ISO 14161:2009
(Main)Sterilization of health care products - Biological indicators - Guidance for the selection, use and interpretation of results
Sterilization of health care products - Biological indicators - Guidance for the selection, use and interpretation of results
ISO 14161:2009 provides guidance for the selection, use and interpretation of results from application of biological indicators when used in the development, validation and routine monitoring of sterilization processes. ISO 14161:2009 applies to biological indicators for which International Standards exist.
Stérilisation des produits de santé — Indicateurs biologiques — Directives générales pour la sélection, l'utilisation et l'interprétation des résultats
L'ISO 14161:2009 fournit des directives pour la sélection, l'utilisation et l'interprétation des résultats issus de l'application des indicateurs biologiques dans le développement, la validation et le contrôle périodique des procédés de stérilisation. L'ISO 14161:2009 s'applique aux indicateurs biologiques pour lesquels il existe des Normes internationales.
General Information
Relations
Frequently Asked Questions
ISO 14161:2009 is a standard published by the International Organization for Standardization (ISO). Its full title is "Sterilization of health care products - Biological indicators - Guidance for the selection, use and interpretation of results". This standard covers: ISO 14161:2009 provides guidance for the selection, use and interpretation of results from application of biological indicators when used in the development, validation and routine monitoring of sterilization processes. ISO 14161:2009 applies to biological indicators for which International Standards exist.
ISO 14161:2009 provides guidance for the selection, use and interpretation of results from application of biological indicators when used in the development, validation and routine monitoring of sterilization processes. ISO 14161:2009 applies to biological indicators for which International Standards exist.
ISO 14161:2009 is classified under the following ICS (International Classification for Standards) categories: 11.080.01 - Sterilization and disinfection in general. The ICS classification helps identify the subject area and facilitates finding related standards.
ISO 14161:2009 has the following relationships with other standards: It is inter standard links to ISO 11138-7:2019, ISO 14161:2000. Understanding these relationships helps ensure you are using the most current and applicable version of the standard.
You can purchase ISO 14161:2009 directly from iTeh Standards. The document is available in PDF format and is delivered instantly after payment. Add the standard to your cart and complete the secure checkout process. iTeh Standards is an authorized distributor of ISO standards.
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 14161
Second edition
2009-09-15
Sterilization of health care products —
Biological indicators — Guidance for the
selection, use and interpretation of
results
Stérilisation des produits de santé — Indicateurs biologiques —
Directives générales pour la sélection, l'utilisation et l'interprétation des
résultats
Reference number
©
ISO 2009
PDF disclaimer
This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but
shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In
downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. The ISO Central Secretariat
accepts no liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.
Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation
parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies. In
the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.
© ISO 2009
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or
ISO's member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2009 – All rights reserved
Contents Page
Foreword .v
Introduction.vi
1 Scope.1
2 Normative references.1
3 Terms and definitions .2
4 General .5
5 Characteristics of biological indicators .7
5.1 General .7
5.2 Test organism suspension for direct inoculation of products.7
5.3 Inoculated carriers .8
5.4 Self-contained biological indicators.8
5.5 Other biological indicators.9
6 Selection of supplier .9
6.1 General .9
6.2 Documentation .10
7 Biological indicators in process development.11
7.1 General .11
7.2 Overkill approach .12
7.3 Combined biological indicator and bioburden method.12
7.4 Bioburden method.13
8 Biological indicators in sterilization validation.14
8.1 General .14
8.2 Placement and handling of biological indicators .14
8.3 Sterilizer qualification .14
8.4 Performance qualification .14
8.5 Review and approval of validation .15
8.6 Requalification.15
9 Biological indicators in routine monitoring.15
9.1 General .15
9.2 Placement and handling of biological indicators .15
9.3 Process challenge device (PCD).16
10 Results.16
10.1 General .16
10.2 Interpretation of results .16
11 Application of biological indicator standards .17
11.1 General assessment of biological indicator performance by the user.17
11.2 Nominal population of test organism.17
11.3 Resistance determination.18
11.4 z value determination .20
11.5 F equivalent sterilization value determination .22
(T, z)
11.6 Establishing spore-log-reduction (SLR) .23
11.7 Sterility assurance level (SAL) calculation.23
11.8 Test equipment .24
12 Culture conditions.24
12.1 General .24
12.2 Incubation temperature.24
12.3 Incubation period.25
12.4 Choice of growth medium.25
13 Third-party requirements .26
13.1 General.26
13.2 Minimum requirements for replicates and total number of biological indicators .26
13.3 Test equipment .26
14 Personnel training .27
15 Storage and handling .27
16 Disposal of biological indicators .27
Annex A (informative) Microbiological inactivation kinetics and enumeration techniques.28
Annex B (informative) Process challenge devices .34
Annex C (informative) Formulae for fraction negative methods for D value calculations .35
Annex D (informative) Examples of documentation for biological indicators prepared by the user .50
Annex E (informative) Calculation of z value.54
Annex F (informative) D value determination by survivor curve method.57
Annex G (informative) Survival-kill response characteristics .61
Bibliography .62
iv © ISO 2009 – All rights reserved
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 14161 was prepared by Technical Committee ISO/TC 198, Sterilization of health care products.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 14161:2000), which has been technically
revised.
Introduction
This International Standard provides guidance regarding the selection, use and interpretation of results of
biological indicators when used to develop, validate and monitor sterilization processes. The procedures
described in this International Standard are of a general nature and do not, of themselves, constitute a
comprehensive development, validation or monitoring programme with regard to the sterilization of health care
products. The intent of this International Standard is not to mandate the use of biological indicators in a
process but, if they are used, to provide guidance for their proper selection and use in order to obviate
misleading results.
In this International Standard, users will find guidance on selection of the correct biological indicator for their
particular sterilization process and critical parameters as well as guidance on its appropriate use.
The user should select a biological indicator that is appropriate for the particular process to be used. There is
a wide variety of sterilization processes in common use, and biological indicator manufacturers are not able to
foresee all possible uses of their product. Manufacturers, therefore, label biological indicators according to
their intended use. It is the responsibility of the users of biological indicators to select, use, recover and
interpret the results as appropriate for the particular sterilization process used.
The certified performance of a biological indicator can be adversely affected by the conditions of storage and
transport prior to its use, by the use of the biological indicator or by the sterilizer process parameters. In
addition, the incubation procedure used after exposure to the process, including outgrowth temperature and
culture medium type, supplier and specific lot, can affect measured resistance as a function of recovery and
growth. For these reasons, the recommendations of the biological indicator manufacturer for storage and use
should be followed. After exposure, biological indicators should be aseptically transferred (if applicable) and
incubated as specified by the biological indicator manufacturer.
It should be noted that biological indicators are not intended to indicate that the products in the load being
sterilized are sterile. Biological indicators are utilized to test the effectiveness of a given sterilization process
and the equipment used, by assessing microbial lethality according to the concept of sterility assurance level.
Suitably trained personnel should conduct these studies.
vi © ISO 2009 – All rights reserved
INTERNATIONAL STANDARD ISO 14161:2009(E)
Sterilization of health care products — Biological indicators —
Guidance for the selection, use and interpretation of results
1 Scope
This International Standard provides guidance for the selection, use and interpretation of results from
application of biological indicators when used in the development, validation and routine monitoring of
sterilization processes. This International Standard applies to biological indicators for which International
Standards exist.
NOTE 1 See, for example, the ISO 11138 series.
NOTE 2 The general information provided in this International Standard can have useful application for processes and
biological indicators not currently addressed by existing International Standards, e.g., new and developing sterilization
processes.
This International Standard does not consider those processes that rely solely on physical removal of
microorganisms, e.g., filtration.
This International Standard is not intended to apply to combination processes using, for example, washer
disinfectors or flushing and steaming of pipelines.
