ISO/FDIS 25712

IUC 443:2025(en)
ISO/IULTCS
Secretariat: ISO
Date: 20252026-01-12-18
Chemicals for the leather tanning industry — Determination of the
total content of melamine
Produits chimiques pour l'industrie du tannage du cuir — Détermination de la teneur totale en
melaminemélamine
FDIS stage
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may be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying,
or posting on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO
at the address below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: + 41 22 749 01 11
EmailE-mail: copyright@iso.org
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
Contents
Foreword . iv
Introduction . v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 1
5 Apparatus . 1
6 Reagents . 2
7 Sampling and sample preparation . 4
8 Procedure . 4
8.1 Extraction . 4
8.2 Instrumental analysis . 5
9 Expression of results . 5
9.1 Calculation without internal standard . 5
9.2 Calculation with internal standard . 5
10 Precision . 6
11 Test report . 6
Annex A (informative) Chromatographic analysis operating parameters for LC-MS/MS . 8
Annex B (informative) Chromatographic analysis operating parameters for LC-UV or LC-DAD . 10
Annex C (informative) Precision . 11
Bibliography . 12

iii
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are described
in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the different types of
ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the editorial rules of the
ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
ISO draws attention to the possibility that the implementation of this document may involve the use of (a)
patent(s). ISO takes no position concerning the evidence, validity or applicability of any claimed patent rights
in respect thereof. As of the date of publication of this document, ISO had not received notice of (a) patent(s)
which may be required to implement this document. However, implementers are cautioned that this may not
represent the latest information, which may be obtained from the patent database available at
www.iso.org/patents. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and expressions
related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the World Trade
Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www.iso.org/iso/foreword.html.
IULTCS, originally formed in 1897, is a world-wide organization of professional leather societies to further the
advancement of leather science and technology. IULTCS has three Commissions, which are responsible for
establishing international methods for the sampling and testing of leather. ISO recognizes IULTCS as an
international standardizing body for the preparation of test methods for leather.
This document was prepared by the Chemical Test Commission of the International Union of Leather
Technologists and Chemists Societies (IUC Commission, IULTCS), in collaboration with the European
Committee for Standardization (CEN) Technical Committee CEN/TC 289, Leather, in accordance with the
Agreement on technical cooperation between ISO and CEN (Vienna Agreement).
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.
© ISO #### 2026 – All rights reserved
iv
Introduction
This document includes a procedure for analysing melamine in leather tanning chemicals using liquid
chromatography (LC) equipment.
In the leather industry, melamine can be present as a residual monomer in resins based on the polymerisation
of melamine, where melamine-formaldehyde resin is the more typical. This type of resin is present in chemical
products such as melamine-formaldehyde resin or compound products and is used in the retanning stage of
the tanning process.
At present, the official European Chemicals Agency (ECHA) classification recognized in the European Union
(EU) for Melaminemelamine is the following:
— — Substancesubstance of very high concern (SVHC) and included in the candidate list for
[1[1] ]
authorisation ; ;
[2[2] ]
— — Suspectedsuspected to be Carcinogenic ; ;
[2[2] ]
— — Underunder assessment as Persistent, Bioaccumulative and Toxic ; ;
[2[2] ]
— — Underunder assessment as Endocrine Disrupting . .
v
IUC 443:20252026(en)
Chemicals for the leather tanning industry — Determination of the
total content of melamine
1 Scope
This document specifies a method for determining the total content (solvent extractable) of melamine in
chemicals for the leather tanning industry.
This method requires the use of liquid chromatography (LC) with a triple quadrupole mass spectrometer
(MS/MS), an ultraviolet (UV) detector, or diode array detector (DAD) to identify and quantify the melamine.
2 Normative references
There are no normative references in this document.
3 Terms and definitions
No terms and definitions are listed in this document.
