S.aureus
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Table A.1 (continued)
b
Confirmation me- WDCM
a
ISO Standard Function Control strains Characteristic reactions
dium/ reagent numbers
Positive reaction:
Enhanced zone of
00020
β-haemolysis at the inter-
Listeria monocytogenes
CAMP medium with section of the test strain
00021
with each of the cultures of
Staphylococcus au-
11290-1
Detection of CAMP
Staphylococcus aureus and
reus WDCM 00034
reaction
11290-2
Rhodococcus equi
and Rhodococcus
equi WDCM 00028
Negative reaction:
Listeria ivanovii 00018
No enhanced zone
L.innocua 00017 No zone
00012
11290-1
00013
Carbohydrate utili-
Positive reaction: Change
11290-2
Escherichia coli
zation broths with
of colour to yellow
Detection of carbohy- 00090
different carbohy- 21567
drate fermentation
drates and different
000179
10273
indicators
Negative reaction: no
22964 Proteus mirabilis 00123
change in colour
00032
Staphylococcus aureus 00034
00090
Campylobacter jejuni 00005
Positive reaction: Forma-
tion of bubbles of oxygen
00020
Listeria monocytogenes
9232
00021
10272-1
Listeria innocua 00017
Catalase reagent Detection of catalase
(3 % hydrogen per- 10272-2 after adding hydrogen
Listeria ivanovii 00018
oxide solution) peroxide solution
11290-1
00009
11290-2
E.faecalis 00087
00176 Negative reaction:
00177 No formation of bubbles
Enterococcus faecium
of oxygen
00178
Lactobacillus delbreuckii
00121
ssp. bulgaricus
Enterobacter aerogenes 00175 Positive reaction:
cream/pink growth with
Enterobacter cloacae 00083
surrounding medium red
Citrate agar (Chris-
tensen’s citrate 21567 Growth on citrate
Shigella sonnei 00127
agar)
Negative reaction: No
00125
growth
Shigella flexneri
00126
00012
00013 Positive reaction:
Escherichia coli
11059
Glucose agar 00090 Yellow colour
Production of acid
21528-1
O-F medium with 00179
from glucose
overlay
21528-2
Pseudomonas aeruginosa 00025 Negative reaction:
growth, but no yellow
Pseudomonas fluorescens 00115
colour development
a
Strain free of choice
b
Make reference to the reference strain catalogue available on http://www.wfcc.info for information on culture collection strain numbers and contact
details [20]
c
Some national restrictions and directions may require the use of a different serovar. Make reference to national requirements relating to the choice of
Salmonella serovars
d
Non-toxigenic strain of E.coli serotype O157
e
Weak coagulase - producing strain of S.aureus
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ISO 11133:2014/DAM 2:2017(E)

Table A.1 (continued)
b
Confirmation me- WDCM
a
ISO Standard Function Control strains Characteristic reactions
dium/ reagent numbers
Positive reaction:
Agar layer detaches
Lactobacillus brevis 00099
itself from the underlying
Glucose MRS broth Detection of CO pro-
2
contents
9232
with overlay agar duction
Negative reaction:
Lactobacillus delbruckei
00102
no gas production, agar
ssp. bulgaricus
layer not detached.
00012
00013
Indole reaction d
Escherichia coli 00014
medium/ reagent
00090
Tryptone/ tryp-
6579 Positive reaction: Forma-
00179
tophan medium
tion of a red ring within
with indole reagent
16654
00037
10 min
(Kovac’s reagent)
21567
Vibrio parahaemolyticus 00138
Detection of indole for-
Tryptone/
mation from tryptophan
21872
00185
tryptophan saline
11866-1
Vibrio cholerae 00203
medium with indole
reagent (Kovacs
11866-2 Vibrio vulnificus 00139
reagent)
Enterobacter aerogenes 00175
Indole reagent
Negative reaction:
(Kovacs reagent) Citrobacter freundii 00006
Yellow/brown ring within
Salmonella Typhimurium 00031
10 min
Salmonella Enteritidis 00030
00012
Positive reaction:
00013
Escherichia coli
Development of a pink col-
00090
our within a few minutes
Indole reagent Detection of indole for-
00179
(Vracko and Sherris mation on membrane
Enterobacter aerogenes 00175
reagent) filters
Citrobacter freundii 00006
Negative reaction: no pink
colour development
Salmonella Typhimurium 00031
Salmonella Enteritidis 00030
Positive reaction:
00024
presence of fluorescence
Pseudomonas aeruginosa 00025
under UV radiation
00026
(360 ± 20) nm
King’s B medium 16266 Detection of fluorescein
00012
00013
Negative reaction: no
Escherichia coli
fluorescence
00090
00179
a
Strain free of choice
b
Make reference to the reference strain catalogue available on http://www.wfcc.info for information on culture collection strain numbers and contact
details [20]
c
Some national restrictions and directions may require the use of a different serovar. Make reference to national requirements relating to the choice of
Salmonella serovars
d
Non-toxigenic strain of E.coli serotype O157
e
Weak coagulase - producing strain of S.aureus
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ISO 11133:2014/DAM 2:2017(E)