This International Standard is not intended to apply to liquid sterilization processes.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 11135-1, Sterilization of health care products — Ethylene oxide — Part 1: Requirements for development,
validation and routine control of a sterilization process for medical devices
ISO 11138-1:2006, Sterilization of health care products — Biological indicators — Part 1: General
requirements
ISO 11138-2, Sterilization of health care products — Biological indicators — Part 2: Biological indicators for
ethylene oxide sterilization processes
ISO 11138-3, Sterilization of health care products — Biological indicators — Part 3: Biological indicators for
moist heat sterilization processes
ISO 11138-4, Sterilization of health care products — Biological indicators — Part 4: Biological indicators for
dry heat sterilization processes
ISO 11138-5, Sterilization of health care products — Biological indicators — Part 5: Biological indicators for
low-temperature steam and formaldehyde sterilization processes
ISO 11737-1, Sterilization of medical devices — Microbiological methods — Part 1: Determination of a
population of microorganisms on products
ISO 14937, Sterilization of health care products — General requirements for characterization of a sterilizing
agent and the development, validation and routine control of a sterilization process for medical devices
ISO 17665-1, Sterilization of health care products — Moist heat — Part 1: Requirements for the development,
validation and routine control of a sterilization process for medical devices
ISO 18472:2006, Sterilization of health care products — Biological and chemical indicators — Test equipment
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
accreditation
procedure by which an authoritative body gives formal recognition that a body or person is competent to carry
out specific tasks
[3]
NOTE 1 See ISO/IEC 17011 .
NOTE 2 Accreditation does not itself qualify the laboratory to approve any particular product. However, accreditation
can be relevant to approval and certification authorities when they decide whether or not to accept data produced by a
given laboratory in connection with their own activities.
3.2
aseptic technique
conditions and procedures used to exclude the introduction of microbial contamination
3.3
bioburden
population of viable microorganisms on or in a product and/or sterile barrier system
[ISO/TS 11139, definition 2.2]
3.4
biological indicator
BI
test system containing viable microorganisms providing a defined resistance to a specified sterilization
process
[ISO/TS 11139, definition 2.3]
3.5
D value
D value
time or dose required to achieve inactivation of 90 % of a population of the test microorganism under stated
conditions
[ISO/TS 11139, definition 2.11]
3.6
holding time
period for which the sterilization variable within the sterilizer and at all points within the load are continuously
within the limits specified for the sterilization stage
3.7
inoculated carrier
supporting material on or in which a defined number of viable test organisms have been deposited
NOTE 1 See ISO 11138-1.
NOTE 2 The test organism is a microorganism used for the manufacture of inoculated carriers.
2 © ISO 2009 – All rights reserved
3.8
installation qualification
IQ
process of obtaining and documenting evidence that equipment has been provided and installed in
accordance with its specification
[ISO/TS 11139, definition 2.22]
3.9
inoculation
addition of a defined amount of a characterized microbial entity into or on to an item
3.10
log reduction
LR
reduction in number of viable microorganisms, expressed in log units
3.11
operational qualification
OQ
process of obtaining and documenting evidence that installed equipment operates within predetermined limits
when used in accordance with its operational procedures
[ISO/TS 11139, definition 2.27]
3.12
performance qualification
PQ
process of obtaining and documenting evidence that the equipment, as installed and operated in accordance
with operational procedures, consistently performs in accordance with predetermined criteria and thereby
yields product meeting its specification
[ISO/TS 11139, definition 2.30]
3.13
process challenge device
PCD
item designed to constitute a defined resistance to a sterilization process and used to assess performance of
the process
[ISO/TS 11139, definition 2.33]
3.14
process challenge location
PCL
site that simulates “worst case” conditions as they are given for sterilizing agent(s) in the goods to be sterilized
3.15
process parameter
specified value for a process variable
NOTE The specification for a sterilization process includes the process parameters and their tolerances.
[ISO/TS 11139, definition 2.34]
3.16
process variable
condition within a sterilization process, changes in which alter microbicidal effectiveness
EXAMPLE Time, temperature, pressure, concentration, humidity, wavelength.
[ISO/TS 11139, definition 2.35]
3.17
reference microorganism
microbial strain obtained from a recognized culture collection
[ISO/TS 11139, definition 2.39]
3.18
resistometer
test equipment designed to create defined reference combinations of the physical and/or chemical variables of
a sterilization process
NOTE 1 Adapted from ISO 11138-1, definition 3.15 and ISO 18472:2006, definition 3.11.
NOTE 2 Also referred to as Biological Indicator Evaluator Resistometer (BIER).
3.19
spore-log-reduction
SLR
log of initial spore population, N , minus the log of the final population, N
0 F
3.20
sterile
free from viable microorganisms
[ISO/TS 11139, definition 2.43]
3.21
sterility assurance level
SAL
probability of a single viable microorganism occurring on an item after sterilization
−6 −3
NOTE The term SAL takes a quantitative value, generally 10 or 10 . When applying this quantitative value to
−6 −3
assurance of sterility, an SAL of 10 has a lower value but provides a greater assurance of sterility than an SAL of 10 .
[ISO/TS 11139, definition 2.46]
3.22
sterilization
validated process used to render product free from viable microorganisms
NOTE In a sterilization process, the nature of microbial inactivation is exponential and thus the survival of a
microorganism on an individual item can be expressed in terms of probability. While this probability can be reduced to a
very low number, it can never be reduced to zero.
[ISO/TS 11139, definition 2.47]
3.23
sterilization cycle development
procedure for determination of the appropriate processing parameters that are consistent with attaining the
desired specifications and label claims for a given product or group of products
3.24
sterilization cycle validation
documented procedure for obtaining, recording and interpreting the results required to establish that a process
will consistently yield product complying with predetermined specifications
3.25
supplier
organization or person that provides a product
EXAMPLE Producer, distributer, retailer or vendor of a product, or provider of a service or information.
4 © ISO 2009 – All rights reserved
NOTE 1 A supplier can be internal or external to the organization.
NOTE 2 In a contractual situation, a supplier is sometimes called “contractor.”
[ISO 9000, definition 3.3.6]
3.26
survival-kill window
extent of exposure to a sterilization process under defined conditions where there is a transition from all
biological indicators showing growth (survival time) to all biological indicators showing no growth (kill time)
[ISO 11138-1, definition 3.18]
3.27
third party
person or body that is recognised as being independent of the parties involved, as concerns the issue in
question
[1]
NOTE 1 See ISO/IEC Guide 2 .
NOTE 2 Parties involved are usually supplier (“first party”) and purchaser (“second party”) interests.
3.28
user
person or body employing biological indicators for a given purpose
[4]
NOTE 1 See ISO 9000 .
NOTE 2 The user is the customer who is the recipient of a product provided by the supplier. In a contractual situation,
the user is called “purchaser.” The user could be the customer, beneficiary or purchaser. The user can be either external
or internal to the organization and represents the “second party.”
3.29
z value
change in exposure temperature of a thermal sterilization process, which corresponds to a tenfold change in
D value
NOTE See ISO 11138-3 and ISO 11138-4.
4 General
4.1 This International Standard provides guidance on biological indicators that can apply generally for any
sterilization process, including new sterilization processes not yet covered by International Standards.
4.2 The use of biological indicators is normally documented in procedures and/or instructions.
[7]
NOTE Employing quality management systems such as ISO 13485 usually satisfies this provision.
4.3 Biological indicators should always be used in combination with physical and/or chemical
measurements in demonstrating the efficacy of a sterilizing process. When a physical and/or chemical
variable of a sterilization process is outside its specified limits, the reason for the sterilizer's inability to achieve
its process parameters should be evaluated and the problem corrected. Systems and/or procedures should be
established to evaluate any deviations from the cycle process limits, and reasons for accepting any deviation
should be fully documented.