ISO and IEC maintain terminology databases for use in standardization at the following addresses:
— — ISO Online browsing platform: available at https://www.iso.org/obp
— — IEC Electropedia: available at https://www.electropedia.org/
4 Principle
The chemical sample is extracted in a 50:50 (volume fraction) mixture of acetonitrile and water. Subsequently,
an aliquot of the extract is diluted in the appropriate mobile phase and analysed using LC-MS, LC-MS/MS, or
LC with a UV (LC-UV) or diode array detector (DAD; LC-DAD).
Melamine is a highly polar substance. From a chromatographic perspective, hydrophilic interaction liquid
chromatography (HILIC) provides good separation and quantification of melamine using LC-MS, LC-MS/MS,
LC-UV, and LC-DAD. However, because HILIC-based columns are not widely available in laboratories,
reversed-phase (RP) chromatography using C8 or C18 columns can be a suitable alternative, offering good
separation with LC-MS and LC-MS/MS detection. Therefore, this document describes two alternative
chromatographic approaches: one using a HILIC column and the other using an RP (C18 or C8) column.
NOTE Melamine is water-soluble but has low solubility in organic solvents. Therefore, care is taken to ensure
complete solubilization of melamine during all analytical steps.
5 Apparatus
The usual laboratory apparatus and, in particular, the following shall be used:
5.1 5.1 Ultrasonic bath, with controllable heating capable of maintaining a temperature of
(30 ± 2) °C.
5.2 5.2 Glass container with a screw cap, for example volume of 20 ml.
5.3 5.3 Suitable syringe membrane filters, for example PTFE with pore size 0,2 µm.
5.4 5.4 Volumetric flasks, for example volume of 10 ml and 100 ml.
5.5 5.5 LC vials, with cap, for example volume of 2 ml.
5.6 5.6 Analytical balance, with a resolution of 0,1 mg.
5.7 5.7 Pipettes, various sizes, for example volume of 0,1 ml to 20 ml.
5.8 5.8 Instrumental equipment, LC-MS/MS.
5.9 5.9 Alternative instrumental equipment, LC-MS, LC-UV, LC-DAD.
NOTE If two detectors are used, they are arranged in series on the same LC system.
6 Reagents
If not otherwise specified, analytical reagent grade chemicals shall be used.
® 11)
6.1 6.1 Acetonitrile, CAS Registry Number (CAS RN) 75-05-8. For LC-MS/MS, LC/MS quality shall
be used HPLC quality methanol is suitable for LC-UV or LC-DAD.
6.2 6.2 Water, LC-MS quality, HPLC grade for LC-DAD.
6.3 6.3 Extraction mix.
Mix 500 ml of acetonitrile (6.1(6.1)) with 500 ml of water (6.2(6.2),), to obtain an acetonitrile:water (50:50,
volume fraction) mixture. ®
6.4 6.4 Glacial acetic acid, CAS RN 64-19-7, minimum 99,0 % (mass fraction). ®
6.5 6.5 Ammonium acetate, CAS RN 631-61-8, quality for LC-MS.
6.6 6.6 10 mmol/l ammonium acetate buffer pH 5,9.
A 10 mmol/l ammonium acetate buffer (pH 5,9) is prepared fresh daily by dissolving approximately 0,771 g
of ammonium acetate (6.5(6.5)) in 1 l of water (6.2(6.2).). After dissolution, add 40 ml of glacial acetic acid
(6.4(6.4)) and adjust the pH to 5,9 if needed.
6.7 6.7 Solution A, mobile phase for HILIC column.
Mix 920 ml of acetonitrile (6.1(6.1)) with 80 ml of 10 mmol/l ammonium acetate buffer (6.6(6.6)) to obtain
an acetonitrile:10 mmol/l ammonium acetate buffer (92:8, volume fraction) mixture.
6.8 6.8 Solution B, mobile phase for HILIC column.