Table A.1 (continued)
b
Confirmation me- WDCM
a
ISO Standard Function Control strains Characteristic reactions
dium/ reagent numbers
00012
Gram-negative:
00013
KOH
Escherichia coli
The colony material be-
00090
(Reagent for Gram
comes stringy
typing test) 17995 Gram Typing
00179
(3% potassium hy-
Gram-positive:
00032
droxide solution)
Staphylococcus aureus
Colony material remains
00034
smooth
Positive reaction:
Clostridium perfringens 00007
Presence of gas, yellow col-
Detection of gas forma-
our and gelatin liquefaction
Lactose-gelatin
7937 tion, acid formation and
medium
Negative reaction:
gelatin liquefaction
Hafnia alvei 00095
No colour change or red,
no gelatin liquefaction
Positive reaction:
Gas production: Durham
tubes more than one quar-
Clostridium perfringens 00007
ter full of gas
Detection of lactose fer-
LS (Lactose sulfite)
7937 mentation and sulfite
Iron sulfite production: for-
medium
reduction mation of black precipitate
Negative reaction:
Clostridium sporogenes 00008
Gas production but no
blackening
Salmonella
00031
c
Typhimurium
Positive reaction: Medium
6579 c
remains purple after incu-
Salmonella Enteritidis 00030
bation and is turbid
Lysine decarboxy-
21567
Enterobacter aerogenes 00175
lase medium
Detection of L-Lysine
19250 Vibrio parahaemolyticus 00185
decarboxylase (LDC)
Lysine decarboxy-
Proteus mirabilis 00023
21872
lase saline medium
Negative reaction:
Citrobacter freundii 0006
22964
Medium changes from
Cronobacter sakazakii 00214
purple to yellow
Cronobacter muytjensis 00213
Positive reaction:
Bacillus cereus 00001
Detection of spores by
Green stained spores
Malachite green
21871 microscopic examina-
oxalate solution
Negative reaction:
tion
none —
No green-stained spores
a
Strain free of choice
b
Make reference to the reference strain catalogue available on http://www.wfcc.info for information on culture collection strain numbers and contact
details [20]
c
Some national restrictions and directions may require the use of a different serovar. Make reference to national requirements rela
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 11133
Première édition
2014-05-15
AMENDEMENT 2
2020-05
Microbiologie des aliments, des
aliments pour animaux et de l'eau —
Préparation, production, stockage et
essais de performance des milieux
de culture
AMENDEMENT 2
Microbiology of food, animal feed and water — Preparation,
production, storage and performance testing of culture media
AMENDMENT 2
Numéro de référence
ISO 11133:2014/Amd.2:2020(F)
©
ISO 2020

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DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2020
Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
E-mail: copyright@iso.org
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Publié en Suisse
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Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/ directives).
L’attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/ brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion
de l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/ iso/ fr/ avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le Comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires,
sous-comité SC 9, Microbiologie, en collaboration avec le Comité technique ISO/TC 147, Qualité de l'eau,
et en collaboration avec le Comité européen de normalisation (CEN) Comité technique CEN/TC 463,
Microbiologie de la chaîne alimentaire, conformément à l’Accord de coopération technique entre l’ISO et
le CEN (Accord de Vienne).
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/ fr/ members .html.
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Microbiologie des aliments, des aliments pour animaux et
de l'eau — Préparation, production, stockage et essais de
performance des milieux de culture
AMENDEMENT 2

Fin de 5.2 (avant la NOTE)
Ajouter la phrase suivante:
L’Annexe K indique les micro-organismes d’essai à utiliser pour les milieux de confirmation et réactifs
des Normes internationales spécifiées pour la microbiologie des aliments et de l’eau.

5.4.1, première phrase
Remplacer la phrase par le texte suivant:
Des micro-organismes adaptés aux essais de performance de routine sont répertoriés dans les Annexes
E, F et K.