4.4 A suitable biological indicator consists of carrier material and packaging and has a microbiological
component that is known to be suitable for handling without special containment facilities. The growth
conditions should be well documented, and the use of the indicator should be as simple and well described as
possible to avoid misinterpretation by the user.
4.5 No formal approval system exists, internationally, for biological indicators that are marketed and used
for stated purposes or under stated conditions. Some national regulatory authorities, however, have particular
requirements for biological indicators and for the choice and use of biological indicators for the validation and
control of products marketed as sterile or sterilized.
4.6 A biological indicator represents a microbiological challenge to a sterilization process and is used to
verify that a sterilization process has the ability to inactivate microorganisms that have a known resistance to a
referenced sterilization process. Test organisms employed in biological indicators typically have resistance to
sterilization which exceeds that of common bioburden microorganisms, although some organisms can exhibit
a resistance to sterilization in excess of that of the test organisms. The appropriate biological indicator
provides a challenge to the sterilization process which exceeds that of the bioburden through a combination of
population and resistance. If there is reason to believe that the goods to be processed could be contaminated
with particularly resistant organisms, extended sterilization processing, based on the bioburden, could be
required.
4.7 Biological indicators are not intended for use in any process other than that specified by the
manufacturer on the product labelling. Microbial species and strains are selected as biological indicator
candidates based on their known resistance to the specific method of sterilization as certified by the
manufacturer. The use of an inappropriate biological indicator can give misleading results.
The user should ensure that the biological indicator has been qualified for use with the particular range of
sterilization conditions that are used. This could require information in addition to that given in the labelling.
When biological indicators are used outside reference conditions, the user can require information on the
reaction expected from the indicator, e.g., the effect of sub-optimal moisture conditions on the biological
indicators used in an ethylene oxide process. Users who employ biological indicators outside the
manufacturer's labelled recommendations should thoroughly characterize the resistance of the biological
indicators to the particular sterilization process. The relationship of the response of the biological indicator to
process parameters should be clearly demonstrated.
4.8 It is incumbent upon those responsible for the sterilization of product to ensure that the type of
biological indicator employed to validate and/or routinely monitor a given sterilization process is appropriate
for that use.
4.9 The manufacturer's recommendations for the use and storage of the biological indicators should always
be followed. Failure to do so can compromise the integrity of the biological indicator. If the user removes the
inoculated carrier from the biological indicator's primary packaging, changes in the resistance characteristics
can occur. Guidance should be sought from the manufacturer on the extent of this change, or the user can
evaluate changes in the resistance characteristics. The user should document that the performance
characteristics of the inoculated carrier are appropriate for their use.
4.10 Biological indicators should not be used beyond the expiration date stated by the manufacturer.
4.11 Those who employ biological indicators for validation and/or routine monitoring of sterilization should be
properly trained in their use. The time between completion of the sterilization process and the testing of the BI
should be justified as described in 8.2.4. Transferral of microorganisms exposed to the sterilization process to
the appropriate recovery medium should be done using aseptic technique.
4.12 The ISO 11138 series gives requirements for the information that the manufacturer should provide for
biological indicators. The information may be provided on the label, as a packet insert or as a general
specification accompanying the biological indicators. This series of International Standards also includes
minimum requirements for resistance characteristics. Testing conditions and methods are given as reference
methods.
4.13 Users of biological indicators come from a wide variety of industries, private enterprises and health care
facilities. Users are not generally required to perform resistance assays on biological indicators but can have
differing requirements for their quality assurance systems, which include audits of vendors and/or
manufacturers (see 6.2.2).
4.14 The verification of resistance characteristics by the user is an alternative to and/or complementary to an
audit, when necessary.
6 © ISO 2009 – All rights reserved
5 Characteristics of biological indicators
5.1 General
5.1.1 Biological indicators provide means to assess directly the microbial lethality of a sterilization process
(see References [8] and [9]). When used in conjunction with physical and/or chemical process monitors,
biological indicators can provide an indication of the effectiveness of a given sterilization process.
5.1.2 A sterilization process should be considered as satisfactory only when the desired physical and/or
chemical parameters and microbiological results, as determined by an appropriate sterilization cycle
development, validation and monitoring programme have been realized. Failure to achieve the desired
physical and/or chemical parameters and/or microbiological challenge forms the basis for declaring the
[7] [22]
sterilization process as nonconforming (see ISO 13485 and ISO 9001 ).
5.1.3 Biological indicators consist of a defined population of test organisms presented in such a manner as
to allow their recovery following sterilization processing. For example, test organisms employed for ethylene
oxide sterilization processes can be spores of a suitable strain of Bacillus subtilis or Bacillus atrophaeus, as
noted in ISO 11138-2. For steam sterilization or moist heat sterilization, the test organisms employed can be
spores of a suitable strain of Geobacillus stearothermophilus, as noted in ISO 11138-3. Test organisms other
than bacterial spores can be used if they have been shown to provide appropriate resistance to the
sterilization process.
5.1.4 The basis of all formulae used to determine biological indicator resistance characteristics such as
D values is that the inactivation reaction follows first-order kinetics, with the requirement that the value for the
coefficient of determination, r , for the linearity of the survivor curve be not less than 0,8 (see Annex E and
Annex F). The strain, the production method, the suspension fluid, the carrier and packaging materials all
affect the resistance characteristics of the finished product (see ISO 11138-1).
5.1.5 The design and construction of a biological indicator can result in unique resistance characteristics
and can vary depending on whether the biological indicator is intended for use in the development and
validation of a sterilization process or for use in routine monitoring. If the design of the biological indicator for
use in routine monitoring differs from that employed to validate the sterilization processes, the challenge to the
process during validation should be correlated with the challenge to the process during routine monitoring.
5.1.6 The resistance characteristics of biological indicators vary according to the manufacturing methods
and the testing conditions. Depending upon placement within the load and the specific lethal conditions at
those discrete locations, biological indicators from the same lot may show different survival capabilities
(see 7.2.3). Users of biological indicators should note that ten indicators spread throughout the load are not
considered replicates due to the differences in lethality that exist throughout the chamber and load (see Note
to 11.3.1).
5.2 Test organism suspension for direct inoculation of products
5.2.1 Direct inoculation of test organisms on or in product can be necessary in cycle development and other
studies when the use of a biological indicator is not feasible. Direct inoculation can be appropriate for
assessing factors such as product sterilizability, identification of the more difficult to sterilize locations within
the device, and localized microbiological effects, e.g., moist heat versus dry heat environments.
The rationale for the selection of the “most difficult to sterilize” site(s) on a medical device or within a
sterilization load should be documented based on experimental data or derived from prior knowledge of the
particular sterilization methodology. In practice, the “most difficult to sterilize” site represents those locations
that are most likely to provide high resistance to the sterilization process. One should refer to specific
sterilization standards (e.g., ISO 17665-1 and ISO 11135-1) for guidance in determining and selecting difficult-
to-sterilize locations.
5.2.2 To assess the efficacy of sterilization at a particular site or location on the product, the desired
species and population of test organisms can be inoculated at those sites. The use of suspensions of test
organisms to prepare inoculated carriers or inoculated products requires caution. The materials on to which
test organisms are inoculated can alter the test organisms' resistance characteristics. The resistance can be
higher or lower due to deposition as a monolayer or multilayer, coating effects, and/or bacteriostatic or
bactericidal effects of the material. The methods employed to recover the test organisms following processing
should be validated to ensure an adequate level of recovery from the product (see ISO 11737-1). Test
organism recovery should be expressed in terms of percent recovery of the population of the original inoculum.
5.2.3 Direct inoculation of products or materials with a test organism suspension can cause prolonged or
decreased survival of test organisms. This may affect the observed percent recovery of the original inoculum
relative to what is expected under specified sterilization conditions. Inoculated products may be assayed with
either survivor curve (enumeration/direct counting) or fraction-negative procedures (see Figure A.4). These
assays require aseptic techniques.
