ISO 18744:2016/FDAmd 1

ISO 18744:2016/DAmd.FDAmd 1:2026(E)
ISO/TC 34/SC 9/WG 6
Secretariat: AFNOR
Date: 2026-0203-19
Microbiology of the food chain — Detection and
detectionenumeration of Cryptosporidium and Giardia onin fresh
leafy green vegetables and berry fruits —

AMENDMENT 1: Method validation studies and performance
characteristics
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Recherche et dénombrement de Cryptosporidium et Giardia dans les
légumes verts frais à feuilles et les fruits à baies
AMENDEMENT 1: Études de validation des méthodes et caractéristiques de performance
FDIS stage
TTTThhhhiiiissss d d d drrrraftaftaftaft i i i issss s s s suuuubbbbmmmmiiiittttttttedededed t t t toooo  a pa pa pa pararararallel vallel vallel vallel vooootttte e e e iiiinnnn I I I ISSSSOOOO,,,, C C C CEEEENNNN.

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may be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying,
or posting on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO
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CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
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Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are described
in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the different types of
ISO document should be noted. This document was drafted in accordance with the editorial rules of the
ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
ISO draws attention to the possibility that the implementation of this document may involve the use of (a)
patent(s). ISO takes no position concerning the evidence, validity or applicability of any claimed patent rights
in respect thereof. As of the date of publication of this document, ISO had not received notice of (a) patent(s)
which may be required to implement this document. However, implementers are cautioned that this may not
represent the latest information, which may be obtained from the patent database available at
www.iso.org/patents. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and expressions
related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to the World Trade
Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9,
Microbiology, in collaboration with the European Committee for Standardization (CEN) Technical Committee
CEN/TC 463, Microbiology of the food chain, in accordance with the Agreement on technical cooperation
between ISO and CEN (Vienna Agreement).
A list of all parts in the ISO 18744 series can be found on the ISO website.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.
iii
Microbiology of the food chain — Detection and enumeration of
Cryptosporidium and Giardia onin fresh leafy green vegetables and
berry fruits
AMENDMENT 1: Method validation studies and performance
characteristics
Contents
Add the following text after Annex C:
Annex D (informative) Method validation studies and performance characteristics

2. Normative references
Replace ISO 7218:2007 with ISO 7218:2024.

Clause 6, first sentence
Replace the text in brackets with the following:
in accordance with ISO 7218:2024

7.2, first sentence
Replace the text in brackets with the following:
in accordance with ISO 7218:2024, 9.2.

7.3, first sentence
Replace the text in brackets with the following:
in accordance with ISO 7218:2024, 9.3.

7.4, first sentence
Replace the text in brackets with the following:
in accordance with ISO 7218:2024, 9.4.

8.1, NOTE 1
Replace the text with the following:
Centrifugation at 2 500g can result in a very compact pellet. A lower speed of 1 100g for 10 min with no
braking has been reported to give at least equivalent recoveries of Cryptosporidium oocysts and Giardia cysts.

8.1, i)
Replace the text with the following:
Centrifuge the eluate at 2 500g for 10 min with no braking.

8.1, NOTE 2
Replace the text with the following:
Centrifugation at 2 500g can result in a very compact pellet. A lower speed of 1 100g for 10 min with no
braking has been reported to give at least equivalent recoveries of Cryptosporidium oocysts and Giardia cysts.

8.2, g)
Replace the text with the following:
Centrifuge the eluate at 2 500g for 10 min with no braking.

8.2, NOTE 2
Replace the text with the following:
Centrifugation at 2 500g can result in a very compact pellet. A lower speed of 1 100g for 10 min with no
braking has been reported to give at least equivalent recoveries of Cryptosporidium oocysts and Giardia cysts.

8.2, k)
Replace the text with the following:
Centrifuge the eluate at 2 500g for 10 min with no braking.

8.2, NOTE 3
Replace the text with the following:
Centrifugation at 2 500g can result in a very compact pellet. A lower speed of 1 100g for 10 min with no
braking has been reported to give at least equivalent recoveries of Cryptosporidium oocysts and Giardia cysts.