Fin de 6.6.1
Ajouter la phrase suivante:
Des souches test adaptées sont décrites dans l’Annexe K.

6.6.2, après la deuxième phrase
Ajouter la phrase suivante:
Des souches test adaptées sont décrites dans l’Annexe K.

Annexe K
Ajouter le texte suivant en tant que nouvelle annexe.
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Annexe K
(normative)

Essais de performance des milieux de confirmation et des réactifs
La présente annexe spécifie les souches de contrôle pour les essais de performance des milieux de
confirmation et de caractérisation, des réactifs, colorants et matériaux décrits dans les normes dédiées
à l’examen microbiologique d’échantillons issus de la chaîne alimentaire et de l’eau.
Pour les milieux de culture et réactifs soumis à essai, l’inoculum utilisé correspond à un repiquage
d’une colonie isolée. Par conséquent, la méthode d’essais de performance employée pour ces produits
est qualitative.
Il convient que le temps d’incubation le plus court autorisé, spécifié dans la Norme internationale pour
l’essai de confirmation ou de caractérisation, soit employé pour les micro-organismes de contrôle
positif, tandis qu’il convient que le temps d’incubation le plus long autorisé soit employé pour les
micro-organismes de contrôle négatif.
Les souches indiquées dans le Tableau K.1 ont été sélectionnées de façon préférentielle parmi les
souches déjà mentionnées dans ce document. Si aucune souche provenant de cette source n’était
adaptée, une souche citée dans le catalogue des micro-organismes compilé par le World Data Centre for
[20]
Microorganisms (WDCM) a été sélectionnée.
Dans la plupart des cas, plusieurs souches de contrôle sont répertoriées dans le Tableau K.1 pour les
réactions positives et négatives. L’utilisateur peut choisir n’importe laquelle des souches mentionnées
pour les contrôles positifs et négatifs.
Si les souches de contrôle pour les essais de performance de milieux de confirmation ou de
caractérisation, de réactifs, colorants et matériaux sont déjà spécifiées dans la Norme internationale,
par exemple comme dans l’ISO 10272-1 et l’ISO 10272-2 (Campylobacter) et l’ISO 10273 (Yersinia
enterocolitica), ces dernières n’ont pas été ajoutées au Tableau K.1. En outre, les réactifs sérologiques
n’ont pas été inclus.
Si les milieux ou réactifs sont de sources commerciales, il convient de respecter les instructions
du fabricant, y compris le temps, la température et les états de performance. Si ces instructions ne
comprennent pas de souches de contrôle, sélectionner une souche positive et une négative dans le
Tableau K.1. Voir l’Article 6 pour connaître les exigences.
2 © ISO 2020 – Tous droits réservés

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Tableau K.1 — Souches de contrôle pour les milieux de confirmation et de caractérisation,
réactifs, colorants et matériaux incluses dans les documents provenant des comités techniques
ISO/TC 34/SC 9, ISO/TC 34/SC 5 et ISO/TC 147/SC 4
Norme inter- Souches de Numéros
Milieu/réactif Fonction Réactions caractéristiques
a b
nationale contrôle WDCM
Réaction positive:
00024
Pseudomonas
Couleur jaune à rouge
00025
aeruginosa
brique après avoir ajouté 1 à
Détection de la
00026
2 gouttes de réactif de Nessler
production
Bouillon à l’acétamide
ISO 16266 d’ammoniac
00012
avec réactif de Nessler
à partir de
Réaction négative:
00013
l’acétamide
Escherichia coli
Absence de couleur jaune à
00090
rouge brique
00179
00012
Réaction positive:
00013
Escherichia coli
Colonies bleues avec halo de
00090
milieu bleu/vert
Gélose à l’acétate
00179
Croissance sur la
ISO 21567
(gélose à l’acétate de
gélose à l’acétate
Shigella sonnei 00127 Réaction négative:
sodium)
Absence de croissance ou très
faible croissance, sans
Shigella flexneri 00125
changement de couleur
du milieu (reste vert)
00007
Réaction positive:
Clostridium
00080
Couleur mauve/pourpre/
perfringens
Détection de la
violette
Réactif à la phosphatase 00174
ISO 14189 phosphatase
acide
acide
Réaction négative:
Clostridium
00079
Absence de couleur mauve/
bifermentans
pourpre/violette
Réaction positive:
Vibrio fluvialis 00137
Turbidité et couleur vio-
Milieu salé pour la Détection de la
lette/pourpre
détection de l’arginine ISO 21872-1 L-Arginine
dihydrolase dihydrolase
00037 Réaction négative:
Vibrio
parahaemolyticus
00185 Couleur jaune
00009
00087
Enterococcus faecalis
Réaction positive:
00176
Couleur brune à noire du halo

de milieu
00177
Enterococcus faecium
Détection de
00178
Gélose bile esculine
ISO 7899-2 l’hydrolyse de
azoture
Aerococcus viridans 00061
l’esculine