5.2.4 The D value and, when appropriate, the z value, are constant values only under determined and
defined conditions. The resistance characteristics of a spore suspension provided by a manufacturer or
supplier of biological indicators might not correspond to the resistance characteristics for direct product
inoculation studies. The resistance characteristics should be measured for the carrier employed (solid carrier
material or fluid) as well as for the specific sterilization cycle employed.
5.3 Inoculated carriers
5.3.1 Inoculated carriers consist of a defined population of test organisms inoculated on or in a suitable
carrier material (see ISO 11138-1:2006, Annex B). Caution should be exercised to ensure that the integrity of
the carrier material selected is sufficient to withstand sterilization processing without degradation and to
minimize the loss of the inoculated test organisms during transport and handling.
5.3.2 The resistance characteristics of a test organism in suspension can be considerably changed upon
deposition on or in carriers. Several factors can influence the resistance characteristics, such as the surface
on to which the suspension is inoculated (e.g., solid materials, viscous products or fluids), the way the spores
are dispersed and otherwise treated, the methods of drying, etc.
5.3.3 If an inoculated carrier is removed from the biological indicator primary package for cycle
development, cycle validation studies, or for process challenge devices used for routine process monitoring,
then it is the responsibility of the user to provide a rationale for this application. It should be recognized that
the resistance of the microorganism on the inoculated carrier could differ from the labelled resistance of the
packaged biological indicator.
5.3.4 The resistance characteristics of an inoculated carrier provided by the manufacturer of biological
indicators might not correspond to the resistance characteristics established in direct product inoculation
studies.
5.3.5 The carrier material should be evaluated by the biological indicator manufacturer or the user to
establish that the sterilizing agent for which the biological indicator is intended neither retains nor releases
inhibitory substances (e.g., sterilizing agent residuals) to such an extent that the recovery of low numbers is
inhibited (see ISO 11138-1:2006, 5.2).
5.4 Self-contained biological indicators
Self-contained biological indicators consist of either a) or b).
a) An ampoule containing growth medium and a carrier inoculated with test organisms contained within an
outer vial so that the sterilizing agent obtains access to the inoculated carrier through a sterile barrier or a
tortuous path.
After exposure to the sterilization process, the growth medium is brought into contact with the inoculated
carrier by breaking the ampoule of growth medium, thereby eliminating the need to aseptically transfer
the inoculated carrier to a separate vial of growth medium. The biological indicator manufacturers'
recommendations should be followed for incubation of self-contained biological indicators.
NOTE Due to the low volume and the possibility of evaporation of the growth medium, prolonged post-exposure
incubation might not be possible.
8 © ISO 2009 – All rights reserved
Chemical residuals resulting from processes such as ethylene oxide or vapour hydrogen peroxide can
inhibit growth of surviving organisms. The biological indicator manufacturer's recommendations should be
followed for proper handling (including aeration) of biological indicators prior to incubation (see 8.2.4).
b) A hermetically sealed ampoule containing a suspension of test organisms in growth medium.
These are referred to as sealed-ampoule biological indicators. After exposure to the process, the sealed
ampoule is incubated intact, and no aseptic transfer is required.
NOTE This type of indicator is sensitive only to exposure time and temperature and is primarily used to monitor moist
heat sterilization of aqueous fluids.
Self-contained biological indicators are generally larger than biological indicators that consist only of an
inoculated carrier in a primary packaging, and may not fit into locations within the device that represent the
process challenge locations. Unless a biological indicator can be placed into a load without deforming it or
otherwise potentially compromising its primary packaging, the biological indicator should not be used. Also,
the user should be aware that the claimed resistance characteristics can be dependent on the air-removal
method employed in the sterilization cycle.
5.5 Other biological indicators
Biological indicators in their simplest form consist of an inoculated carrier in primary packaging. The
inoculated carrier can take a variety of forms, including paper strips, threads, metal coupons or other carriers
suitable for inoculation. The primary packaging is chosen to permit the sterilizing agent to penetrate to the
inoculated carrier while maintaining a sterile barrier after processing.
6 Selection of supplier
6.1 General
6.1.1 The user of biological indicators should, whenever possible, purchase to standard specifications, e.g.,
biological indicators manufactured according to specifications given in the ISO 11138 series, pharmacopoeial
monographs or other applicable standards. The user should consider the particular sterilization process as the
basis for the choice of biological indicator.
6.1.2 When the user has a process that requires performance characteristics that differ from the label claim
for the biological indicator, it is the responsibility of the user to verify that the biological indicator has the
performance characteristics needed.
6.1.3 The user of biological indicators should have a system in place to provide assurance that the
biological indicators obtained consistently meet the specified characteristics. Such assurance may be
provided by one or more of the following:
a) information from the manufacturer covering the performance characteristics of the lot of biological
indicators prepared;
NOTE Requirements for information supplied by manufacturers of biological indicators are provided by the
ISO 11138 series.
b) a statement of conformity from the manufacturer that the biological indicators meet the agreed
specifications;
c) if needed, various degrees of testing of each lot of biological indicators received by the user, to verify that
the performance characteristics meet the agreed specifications.
6.1.4 When the user has established a high level of confidence in the supplier (see 6.1.3), the testing
performed by the user can be minimal. At a minimum, the user should have a mechanism to
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 14161
Deuxième édition
2009-09-15
Stérilisation des produits de santé —
Indicateurs biologiques — Directives
générales pour la sélection, l'utilisation et
l'interprétation des résultats
Sterilization of health care products — Biological indicators — Guidance
for the selection, use and interpretation of results
Numéro de référence
©
ISO 2009
PDF – Exonération de responsabilité
Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier
peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
autorisant l'utilisation de ces polices et que celles-ci y soient installées. Lors du téléchargement de ce fichier, les parties concernées
acceptent de fait la responsabilité de ne pas enfreindre les conditions de licence d'Adobe. Le Secrétariat central de l'ISO décline toute
responsabilité en la matière.
Adobe est une marque déposée d'Adobe Systems Incorporated.
Les détails relatifs aux produits logiciels utilisés pour la création du présent fichier PDF sont disponibles dans la rubrique General Info
du fichier; les paramètres de création PDF ont été optimisés pour l'impression. Toutes les mesures ont été prises pour garantir
l'exploitation de ce fichier par les comités membres de l'ISO. Dans le cas peu probable où surviendrait un problème d'utilisation,
veuillez en informer le Secrétariat central à l'adresse donnée ci-dessous.