8.5.2.2, NOTE 1, third sentence
Replace the text with the following:
Some Cryptosporidium species have diameters up to 8 μm (e.g. C. andersoni and C. muris, which can be
associated with infections in immunocompromised persons in rare cases).

10.1, first sentence
Replace the text with the following:
The result should be given as the presence or absence of Cryptosporidium oocysts and/or Giardia cysts
detected per weight of fresh produce sample examined.

10.2, i)
Replace the text with the following:
the presence or absence of Cryptosporidium oocysts and Giardia cysts, and any relevant details regarding their
identification and verification (e.g. size, DAPI-staining, morphological details);

After Annex C
Add the following as Annex D:
Annex D
(informative)
Method validation studies and performance characteristics
D.1 Background
The performance data for detection of Cryptosporidium on fresh leafy green vegetables and berry fruits and
for detection of Giardia on fresh leafy green vegetables (unpublished data, used with permission) were
calculated from the interlaboratory study organized by the Central Science Laboratory (CSL), Sand Hutton,
[9]
York, UK. The study was organized in 2001. The collaborators were all in the UK. The samples tested in the
study were Webb’s lettuce and raspberries. The samples were tested at three different levels of contamination
(low, medium and high), plus non-contaminated samples were tested. Artificial contamination was performed
by the organizing laboratory. The study was supported by the UK Food Standards Agency.
The test method used in the CSL interlaboratory trial was described by Reference [8]. This method formed the
basis of ISO 18744:2016.
For each interlaboratory study, LOD , its 95 % confidence interval, the standard deviation of laboratory
effects and intraclass correlation coefficient (ICC) were estimated u
...

PROJET FINAL
Amendement
ISO 18744:2016/
FDAM 1
ISO/TC 34/SC 9
Microbiologie de la chaîne
Secrétariat: AFNOR
alimentaire — Recherche et
Début de vote:
dénombrement de Cryptosporidium
2026-04-03
et Giardia dans les légumes verts
Vote clos le:
frais à feuilles et les fruits à baies
2026-05-29
AMENDEMENT 1: Études de validation
des méthodes et caractéristiques de
performance
Microbiology of the food chain — Detection and enumeration of
Cryptosporidium and Giardia in fresh leafy green vegetables and
berry fruits
AMENDMENT 1: Method validation studies and performance
characteristics
LES DESTINATAIRES DU PRÉSENT PROJET SONT
INVITÉS À PRÉSENTER, AVEC LEURS OBSERVATIONS,
NOTIFICATION DES DROITS DE PROPRIÉTÉ DONT ILS
AURAIENT ÉVENTUELLEMENT CONNAISSANCE ET À
FOURNIR UNE DOCUMENTATION EXPLICATIVE.
OUTRE LE FAIT D’ÊTRE EXAMINÉS POUR
ÉTABLIR S’ILS SONT ACCEPTABLES À DES FINS
INDUSTRIELLES, TECHNOLOGIQUES ET COM-MERCIALES,
AINSI QUE DU POINT DE VUE DES UTILISATEURS, LES
PROJETS DE NORMES
TRAITEMENT PARALLÈLE ISO/CEN
INTERNATIONALES DOIVENT PARFOIS ÊTRE CONSIDÉRÉS
DU POINT DE VUE DE LEUR POSSI BILITÉ DE DEVENIR DES
NORMES POUVANT
SERVIR DE RÉFÉRENCE DANS LA RÉGLEMENTATION
NATIONALE.
Numéro de référence
ISO 18744:2016/FDAM 1:2026(fr) © ISO 2026