Réaction négative:
00012
Absence de couleur brune à
00013
Escherichia coli
noire du halo de milieu
00090
00179
a
Libre choix de la souche, mais au moins l’une des souches doit être utilisée.
b
Se référer au catalogue des souches de référence disponible à l’adresse http:// www .wfcc .info pour obtenir des informations sur les numéros des
[20]
souches de culture et les coordonnées .
c
Certaines restrictions nationales et directives peuvent nécessiter l’utilisation d’un sérovar différent. Se référer aux exigences nationales relatives au
choix des sérovars de Salmonella.
d
Souche de S. aureus à coagulase faible.
© ISO 2020 – Tous droits réservés 3

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ISO 11133:2014/Amd.2:2020(F)

Tableau K.1 (suite)
Norme inter- Souches de Numéros
Milieu/réactif Fonction Réactions caractéristiques
a b
nationale contrôle WDCM
00012
Réaction positive:
00013
Escherichia coli
Production de gaz dans le
00090
tube de Durham
ISO 4831
Bouillon lactosé bilié au Détection de
00179
vert brillant production de gaz
ISO 4832
00009
Réaction négative:
Enterococcus faecalis 00087
Absence de production de gaz
dans le tube de Durham
00176
Réaction positive:
00020
Zone étroite de β-hémolyse
Listeria
à l’intersection de la souche
monocytogenes
00021
d’essai avec Staphylococcus
aureus
Milieu pour test de CAMP
avec Staphylococcus
ISO 11290-1 Large zone de β-hémolyse, en
Réaction au test de
aureus WDCM 00034
Listeria ivanovii 00018 pointe de flèche à l’intersec-
CAMP
ISO 11290-2
et Rhodococcus equi
tion avec Rhodococcus equi
WDCM 00028
Réaction négative:
Listeria ivanovii 00018
Aucune zone de β-hémolyse
avec Staphylococcus aureus
Listeria innocua 00017 Aucune zone
00012
00013
Réaction positive:
Escherichia coli
00090
La couleur devient jaune
ISO 11290-1
00179
Bouillons pour

ISO 11290-2
l’utilisation des
Détection de la
glucides avec
00021
ISO 21567 fermentation
Listeria
différents glucides Rhamnose: jaune
glucidique monocytogenes
00109
et différents
ISO 10273
indicateurs
Réaction négative:
ISO 22964
Proteus mirabilis 00023
Aucun changement de couleur
00021
Listeria
Xylose; aucun changement
monocytogenes
00109
a
Libre choix de la souche, mais au moins l’une des souches doit être utilisée.
b
Se référer au catalogue des souches de référence disponible à l’adresse http:// www .wfcc .info pour obtenir des informations sur les numéros des
[20]
souches de culture et les coordonnées .
c
Certaines restrictions nationales et directives peuvent nécessiter l’utilisation d’un sérovar différent. Se référer aux exigences nationales relatives au
choix des sérovars de Salmonella.
d
Souche de S. aureus à coagulase faible.
4 © ISO 2020 – Tous droits réservés

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ISO 11133:2014/Amd.2:2020(F)

Tableau K.1 (suite)
Norme inter- Souches de Numéros
Milieu/réactif Fonction Réactions caractéristiques
a b
nationale contrôle WDCM
00032
Staphylococcus
aureus
00034


Campylobacter 00005
jejuni
Réaction positive:
00020
Listeria Formation de bulles d’oxygène
00021
monocytogenes

ISO 9232
Listeria innocua 00017
Détection de la
ISO 10272-1

Réactif à la catalase catalase après l’ajout
(solution de peroxyde ISO 10272-2 de la solution de
Listeria ivanovii 00018
d’hydrogène à 3 %) peroxyde
ISO 11290-1
d’hydrogène 00009
ISO 11290-2
00087
Enterococcus faecalis
00176
Réaction négative:

00177 Aucune formation de bulles
Enterococcus faecium
d’oxygène
00178
Lactobacillus
delbrueckii sous- 00121
espèce bulgaricus
Enterobacter Réaction positive:
00175
aerogenes
Croissance de couleur crème/
Enterobacter cloacae 00083 rose avec halo de milieu rouge
Gélose au citrate (gélose Croissance sur la
ISO 21567 Shigella sonnei 00127
au citrate de Christensen) gélose au citrate

Réaction négative:
00125
Absence de croissance
Shigella flexneri
00126
00012
00013 Réaction positive:
Escherichia coli
00090 Couleur jaune
00179
ISO/TS 11059
Gélose au glucose
Production d’acide à
00024
ISO 21528-1
Milieu OF avec seconde
partir du glucose
couche
Pseudomonas 00025
ISO 21528-2
Réaction négative:
aeruginosa
00026
Croissance, mais sans appari-

tion de couleur jaune
Pseudomonas
00115
fluorescens
Réaction positive:
Lactobacillus brevis 00099
La couche de gélose se détache
du composant sous-jacent
Bouillon MRS glucosé avec Détection de la
ISO 9232
Réaction négative:
gélose de seconde couche production de CO
2
Lactobacillus
Aucune production de gaz,
delbrueckii sous- 00102
la couche de gélose ne se
espèce bulgaricus
détache pas
a
Libre choix de la souche, mais au moins l’une des souches doit être utilisée.
b
Se référer au catalogue des souches de référence disponible à l’adresse http:// www .wfcc .info pour obtenir des informations sur les numéros des
[20]
souches de culture et les coordonnées .
c
Certaines restrictions nationales et directives peuvent nécessiter l’utilisation d’un sérovar différent. Se référer aux exigences nationales relatives au
choix des sérovars de Salmonella.
d
Souche de S. aureus à coagulase faible.
© ISO 2020 – Tous droits réservés 5

---------------------- Page: 8 ----------------------
ISO 11133:2014/Amd.2:2020(F)

Tableau K.1 (suite)
Norme inter- Souches de Numéros
Milieu/réactif Fonction Réactions caractéristiques
a b
nationale contrôle WDCM
00012
00013
Milieu/réactif de
Escherichia coli
détection de l’indole
00090
00179
Réaction positive:
ISO 6579-1
00037
Milieu tryptone/
ISO 9308-1 Formation d’un anneau rouge
tryptophane avec Vibrio
00138
dans les 10 min
réactif d’indole parahaemolyticus
ISO 16654
(réactif de Kovac)
00185
Détection de la
ISO 21567
formation d’indole
à partir du
Vibrio cholerae 00203
Milieu salé tryptone/
tryptophane

tryptophane avec réactif ISO 21872-1
d’indole (réactif de Kovac)
Vibrio vulnificus 00139
Réactif d’indole Enterobacter
ISO 11866-1 00175
(réactif de Kovac) aerogenes
Citrobacter freundii 00006 Réaction négative:
Salmonella Anneau jaune/brun dans les
 00031
c
Typhimurium 10 min
Salmonella
00030
c
Enteritidis
00012
Réaction positive:
00013
Apparition d’une couleur
Escherichia coli
00090 rose en l’espace de quelques
minutes
00179
Détection de la
Réactif d’indole (réactif de formation d’indole Enterobacter
00175
ISO 11866-2
aerogenes
Vracko et de Sherris) sur les membranes
filtrantes
Citrobacter freundii 00006 Réaction négative:
Salmonella Aucune apparition de
00031
c
Typhimurium couleur rose
Salmonella
00030
c
Enteritidis
00024
Réaction positive:
Pseudomonas
00025
Présence d’une fluorescence
aeruginosa
sous lampe UV (360 ± 20) nm
00026
Détection de la
Milieu King B ISO 16266 00012
fluorescéine
00013 Réaction négative:
Escherichia coli
00090 Aucune fluorescence
00179
a
Libre choix de la souche, mais au moins l’une des souches doit être utilisée.
b
Se référer au catalogue des souches de référence disponible à l’adresse http:// www .wfcc .info pour obtenir des informations sur les numéros des
[20]
souches de culture et les coordonnées .
c
Certaines restrictions nationales et directives peuvent nécessiter l’utilisation d’un sérovar différent. Se référer aux exigences nationales relatives au
choix des sérovars de Salmonella.
d
Souche de S.
...