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2009
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
de l'ISO à l'adresse ci-après ou du comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2009 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos .v
Introduction.vi
1 Domaine d'application .1
2 Références normatives.1
3 Termes et définitions .2
4 Généralités .6
5 Caractéristiques des indicateurs biologiques.7
5.1 Généralités .7
5.2 Suspension d'organismes d'essai pour inoculation directe des produits.8
5.3 Porte-germes inoculés.9
5.4 Indicateurs biologiques autonomes.9
5.5 Autres indicateurs biologiques.10
6 Choix du fournisseur .10
6.1 Généralités .10
6.2 Documentation .11
7 Indicateurs biologiques dans la mise au point de procédés .13
7.1 Généralités .13
7.2 Approche par surdestruction.13
7.3 Méthode par combinaison d'indicateur biologique/de charge biologique.14
7.4 Méthode de la charge biologique .15
8 Indicateurs biologiques dans la validation de la stérilisation .16
8.1 Généralités .16
8.2 Mise en place et manipulation des indicateurs biologiques.16
8.3 Qualification des stérilisateurs .16
8.4 Qualification des performances.16
8.5 Revue et approbation de la validation.17
8.6 Requalification.17
9 Indicateurs biologiques et contrôle de routine .17
9.1 Généralités .17
9.2 Mise en place et manipulation des indicateurs biologiques.18
9.3 Dispositif d'épreuve de procédé (PCD).18
10 Résultats.18
10.1 Généralités .18
10.2 Interprétation des résultats .19
11 Application des normes relatives aux indicateurs biologiques .19
11.1 Évaluation générale de la performance des indicateurs biologiques par l'utilisateur.19
11.2 Population nominale d'un organisme d'essai .20
11.3 Détermination de la résistance .21
11.4 Détermination de la valeur de z.23
11.5 Détermination de la valeur de stérilisation équivalente à F .25
(T, z)
11.6 Détermination de la réduction logarithmique des spores (RLS).26
11.7 Calcul du niveau d'assurance de stérilité (NAS).26
11.8 Équipements d'essai.27
12 Conditions de culture.27
12.1 Généralités .27
12.2 Température d'incubation .27
12.3 Période d'incubation .28
12.4 Choix du milieu de croissance.28
13 Exigences de tierces parties .29
13.1 Généralités .29
13.2 Exigences minimales relatives aux réplicats et au nombre total d'indicateurs biologiques .29
13.3 Équipements d'essai .30
14 Formation du personnel.30
15 Stockage et manipulation .30
16 Mise au rebut des indicateurs biologiques.31
Annexe A (informative) Cinétique d'inactivation microbiologique et techniques d'énumération .32
Annexe B (informative) Dispositifs d'épreuve de procédé .38
Annexe C (informative) Formules des méthodes par fraction négative pour les calculs de la valeur
de D .40
Annexe D (informative) Exemples de documentation relative aux indicateurs biologiques
préparés par l'utilisateur .55
Annexe E (informative) Calcul de la valeur de z .60
Annexe F (informative) Détermination de la valeur de D par la méthode de courbe de survie .63
Annexe G (informative) Caractéristiques de réponse de survie-destruction .68
Bibliographie .70
iv © ISO 2009 – Tous droits réservés
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 14161 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 198, Stérilisation des produits de santé.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 14161:2000), qui a fait l'objet d'une
révision technique.
Introduction
La présente Norme internationale fournit des directives pour la sélection, l'utilisation et l'interprétation des
résultats des indicateurs biologiques utilisés pour développer, valider et surveiller les procédés de stérilisation.
Les procédures décrites dans la présente Norme internationale revêtent un caractère général et ne
constituent pas, en elles-mêmes, un programme de développement, de validation ou de surveillance complet
en matière de stérilisation des produits de santé. L'objectif du présent document n'est pas de rendre
obligatoire l'utilisation des indicateurs biologiques dans un procédé, mais, s'ils sont utilisés, de fournir des
directives permettant de les sélectionner et de les utiliser correctement, et éviter ainsi de fausser les résultats.
Dans la présente Norme internationale, l'utilisateur trouvera des directives sur le choix de l'indicateur
biologique correct par rapport à son procédé de stérilisation et ses paramètres critiques particuliers, ainsi que
des directives sur son utilisation appropriée.
Il est préférable que l'utilisateur sélectionne un indicateur biologique approprié en fonction du procédé
particulier à utiliser. Il existe un grand nombre de procédés de stérilisation différents et les fabricants
d'indicateurs biologiques ne sont pas en mesure de prévoir toutes les utilisations possibles de leur produit.
Par conséquent, les fabricants étiquettent les indicateurs biologiques en fonction de l'utilisation pour laquelle
ils sont prévus. Il est de la responsabilité des utilisateurs des indicateurs biologiques de sélectionner, utiliser,
récupérer et interpréter les résultats en fonction du procédé de stérilisation particulier utilisé.
La performance certifiée d'un indicateur biologique peut être affectée par les conditions de stockage et de
transport qui précèdent son utilisation, par son mode d'utilisation ou encore par les paramètres de
fonctionnement du procédé des stérilisations. De plus, la procédure d'incubation employée après l'exposition
au procédé, la modification de la température, le type de milieu de culture, le fournisseur et le lot spécifique,
peuvent affecter la résistance mesurée en termes de récupération et de croissance. Pour ces raisons, il vaut
mieux suivre les recommandations du fabricant de l'indicateur biologique concernant le stockage et l'utilisation.
Après exposition, il est préférable que les indicateurs biologiques soient transférés aseptiquement (le cas
échéant) et incubés selon les spécifications du fabricant de l'indicateur biologique.
Les indicateurs biologiques ne sont pas destinés à indiquer que les produits dans la charge soumise au
procédé de stérilisation sont stériles. Les indicateurs biologiques sont utilisés pour vérifier l'efficacité d'un
procédé de stérilisation donné et de l'équipement employé, par l'évaluation de la létalité microbienne selon le
concept du niveau d'assurance de stérilité. Il convient qu'un personnel correctement formé mène ces études.
vi © ISO 2009 – Tous droits réservés
NORME INTERNATIONALE ISO 14161:2009(F)
Stérilisation des produits de santé — Indicateurs biologiques —
Directives générales pour la sélection, l'utilisation et
l'interprétation des résultats
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale fournit des directives pour la sélection, l'utilisation et l'interprétation des
résultats issus de l'application des indicateurs biologiques dans le développement, la validation et le contrôle
périodique des procédés de stérilisation. La présente Norme internationale s'applique aux indicateurs
biologiques pour lesquels il existe des Normes internationales.
NOTE 1 Voir, par exemple, la série de l'ISO 11138.
NOTE 2 Les informations générales fournies dans la présente Norme internationale peuvent utilement s'appliquer aux
procédés et aux indicateurs biologiques qui ne sont pas couverts par des Normes internationales existantes, par exemple
de nouveaux procédés de stérilisation ou des procédés en cours de développement.
La présente Norme internationale ne traite pas des procédés qui reposent uniquement sur l'élimination
physique des micro-organismes, par exemple la filtration.
La présente Norme internationale n'est pas destinée à s'appliquer aux procédés fonctionnant en combinaison
avec, par exemple, des laveurs-désinfecteurs ou des machines de rinçage et traitement à la vapeur des
canalisations.
La présente Norme internationale n'est pas destinée à s'appliquer aux procédés de stérilisation liquides.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 11135-1, Stérilisation des produits de santé — Oxyde d'éthylène — Partie 1: Exigences de
développement, de validation et de contrôle de routine d'un processus de stérilisation pour des dispositifs
médicaux
ISO 11138-1:2006, Stérilisation des produits de santé — Indicateurs biologiques — Partie 1: Exigences
générales
ISO 11138-2, Stérilisation des produits de santé — Indicateurs biologiques — Partie 2: Indicateurs
biologiques pour la stérilisation à l'oxyde d'éthylène
ISO 11138-3:2006, Stérilisation des produits de santé — Indicateurs biologiques — Partie 3: Indicateurs
biologiques pour la stérilisation à la chaleur humide
ISO 11138-4, Stérilisation des produits de santé — Indicateurs biologiques — Partie 4: Indicateurs
biologiques pour la stérilisation à la chaleur sèche
ISO 11138-5, Stérilisation des produits de santé — Indicateurs biologiques — Partie 5: Indicateurs
biologiques pour la stérilisation à la vapeur d'eau et au formaldéhyde à basse température
ISO 11737-1, Stérilisation des dispositifs médicaux — Méthodes microbiologiques — Partie 1: Détermination
d'une population de micro-organismes sur des produits
ISO 14937, Stérilisation des produits de santé — Exigences générales pour la caractérisation d'un agent
stérilisant et pour la mise au point, la validation et la vérification de routine d'un processus de stérilisation pour
dispositifs médicaux
ISO 17665-1, Stérilisation des produits de santé — Chaleur humide — Partie 1: Exigences pour le
développement, la validation et le contrôle de routine d'un procédé de stérilisation des dispositifs médicaux
ISO 18472:2006, Stérilisation des produits de santé — Indicateurs biologiques et chimiques — Appareillage
d'essai
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
accréditation
procédure par laquelle un organisme officiel reconnaît de manière formelle la compétence d'un organisme ou
d'une personne à effectuer des tâches spécifiques
[3]
NOTE 1 Voir l'ISO/CEI 17011 .