PROJET FINAL
ISO 18744:2016/FDAM 1:2026(fr)
Amendement
ISO 18744:2016/
FDAM 1
ISO/TC 34/SC 9
Microbiologie de la chaîne
Secrétariat: AFNOR
alimentaire — Recherche et
Début de vote:
dénombrement de Cryptosporidium
2026-04-03
et Giardia dans les légumes verts
Vote clos le:
frais à feuilles et les fruits à baies
2026-05-29
AMENDEMENT 1: Études de validation
des méthodes et caractéristiques de
performance
Microbiology of the food chain — Detection and enumeration of
Cryptosporidium and Giardia in fresh leafy green vegetables and
berry fruits
AMENDMENT 1: Method validation studies and performance
characteristics
LES DESTINATAIRES DU PRÉSENT PROJET SONT
INVITÉS À PRÉSENTER, AVEC LEURS OBSERVATIONS,
NOTIFICATION DES DROITS DE PROPRIÉTÉ DONT ILS
AURAIENT ÉVENTUELLEMENT CONNAISSANCE ET À
FOURNIR UNE DOCUMENTATION EXPLICATIVE.
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
OUTRE LE FAIT D’ÊTRE EXAMINÉS POUR
ÉTABLIR S’ILS SONT ACCEPTABLES À DES FINS
© ISO 2026 INDUSTRIELLES, TECHNOLOGIQUES ET COM-MERCIALES,
AINSI QUE DU POINT DE VUE DES UTILISATEURS, LES
Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
PROJETS DE NORMES
TRAITEMENT PARALLÈLE ISO/CEN
INTERNATIONALES DOIVENT PARFOIS ÊTRE CONSIDÉRÉS
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
DU POINT DE VUE DE LEUR POSSI BILITÉ DE DEVENIR DES
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
NORMES POUVANT
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
SERVIR DE RÉFÉRENCE DANS LA RÉGLEMENTATION
NATIONALE.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse Numéro de référence
ISO 18744:2016/FDAM 1:2026(fr) © ISO 2026

ii
ISO 18744:2016/FDAM 1:2026(fr)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux. L’ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document
a été rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2
(voir www.iso.org/directives).
L’ISO attire l’attention sur le fait que la mise en application du présent document peut entraîner l’utilisation
d’un ou de plusieurs brevets. L’ISO ne prend pas position quant à la preuve, à la validité et à l’applicabilité de
tout droit de brevet revendiqué à cet égard. À la date de publication du présent document, l’ISO n’avait pas
reçu notification qu’un ou plusieurs brevets pouvaient être nécessaires à sa mise en application. Toutefois,
il y a lieu d’avertir les responsables de la mise en application du présent document que des informations
plus récentes sont susceptibles de figurer dans la base de données de brevets, disponible à l’adresse
www.iso.org/brevets. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir identifié tout ou partie de
tels droits de brevet.
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données pour
information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion de
l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au
commerce (OTC), voir le lien suivant: www.iso.org/avant-propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 9,
Microbiologie, en collaboration avec le comité technique CEN/TC 463, Microbiologie de la chaîne alimentaire
du Comité européen de normalisation (CEN), conformément à l’Accord de coopération technique entre l’ISO
et le CEN (Accord de Vienne).
Une liste de toutes les parties de la série ISO 18744 peut être consultée sur le site de l’ISO.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes se
trouve à l’adresse www.iso.org/members.html.

iii
ISO 18744:2016/FDAM 1:2026(fr)
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Recherche et
dénombrement de Cryptosporidium et Giardia dans les
légumes verts frais à feuilles et les fruits à baies
AMENDEMENT 1: Études de validation des méthodes et
caractéristiques de performance

Sommaire
Ajouter le texte suivant après l’Annexe C:
Annexe D (informative) Études de validation des méthodes et caractéristiques de performance

2. Références normatives
Remplacer “ISO 7218:2007” par “ISO 7218:2024”.

Article 6, première phrase
Remplacer le texte entre parenthèses par le suivant:
conformément à l'ISO 7218:2024.

7.2, première phrase
Remplacer le texte entre parenthèses par le suivant:
conformément à l'ISO 7218:2024, 9.2.

7.3, première phrase
Remplacer le texte entre parenthèses par le suivant:
conformément à l'ISO 7218:2024, 9.3.