PROJET D’AMENDEMENT
ISO 11133:2014/DAM 2
ISO/TC 34/SC 9 Secrétariat: AFNOR
Début de vote: Vote clos le:
2017-12-12 2018-03-06
Microbiologie des aliments, des aliments pour animaux et
de l'eau — Préparation, production, stockage et essais de
performance des milieux de culture
AMENDEMENT 2
Microbiology of food, animal feed and water — Preparation, production, storage and performance testing
of culture media
AMENDMENT 2
ICS: 07.100.20; 07.100.30
Il est demandé aux comités membres de consulter les intérêts nationaux
respectifs concernant l’ISO/TC 147/SC 4 avant de donner leur position sur la
plateforme de e-Balloting.
CE DOCUMENT EST UN PROJET DIFFUSÉ POUR
OBSERVATIONS ET APPROBATION. IL EST DONC
SUSCEPTIBLE DE MODIFICATION ET NE PEUT
Le présent document est distribué tel qu’il est parvenu du secrétariat du comité.
ÊTRE CITÉ COMME NORME INTERNATIONALE
AVANT SA PUBLICATION EN TANT QUE TELLE.
OUTRE LE FAIT D’ÊTRE EXAMINÉS POUR
ÉTABLIR S’ILS SONT ACCEPTABLES À DES
FINS INDUSTRIELLES, TECHNOLOGIQUES ET
COMMERCIALES, AINSI QUE DU POINT DE VUE TRAITEMENT PARALLÈLE ISO/CEN
DES UTILISATEURS, LES PROJETS DE NORMES
INTERNATIONALES DOIVENT PARFOIS ÊTRE
CONSIDÉRÉS DU POINT DE VUE DE LEUR
POSSIBILITÉ DE DEVENIR DES NORMES
POUVANT SERVIR DE RÉFÉRENCE DANS LA
RÉGLEMENTATION NATIONALE.
Numéro de référence
LES DESTINATAIRES DU PRÉSENT PROJET
ISO 11133:2014/DAM 2:2017(F)
SONT INVITÉS À PRÉSENTER, AVEC LEURS
OBSERVATIONS, NOTIFICATION DES DROITS
DE PROPRIÉTÉ DONT ILS AURAIENT
ÉVENTUELLEMENT CONNAISSANCE ET À
©
FOURNIR UNE DOCUMENTATION EXPLICATIVE. ISO 2017

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 11133:2014/DAM 2:2017(F) ISO 11133:2014/DAM 2:2017(F)

Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le
droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2
(voir www.iso.org/directives).
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet
de droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour
responsable de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails
concernant les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés
lors de l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations
de brevets reçues par l’ISO (voir www.iso.org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité à l'intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la signification des termes et expressions spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation
de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion de l'ISO aux principes de
l'Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au commerce (OTC)
voir le lien suivant: www.iso.org/iso/fr/foreword.html.
Le comité chargé de l'élaboration du présent document est l'ISO/34, Produits alimentaires, sous‐comité
SC 9, Microbiologie.

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© ISO 2017
Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en oeuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
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CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
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Fax +41 22 749 09 47
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www.iso.org
Publié en Suisse
© ISO 2017 – Tous droits réservés
iii
ii © ISO 2017 – Tous droits réservés

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ISO 11133:2014/DAM 2:2017(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le
droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
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décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2
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de droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour
responsable de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails
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de brevets reçues par l’ISO (voir www.iso.org/brevets).
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l'Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au commerce (OTC)
voir le lien suivant: www.iso.org/iso/fr/foreword.html.
Le comité chargé de l'élaboration du présent document est l'ISO/34, Produits alimentaires, sous‐comité
SC 9, Microbiologie.

© ISO 2017 – Tous droits réservés
iii

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PROJET D'AMENDEMENT ISO 11133:2014/DAM 2:2017(F)

Microbiologie des aliments, des aliments pour animaux et de
l’eau — Préparation, production, stockage et essais de
performance des milieux de culture — AMENDEMENT 2
Annexe K
(normative)