NOTE 2 L'accréditation en elle-même ne suffit pas à qualifier le laboratoire pour l'approbation d'un produit particulier.
Cependant, elle constitue une référence pour les autorités d'approbation et de certification lorsqu'elles décident d'accepter
ou non les données produites par un laboratoire donné, en liaison avec leurs propres activités.
3.2
technique aseptique
conditions et modes opératoires utilisés afin d'exclure l'introduction de toute contamination microbienne
3.3
charge biologique
population de micro-organismes viables sur ou dans un produit et/ou un système de barrière stérile
[ISO/TS 11139:2006, définition 2.2]
3.4
indicateur biologique
IB
système d'essai contenant des micro-organismes viables, garantissant une résistance définie à un procédé
de stérilisation spécifié
[ISO/TS 11139:2006, définition 2.3]
3.5
valeur de D
valeur de D
temps ou dose nécessaire pour inactiver 90 % d'une population de micro-organismes d'essai dans des
conditions établies
[ISO/TS 11139:2006, définition 2.11]
2 © ISO 2009 – Tous droits réservés
3.6
temps de maintien
période durant laquelle la variable de stérilisation au sein du stérilisateur et en tout point de la charge est
maintenue à l'intérieur de la plage spécifiée pour la phase de stérilisation
NOTE Adapté de l'ISO 17665-1:2006, définition 3.19.
3.7
porte-germes
support sur ou dans lequel a été déposé un nombre défini d'organismes d'essai viables
NOTE 1 Adapté de l'ISO 11138-1:2006, définition 3.2.
NOTE 2 L'organisme d'essai est un micro-organisme utilisé pour la fabrication de porte-germes inoculés.
3.8
qualification de l'installation
QI
processus d'obtention de preuves documentées selon lesquelles les équipements ont été fournis et installés
conformément à leurs spécifications
[ISO/TS 11139:2006, définition 2.22]
3.9
inoculation
ajout d'une quantité définie d'une entité microbienne caractérisée vers ou sur une unité
3.10
réduction logarithmique
RL
réduction du nombre de micro-organismes viables, exprimée en unités log
3.11
qualification opérationnelle
QO
processus d'obtention de preuves documentées selon lesquelles l'équipement installé fonctionne dans les
limites prédéterminées, dans la mesure où il est utilisé conformément à son mode opératoire
[ISO/TS 11139:2006, définition 2.27]
3.12
qualification de performance
QP
processus d'obtention de preuves documentées selon lesquelles l'équipement, installé et utilisé
conformément à son mode opératoire, fonctionne de façon constante conformément aux critères
prédéterminés et qu'il donne par conséquent un produit conforme à ses spécifications
[ISO/TS 11139:2006, définition 2.30]
3.13
dispositif d'épreuve de procédé
PCD
article conçu pour constituer une résistance définie à un procédé de stérilisation et destiné à évaluer
l'efficacité du procédé
[ISO/TS 11139:2006, définition 2.33]
3.14
site d'épreuve de procédé
SEP
endroit qui simule les conditions considérées comme étant les plus défavorables telles qu'elles sont indiquées
pour l'(les) agent(s) de stérilisation sur les produits à stériliser
3.15
paramètre de procédé
valeur spécifiée pour une variable du procédé
NOTE La spécification pour un procédé de stérilisation comprend les paramètres du procédé et leurs tolérances.
[ISO/TS 11139:2006, définition 2.34]
3.16
variable de procédé
condition associée à un procédé de stérilisation, et dont les changements altèrent l'efficacité du microbicide
EXEMPLES Le temps, la température, la pression, la concentration, l'humidité, la longueur d'onde.
[ISO/TS 11139:2006, définition 2.35]
3.17
micro-organisme de référence
souche microbienne obtenue à partir d'une collection de culture reconnue
[ISO/TS 11139:2006, définition 2.39]
3.18
résistomètre
matériel d'essai conçu pour créer des combinaisons de référence définies de paramètres physiques et/ou
chimiques d'un procédé de stérilisation
NOTE 1 Adapté de l'ISO 11138-1:2006, définition 3.15 et de l'ISO 18472:2006, définition 3.11.
NOTE 2 Également appelé Résistomètre d'Évaluation d'Indicateur Biologique (REIB).
3.19
réduction logarithmique de spores
RLS
log de la population initiale de spores, N , moins le log de la population finale, N
0 F
3.20
stérile
exempt de micro-organismes viables
[ISO/TS 11139:2006, définition 2.43]
3.21
niveau d'assurance de la stérilité
NAS
probabilité de présence d'un seul micro-organisme viable sur un produit après la stérilisation
−6 −3
NOTE Le terme NAS prend une valeur quantitative, généralement 10 ou 10 . Si l'on applique cette valeur
−6
quantitative à l'assurance de la stérilité, un NAS de 10 a une valeur inférieure mais offre une meilleure assurance de
−3
stérilité qu'un NAS de 10 .
[ISO/TS 11139:2006, définition 2.46]
4 © ISO 2009 – Tous droits réservés
3.22
stérilisation
procédé validé utilisé pour obtenir un produit exempt de micro-organismes viables
NOTE Dans un procédé de stérilisation, la nature de l'inactivation microbienne est exponentielle, par conséquent la
survie d'un micro-organisme sur une unité individuelle peut être exprimée en termes de probabilité. Cette probabilité peut
être réduite à un nombre très faible, mais elle ne peut jamais être nulle.
[ISO/TS 11139:2006, définition 2.47]
3.23
mise au point du cycle de stérilisation
procédure de détermination des paramètres de traitement appropriés qui permettront d'atteindre les
spécifications attendues et les revendications indiquées, pour un produit ou un groupe de produits donnés
3.24
validation du cycle de stérilisation
mode opératoire documenté utilisé pour obtenir, enregistrer et interpréter les résultats nécessaires pour établir
qu'un procédé fournit de façon constante un produit conforme aux spécifications préalablement déterminées
3.25
fournisseur
organisme ou personne qui procure un produit
EXEMPLE Producteur, distributeur, détaillant, marchand, prestataire de service ou d'information.
NOTE 1 Un fournisseur peut être interne ou externe à l'organisme.
NOTE 2 Dans une situation contractuelle, le fournisseur peut être appelé «contractant».
[ISO 9000:2005, définition 3.3.6]
3.26
fenêtre survie/destruction
étendue des temps d'exposition à un procédé de stérilisation dans des conditions définies, entre les
expositions les plus longues pour lesquelles tous les indicateurs biologiques présentent encore une
croissance (temps de survie), et les expositions les plus courtes pour lesquelles tous les indicateurs
biologiques exposés sont détruits (temps de destruction)
[ISO 11138-1:2006, définition 3.18]
3.27
tierce partie
personne ou organisme considéré(e) comme indépendant(e) des parties prenantes, du sujet concerné
[1]
NOTE 1 Voir l'ISO/CEI Guide 2 .
NOTE 2 Les parties prenantes sont généralement le fournisseur («première partie») et l'acheteur («seconde partie»).
3.28
utilisateur
personne ou organisme qui utilise les indicateurs biologiques dans un but donné
[4]
NOTE 1 Voir l'ISO 9000 .
NOTE 2 L'utilisateur est le client qui réceptionne un produit délivré par le fournisseur. Dans un contrat, l'utilisateur est
désigné comme «l'acheteur». L'utilisateur peut être le client, le bénéficiaire ou l'acheteur. Le client peut être interne ou
externe à l'organisation et représente la «seconde partie».
3.29
valeur de z
variation de la température d'exposition qui correspond, pour un procédé de stérilisation thermique, à une
variation d'un facteur 10 de la valeur de D
NOTE Voir l'ISO 11138-3 et l'ISO 11138-4.