7.4, première phrase
Remplacer le texte entre parenthèses par le suivant:
conformément à l'ISO 7218:2024, 9.4.

8.1, NOTE 1
ISO 18744:2016/FDAM 1:2026(fr)
Remplacer le texte par ce qui suit:
Une centrifugation à 2 500 g peut produire un culot très compact. Une vitesse moins élevée de 1 100 g pendant
10 min sans frein s’est révélée donner des rendements de récupération d’oocystes de Cryptosporidium et de
kystes de Giardia au moins équivalents.

8.1, i)
Remplacer le texte par ce qui suit:
Centrifuger l’éluat à 2 500 g pendant 10 min sans frein.

8.1, NOTE 2
Remplacer le texte par ce qui suit:
Une centrifugation à 2 500 g peut produire un culot très compact. Une vitesse moins élevée de 1 100 g pendant
10 min sans frein s’est révélée donner des rendements de récupération d’oocystes de Cryptosporidium et de
kystes de Giardia au moins équivalents.

8.2, g)
Remplacer le texte par ce qui suit:
Centrifuger l’éluat à 2 500 g pendant 10 min sans frein.

8.2, NOTE 2
Remplacer le texte par ce qui suit:
Une centrifugation à 2 500 g peut produire un culot très compact. Une vitesse moins élevée de 1 100 g pendant
10 min sans frein s’est révélée donner des rendements de récupération d’oocystes de Cryptosporidium et de
kystes de Giardia au moins équivalents.

8.2, k)
Remplacer le texte par ce qui suit:
Centrifuger l’éluat à 2 500 g pendant 10 min sans frein.

8.2, NOTE 3
Remplacer le texte par ce qui suit:
Une centrifugation à 2 500 g peut produire un culot très compact. Une vitesse moins élevée de 1 100 g pendant
10 min sans frein s’est révélée donner des rendements de récupération d’oocystes de Cryptosporidium et de
kystes de Giardia au moins équivalents.

8.5.2.2, NOTE 1, troisième phrase
Remplacer le texte par ce qui suit:

ISO 18744:2016/FDAM 1:2026(fr)
Certaines espèces de Cryptosporidium ont des diamètres pouvant atteindre 8 μm (par exemple, C. andersoni
et C. muris, qui peuvent être associées à des infections chez des personnes immunodéprimées dans de rares
cas).
10.1, première phrase
Remplacer le texte par ce qui suit:
Il convient d’exprimer le résultat sous la forme de présence ou l’absence d’oocystes de Cryptosporidium et/ou
de kystes de Giardia détectés par masse d’échantillon de produit frais examiné.

10.2, i)
Remplacer le texte par ce qui suit:
la présence ou l’absence d’oocystes de Cryptosporidium et de kystes de Giardia, ainsi que toute information
pertinente concernant leur identification et vérification (par exemple, taille, coloration au DAPI,
caractéristiques morphologiques);

Après l’Annexe C
Ajouter ce qui suit sous forme d'Annexe D:

ISO 18744:2016/FDAM 1:2026(fr)
Annexe D
(informative)
Études de validation des méthodes et caractéristiques de
performance
D.1 Contexte
Les données de performance relatives à la recherche de Cryptosporidium sur les légumes verts frais à
feuilles et les fruits à baies et à la recherche de Giardia sur les légumes verts frais à feuilles (données non
publiées, utilisées sur autorisation) ont été calculées à partir de l’étude interlaboratoires organisée par le
[9]
Central Science Laboratory (CSL) de Sand Hutton, près de York au Royaume-Uni . L’étude date de 2001.
Les laboratoires participants se trouvaient tous au Royaume-Uni. Les échantillons soumis à essai dans le
cadre de l’étude étaient de la laitue (variété Webb) et des framboises. Des échantillons ont été soumis à
trois niveaux de contamination différents (faible, moyen et élevé), en plus d’échantillons non contaminés. La
contamination artificielle a été réalisée par le laboratoire organisateur. L’étude a été souten
...