Essais de performance des milieux de confirmation et des réactifs
K.1 Généralités
La présente Annexe spécifie les souches de contrôle pour les essais de performance des milieux de
confirmation et de caractérisation, des réactifs, colorants et matériaux décrits dans les normes dédiées
à l’examen microbiologique d’échantillons issus de la chaîne alimentaire et de l’eau.
Pour les milieux de culture et réactifs soumis à essai, l’inoculum utilisé correspond à un repiquage d’une
colonie isolée. Par conséquent, la méthode d’essais de performance employée pour ces produits est
qualitative.
Pour les microorganismes de contrôle positif, il convient d’employer le temps d’incubation le plus court
autorisé par la Norme internationale. Au contraire, il convient d’employer le temps d’incubation le plus
long autorisé pour les microorganismes de contrôle négatif.
Les souches indiquées dans le Tableau K.1 ont été sélectionnées de façon préférentielle parmi les
souches mentionnées dans l’ISO 11133:2014. Si aucune souche provenant de cette source n’est adaptée,
une souche provenant du catalogue des microorganismes compilé par le World Data Centre for
[20]
Microorganisms (WDCM) a été sélectionnée.
Dans la plupart des cas, plusieurs souches de contrôle sont répertoriées dans le Tableau K.1 pour les
réactions positives et négatives. L’utilisateur peut choisir n’importe laquelle des souches mentionnées
pour les contrôles positifs et négatifs. Il convient de se reporter à la norme correspondante pour
connaître les résultats attendus pour l’organisme cible.
Si les souches de contrôle pour les essais de performance des milieux de confirmation et réactifs sont
déjà spécifiées dans la Norme internationale, par exemple comme dans l’ISO 10272 (Campylobacter)
et l’ISO 10273 (Yersinia enterocolitica), ces dernières n’ont pas été ajoutées au Tableau K.1. En outre, les
réactifs sérologiques n’ont pas été inclus.
Si les milieux ou réactifs sont de sources commerciales, il convient de respecter les instructions du
fabricant, y compris le temps, la température et les conditions de performance. Si ces instructions ne
comprennent pas de souches de contrôle, sélectionnez une souche positive et une négative dans
le Tableau K.1.
© ISO 2017 – Tous droits réservés
1

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 11133:2014/DAM 2:2017(F)
Tableau A.1 — Souches de contrôle pour les milieux de confirmation et réactifs inclus dans les
normes ISO provenant des comités techniques ISO/TC 34/SC 9, ISO/TC34/SC 5 et
ISO/TC 147/SC 4
Milieu de Numéros
a
Norme ISO Fonction Souches de contrôle Réactions caractéristiques
b
confirmation/réactif WDCM
Réaction positive :
00024
couleur jaune à rouge brique
Pseudomonas aeruginosa 00025
après avoir ajouté 1 ou
00026
2 gouttes de réactif de Nessler
Détection de la
Bouillon à l’acétamide
16266 production d’ammoniac
avec réactif de Nessler 00012
à partir de l’acétamide
Réaction négative :
00013
Escherichia coli
absence de couleur jaune à
00090
rouge brique
00179
00012
Réaction positive :
00013
colonies bleues avec milieu
Escherichia coli
00179 entourant la colonie de
couleur bleue/verte
Gélose à l’acétate
00090
21567 Croissance sur acétate
(gélose à l’acétate de
Réaction négative :
sodium)
absence de croissance ou très
Shigella sonnei 00127
faible croissance, sans
Shigella flexneri 00125
changement de couleur du
milieu (reste vert)
00007
Réaction positive :
Clostridium perfringens 00080
couleur violacée
Réactif à la phosphatase Détection de la
00174
14189
acide phosphatase acide
Réaction négative :
Clostridium bifermentans 00079
absence de couleur violacée
Réaction positive :
Vibrio
00137
turbidité et couleur
Détection de la
Milieu salé pour la
fluvialis
violette/pourpre
L‐arginine
détection de l’arginine 21872
dihydrolase
dihydrolase
00037 Réaction négative :
Vibrio parahaemolyticus
00185 couleur jaune
00009
Enterococcus faecalis 00087
Réaction positive :
00176
couleur brune à noire du
milieu entourant la colonie
00177
Enterococcus faecium
00178
Gélose bile‐esculine‐ Détection de l’hydrolyse
7899‐2
azide de l’esculine
Aerococcus viridans 00061
Réaction négative :
00012
absence de couleur brune à
00013
noire du milieu entourant la
Escherichia coli
00090
colonie
00179
© ISO 2017 – Tous droits réservés
2