4 Généralités
4.1 La présente Norme internationale fournit des directives sur les indicateurs biologiques qui peuvent
s'appliquer d'une manière générale à n'importe quel procédé de stérilisation, y compris à de nouveaux
procédés de stérilisation non encore couverts par des Normes internationales.
4.2 L'utilisation des indicateurs biologiques est documentée, en général, dans des modes opératoires et/ou
des instructions.
[7]
NOTE La mise en œuvre de systèmes de management de la qualité tels que l'ISO 13485 permet généralement de
satisfaire à cette disposition.
4.3 Pour démontrer l'efficacité d'un procédé de stérilisation, il convient que les indicateurs biologiques
soient toujours utilisés en combinaison avec des mesurages physiques et/ou chimiques. Lorsqu'une variable
physique et/ou chimique d'un procédé de stérilisation est en dehors des limites spécifiées, il convient
d'évaluer la raison pour laquelle le stérilisateur est dans l'impossibilité d'atteindre ses paramètres de procédé
et de corriger le problème. Il convient d'établir des systèmes et/ou des modes opératoires pour évaluer tous
les écarts par rapport aux limites des cycles du procédé, et de documenter les motifs d'acceptation de ces
écarts.
4.4 Un indicateur biologique approprié comprend un matériau porte-germes et son emballage et un
composant microbiologique connu comme étant adapté à une manipulation sans dispositifs de confinement
spéciaux. Il convient que les conditions de croissance soient correctement documentées et que l'utilisation de
l'indicateur soit décrite d'une manière aussi simple et précise que possible, pour éviter toute erreur
d'interprétation par l'utilisateur.
4.5 Il n'existe aucun système d'approbation formalisé au niveau international pour les indicateurs
biologiques qui sont commercialisés et utilisés à des fins indiquées ou dans des conditions indiquées.
Cependant, certaines autorités nationales de réglementation ont des exigences particulières pour les
indicateurs biologiques, et pour le choix et l'utilisation d'indicateurs biologiques lorsqu'ils sont utilisés pour la
validation et le contrôle des produits commercialisés comme stériles ou stérilisés.
4.6 Un indicateur biologique représente une épreuve microbiologique pour un procédé de stérilisation; il est
utilisé pour vérifier qu'un procédé de stérilisation a la capacité d'inactiver les micro-organismes qui ont une
résistance connue à un procédé de stérilisation de référence. Les organismes d'essai utilisés dans les
indicateurs biologiques ont typiquement une résistance à la stérilisation qui dépasse celle des micro-
organismes des charges biologiques courantes, même si certains organismes peuvent présenter une
résistance à la stérilisation supérieure à celle des organismes d'essai. L'utilisation du bon indicateur
biologique permet d'éprouver le procédé de stérilisation au-delà de ce que la charge biologique aurait permis,
grâce à une combinaison de la population et de la résistance. Si l'on pense que les produits à traiter sont
susceptibles d'être contaminés par des organismes particulièrement résistants, une stérilisation prolongée,
fondée sur la charge biologique, peut s'avérer nécessaire.
4.7 Les indicateurs biologiques ne sont pas conçus pour être utilisés dans un autre procédé que celui
spécifié par le fabricant, sur l'étiquette du produit. Les espèces et souches bactériennes sont sélectionnées
comme des indicateurs biologiques potentiels, sur la base de leur résistance reconnue à une méthode de
stérilisation spécifique, telles que certifiées par le fabricant. L'utilisation d'un indicateur biologique inapproprié
peut donner des résultats erronés.
Il convient que l'utilisateur s'assure que l'indicateur biologique a été qualifié pour les conditions de stérilisation
spécifiques utilisées. Cela peut nécessiter des informations complémentaires à celles fournies sur l'étiquette.
6 © ISO 2009 – Tous droits réservés
Lorsque les indicateurs biologiques sont utilisés en dehors des conditions de référence, l'utilisateur peut avoir
besoin d'informations sur la réaction à attendre de l'indicateur, par exemple l'effet des conditions d'humidité
sous-optimales sur les indicateurs biologiques utilisés dans un procédé à l'oxyde d'éthylène. Il convient que
les utilisateurs qui utilisent des indicateurs biologiques sans tenir compte des instructions stipulées par le
fabricant caractérisent soigneusement la résistance des indicateurs biologiques au procédé de stérilisation
concerné. Il convient que la relation de la réponse de l'indicateur biologique aux paramètres du procédé soit
clairement démontrée.
4.8 Il incombe aux responsables de la stérilisation du produit de s'assurer que le type d'indicateur
biologique utilisé pour valider et/ou effectuer une surveillance de routine d'un procédé de stérilisation donné
convient à cette utilisation.
4.9 Il convient de suivre toujours les recommandations du fabricant relatives à l'utilisation et au stockage
des indicateurs biologiques. Dans le cas contraire, l'intégrité de l'indicateur biologique peut être compromise.
Lorsque l'utilisateur sort le porte-germes inoculé de son emballage primaire, cela peut modifier certaines
caractéristiques de résistance. Il convient que l'utilisateur demande au fabricant des directives relatives à
l'étendue de ces modifications ou bien qu'il évalue les modifications des caractéristiques de résistance. Il est
recommandé que l'utilisateur démontre que les caractéristiques de performance du porte-germes inoculé sont
compatibles avec l'utilisation qu'il est prévu d'en faire.
4.10 Il est déconseillé d'utiliser les indicateurs biologiques après la date d'expiration indiquée par le fabricant.
4.11 Il convient que les personnes qui utilisent les indicateurs biologiques pour la validation et/ou la
surveillance de routine de la stérilisation soient correctement formées à leur utilisation. Il convient de justifier
l'intervalle de temps entre la fin du procédé de stérilisation et les essais sur l'IB, conformément à 8.2.4. Il
convient d'utiliser une technique aseptique pour le transfert des micro-organismes exposés au procédé de
stérilisation vers le milieu de récupération approprié.
4.12 La série de l'ISO 11138 donne les exigences relatives aux informations relatives aux indicateurs
biologiques qu'il convient que le fabricant fournisse. Les informations peuvent être fournies sur l'étiquette,
sous forme d'un insert apposé sur l'emballage, ou sous forme de spécifications générales, accompagnant les
indicateurs biologiques. Cette série de Normes internationales comprend également les exigences minimales
relatives aux caractéristiques de résistance. Les conditions et les méthodes d'essai sont données comme
méthodes de référence.
4.13 Les utilisateurs d'indicateurs biologiques proviennent d'un grand nombre de secteurs industriels,
d'entreprises privées et d'installations de santé. En général, il n'est pas nécessaire que les utilisateurs
effectuent des essais de résistance sur des indicateurs biologiques, mais ils peuvent avoir d'autres exigences
imposées par leur système d'assurance qualité, lequel comporte des audits fournisseurs et/ou fabricants
(voir 6.2.2).
4.14 La vérification des caractéristiques de résistance par l'utilisateur est une solution alternative ou
complémentaire à un audit, le cas échéant.
5 Caractéristiques des indicateurs biologiques
5.1 Généralités
5.1.1 Les indicateurs biologiques permettent d'évaluer directement la létalité microbienne d'un procédé de
stérilisation (voir Références [8] et [9]). Lorsqu'ils sont utilisés en parallèle de dispositifs de surveillance du
procédé physique et/ou chimique, les indicateurs biologiques peuvent fournir une indication de l'efficacité d'un
procédé de stérilisation donné.
5.1.2 Il convient de considérer un procédé de stérilisation comme satisfaisant uniquement lorsque les
paramètres physiques et/ou chimiques et les résultats microbiologiques souhaités, tels que déterminés par
une mise au point, une validation et un programme de contrôle appropriés du cycle de stérilisation, ont été
obtenus. Toute incapacité à obtenir les paramètres physiques et/ou chimiques et/ou satisfaire l'épreuve
microbiologique souhaités constitue la base pour déclarer le procédé de stérilisation comme étant non
[7] [22]
conforme (voir l'ISO 13485 et l'ISO 9001 ).