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ISO 11133:2014/DAM 2:2017(F)
Milieu de Numéros
a
Norme ISO Fonction Souches de contrôle Réactions caractéristiques
b
confirmation/réactif WDCM
Réaction positive :
Zone de β‐hémolyse à
00020
l’intersection de la souche
Listeria monocytogenes
Milieu de CAMP avec
00021 d’essai avec chacune des
Staphylococcus aureus
11290‐1
cultures de Staphylococcus
Détection de la réaction
WDCM 00034 et
aureus et Rhodococcus equi
de CAMP
11290‐2
Rhodococcus equi
WDCM 00028 Réaction négative :
Listeria ivanovii 00018
aucune zone d’hémolyse
L.innocua 00017 Aucune zone
00012
11290‐1
00013
Réaction positive : la couleur
Bouillons pour
11290‐2 Escherichia coli
devient jaune
00090
l’utilisation des glucides Détection de la
21567
avec différents glucides fermentation glucidique
000179
10273
et différents indicateurs
Réaction négative : aucun
22964
Proteus mirabilis 00123
changement de couleur
00032
Staphylococcus aureus 00034
00090
Campylobacter jejuni 00005
Réaction positive : formation
de bulles d’oxygène
00020
Listeria monocytogenes
00021
9232
Détection de la catalase
10272‐1 Listeria innocua 00017
Réactif à la catalase
après l’ajout de la
(solution de peroxyde 10272‐2
Listeria ivanovii 00018
solution de peroxyde
d’hydrogène à 3 %)
11290‐1
d’hydrogène
00009
11290‐2
E.faecalis 00087
00176
Réaction négative :
00177 aucune formation de bulles
Enterococcus faecium
d’oxygène
00178
Lactobacillus delbreuckii
00121
ssp. bulgaricus
Enterobacter aerogenes 00175 Réaction positive :
croissance de couleur
crème/rose avec milieu rouge
Enterobacter cloacae 00083
Gélose au citrate (gélose
entourant la colonie
au citrate de 21567 Croissance sur citrate
Christensen) Shigella sonnei 00127
Réaction négative : absence de
00125
croissance
Shigella flexneri
00126
00012
00013 Réaction positive :
Escherichia coli
11059 00090 couleur jaune
Gélose au glucose
Production d’acide à
21528‐1 00179
Milieu OF avec seconde
partir du glucose
couche
21528‐2
Pseudomonas aeruginosa 00025 Réaction négative :
croissance, mais sans
Pseudomonas fluorescens 00115
apparition de couleur jaune
© ISO 2017 – Tous droits réservés
3

---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 11133:2014/DAM 2:2017(F)
Milieu de Numéros
a
Norme ISO Fonction Souches de contrôle Réactions caractéristiques
b
confirmation/réactif WDCM
Réaction positive :
Lactobacillus brevis 00099
la couche de gélose se détache
des composants sous‐jacents
Bouillon MRS glucosé
Détection de la
avec gélose de seconde 9232
Réaction négative :
production de CO2
couche
Lactobacillus delbruckei
aucune production de gaz, la
00102
ssp. bulgaricus
couche de gélose ne se
détache pas.
00012
00013
Escherichia coli 00014d
Milieu/réactif de
00090
détection de l’indole
00179
Réaction positive : formation
Milieu
6579 d’un anneau rouge dans
tryptone/tryptophane 00037
les 10 min
16654
avec réactif d’indole
Vibrio parahaemolyticus 00138
Détection de la formation
(réactif de Kovac)
21567
00185
d’indole à partir du
Milieu salé tryptone/
21872
tryptophane
Vibrio cholerae 00203
tryptophane avec réactif
11866‐1
d’indole (réactif de
Vibrio vulnificus 00139
11866‐2
Kovac)
Enterobacter aerogenes 00175
Réactif d’indole (réactif
Réaction négative :
de Kovac)
Citrobacter freundii 00006
anneau jaune/brun dans
Salmonella Typhimurium 00031
les 10 min
Salmonella Enteritidis 00030
00012
Réaction positive :
00013
apparition d’une couleur rose
Escherichia coli
00090 en l’espace de quelques
minutes
00179
Détection de la formation
Réactif d’indole (réactif
d’indole sur les
Enterobacter aerogenes 00175
de Vracko et de Sherris)
membranes filtrantes
Citrobacter freundii 00006
Réaction négative : aucune
apparition de couleur rose
Salmonella Typhimurium 00031
Salmonella Enteritidis 00030
00024
Réaction positive :
Pseudomonas aeruginosa 00025
présence de fluorescence sous
lampe UV (360 ± 20) nm
00026
Détection de la
Milieu King B 16266
00012
fluorescéine
00013
Réaction négative : aucune
Escherichia coli
fluorescence
00090
00179
00012
KOH
00013 Gram négatif :
Escherichia coli
(réactif pour l’essai de
00090 la colonie devient filandreuse
typage de Gram) 17995 Typage de Gram
00179
(solution d’hydroxyde
00032 Gram positif :
de potassium à 3 %)
Staph
...