5.1.3 Les indicateurs biologiques se composent d'une population définie d'organismes d'essai présentés de
manière à permettre leur récupération à l'issue du traitement de stérilisation. Par exemple, les organismes
d'essai utilisés pour les procédés de stérilisation à l'oxyde d'éthylène peuvent être des spores d'une souche
appropriée de Bacillus subtilis ou Bacillus atrophaeus, comme indiqué dans l'ISO 11138-2. Pour la
stérilisation à la vapeur ou à la chaleur humide, les organismes d'essais utilisés peuvent être des spores
d'une souche appropriée de Geobacillus stearothermophilus, comme indiqué dans l'ISO 11138-3. Des
organismes d'essai autres que les spores bactériennes peuvent être utilisés s'il a été démontré qu'ils
présentent une résistance appropriée au procédé de stérilisation.
5.1.4 Toutes les formules utilisées pour déterminer les caractéristiques de résistance des indicateurs
biologiques, comme les valeurs de D, se fondent sur le fait que la réaction d'inactivation suit une cinétique du
premier ordre, à condition que la valeur du coefficient de détermination, r , de la partie linéaire de la courbe
de survie soit supérieure ou égale à 0,8 (voir Annexes E et F). La souche, la méthode de production, le liquide
de suspension, le porte-germes et les matériaux d'emballage affectent tous les caractéristiques de résistance
du produit fini (voir l'ISO 11138-1).
5.1.5 La conception et la fabrication d'un indicateur biologique peuvent produire des caractéristiques de
résistance uniques et peuvent varier selon que l'indicateur biologique est destiné à être utilisé pour la mise au
point du cycle et la validation d'un procédé de stérilisation ou pour des opérations de contrôle de routine. Si la
conception de l'indicateur biologique destiné à être utilisé pour la surveillance de routine diffère de celui utilisé
pour valider les procédés de stérilisation, il convient de corréler l'épreuve du procédé lors de la validation avec
celle réalisée lors de la surveillance de routine.
5.1.6 Les caractéristiques de résistance des indicateurs biologiques varient en fonction des méthodes de
fabrication et des conditions d'essai. En fonction de leur emplacement dans la charge et des conditions létales
spécifiques à chacun de ces emplacements, les indicateurs biologiques issus du même lot peuvent présenter
des capacités de survie différentes (voir 7.2.3). Il convient que les utilisateurs d'indicateurs biologiques notent
que dix indicateurs dispersés dans l'ensemble de la charge ne sont pas considérés comme des réplicats en
raison des différences de létalité existant dans la chambre et la charge (voir la Note en 11.3.1).
5.2 Suspension d'organismes d'essai pour inoculation directe des produits
5.2.1 L'inoculation directe d'organismes d'essai sur ou dans un produit peut être nécessaire dans la phase
de mise au point des cycles de stérilisation ainsi que dans le cadre d'autres études, chaque fois que
l'utilisation d'un indicateur biologique n'est pas réalisable. L'inoculation directe peut convenir à l'évaluation de
facteurs tels que la capacité des produits à être stérilisés, l'identification des endroits les plus difficiles à
stériliser au sein du dispositif, et des effets microbiologiques localisés, par exemple environnements soumis à
une chaleur humide par rapport à des environnements soumis à une chaleur sèche.
Il convient que les raisons qui ont conduit à sélectionner un ou plusieurs endroits d'un dispositif médical ou
d'une charge de stérilisation comme étant «les plus difficiles à stériliser» soient documentées à partir de
données expérimentales ou de l'expérience acquise avec le procédé de stérilisation concerné. Dans la
pratique, «l'endroit considéré comme le plus difficile à stériliser» représente les emplacements susceptibles
de fournir une résistance élevée au procédé de stérilisation. Il convient de se référer à des normes de
stérilisation (par exemple l'ISO 11135-1 et l'ISO 17665-1) pour connaître les critères qui permettent de
déterminer et sélectionner les emplacements à considérer comme difficiles à stériliser.
5.2.2 Pour évaluer l'efficacité de la stérilisation sur un site ou un emplacement particulier du produit,
l'espèce et la population souhaitées de l'organisme d'essai peuvent être inoculées à ces endroits. L'utilisation
de suspensions d'organismes d'essai pour préparer des porte-germes inoculés ou des produits inoculés
nécessite des précautions particulières. Les matériaux sur lesquels des organismes d'essai sont inoculés
peuvent altérer les caractéristiques de résistance de ces derniers. La résistance peut être plus élevée ou plus
faible en raison d'un dépôt formant une monocouche ou une multicouche, des effets de revêtement et/ou des
effets bactériostatiques ou bactéricides du matériau. Il convient de valider les méthodes de récupération des
organismes d'essai après traitement en vue de garantir un niveau adéquat de récupération à partir du produit
8 © ISO 2009 – Tous droits réservés
(voir l'ISO 11737-1). Il convient d'exprimer la récupération des organismes d'essai en termes de pourcentage
de récupération de l'inoculum initial.
5.2.3 Une inoculation directe des produits ou matériaux avec une suspension de microorganismes peut
entraîner une augmentation ou une diminution de la survie des organismes d'essai. Cela peut affecter le
pourcentage observé de récupération de l'inoculum initial par rapport au pourcentage attendu dans les
conditions de stérilisation spécifiées. Les produits inoculés peuvent être soumis à essai soit selon la méthode
de la courbe de survie (dénombrement/comptage direct), soit selon la méthode des fractions négatives (voir
Figure A.4). Ces essais nécessitent des techniques aseptiques.
5.2.4 La valeur de D et, le cas échéant, la valeur de z, sont des valeurs constantes uniquement dans des
conditions déterminées et définies. Les caractéristiques de résistance d'une suspension de spores fournie par
le fabricant ou par le fournisseur d'indicateurs biologiques peuvent ne pas correspondre aux caractéristiques
de résistance pour les études d'inoculation directe du produit. Il convient que les caractéristiques de
résistance soient mesurées pour le porte-germes utilisé (support solide ou liquide) ainsi que pour le cycle
spécifique de stérilisation utilisé.
5.3 Porte-germes inoculés
5.3.1 Les porte-germes inoculés se composent d'une population définie d'organismes d'essai inoculés sur
ou dans un matériau du porte-germes approprié (voir l'ISO 11138-1:2006, Annexe B). Il convient de s'assurer
que l'intégrité du matériau du porte-germes sélectionné est suffisante pour résister au traitement de
stérilisation sans dégradation et pour minimiser les pertes d'organismes d'essai inoculés au cours du transport
et de la manipulation.
5.3.2 Les caractéristiques de résistance d'un organisme d'essai en suspension peuvent changer
sensiblement une fois qu'il s'est déposé sur ou dans les porte-germes. Plusieurs facteurs peuvent influer sur
les caractéristiques de résistance, comme le type de surface sur laquelle la suspension est inoculée (par
exemple matériaux solides, produits visqueux ou fluides), la façon dont les spores sont dispersées et traitées
ultérieurement, les méthodes de séchage, etc.
5.3.3 Si un porte-germes inoculé est retiré de l'emballage primaire de l'indicateur biologique pour la mise au
point de cycle, des études de validation de cycles, ou pour des dispositifs d'épreuve dans le cadre du contrôle
de routine du procédé, il incombe à l'utilisateur de fournir les justifications pour cette application. Il convient de
reconnaître que la résistance du micro-organisme sur le porte-germes inoculé peut différer de la résistance de
l'indicateur biologique emballé telle que mentionnée sur l'étiquette.
5.3.4 Les caractéristiques de rés
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.
Loading comments...