Mix 600 ml of acetonitrile (6.1(6.1)) with 400 ml of 10 mmol/l ammonium acetate buffer (6.6(6.6)) to obtain
an acetonitrile:10 mmol/l ammonium acetate buffer (60:40, volume fraction) mixture.
6.9 6.9 Solution C, mobile
...

PROJET FINAL
Norme
internationale
ISO/FDIS 25712
IUC 443
IULTCS
Produits chimiques pour
Début de vote:
l'industrie du tannage du cuir —
2026-01-26
Détermination de la teneur totale
Vote clos le:
en mélamine
2026-03-23
Chemicals for the leather tanning industry — Determination of
the total content of melamine
LES DESTINATAIRES DU PRÉSENT PROJET SONT
INVITÉS À PRÉSENTER, AVEC LEURS OBSERVATIONS,
NOTIFICATION DES DROITS DE PROPRIÉTÉ DONT ILS
AURAIENT ÉVENTUELLEMENT CONNAISSANCE ET À
FOURNIR UNE DOCUMENTATION EXPLICATIVE.
OUTRE LE FAIT D’ÊTRE EXAMINÉS POUR
ÉTABLIR S’ILS SONT ACCEPTABLES À DES FINS
INDUSTRIELLES, TECHNOLOGIQUES ET COM-MERCIALES,
AINSI QUE DU POINT DE VUE DES UTILISATEURS, LES
PROJETS DE NORMES
TRAITEMENT PARALLÈLE ISO/CEN
INTERNATIONALES DOIVENT PARFOIS ÊTRE CONSIDÉRÉS
DU POINT DE VUE DE LEUR POSSI BILITÉ DE DEVENIR DES
NORMES POUVANT
SERVIR DE RÉFÉRENCE DANS LA RÉGLEMENTATION
NATIONALE.
Numéro de référence
IUC 443:2026(fr) © ISO 2026
PROJET FINAL
IUC 443:2026(fr) Norme
internationale
ISO/FDIS 25712
IUC 443
IULTCS
Produits chimiques pour
Début de vote:
l'industrie du tannage du cuir —
2026-01-26
Détermination de la teneur totale
Vote clos le:
en mélamine
2026-03-23
Chemicals for the leather tanning industry — Determination of
the total content of melamine
LES DESTINATAIRES DU PRÉSENT PROJET SONT
INVITÉS À PRÉSENTER, AVEC LEURS OBSERVATIONS,
NOTIFICATION DES DROITS DE PROPRIÉTÉ DONT ILS
AURAIENT ÉVENTUELLEMENT CONNAISSANCE ET À
FOURNIR UNE DOCUMENTATION EXPLICATIVE.
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
OUTRE LE FAIT D’ÊTRE EXAMINÉS POUR
ÉTABLIR S’ILS SONT ACCEPTABLES À DES FINS
© ISO 2026 INDUSTRIELLES, TECHNOLOGIQUES ET COM-MERCIALES,
AINSI QUE DU POINT DE VUE DES UTILISATEURS, LES
Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
PROJETS DE NORMES
TRAITEMENT PARALLÈLE ISO/CEN
INTERNATIONALES DOIVENT PARFOIS ÊTRE CONSIDÉRÉS
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
DU POINT DE VUE DE LEUR POSSI BILITÉ DE DEVENIR DES
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
NORMES POUVANT
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
SERVIR DE RÉFÉRENCE DANS LA RÉGLEMENTATION
NATIONALE.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Numéro de référence
Publié en Suisse ISO/FDIS 25712:2026(fr)
IUC 443:2026(fr) © ISO 2026
ii
IUC 443:2026(fr)
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe. 1
5 Appareillage . 1
6 Réactifs . 2
7 Échantillonnage et préparation des échantillons . 4
8 Mode opératoire . 4
8.1 Extraction .4
8.2 Analyse instrumentale .5
9 Expression des résultats . 5
9.1 Calcul sans étalon interne .5
9.2 Calcul avec étalon interne .5
10 Fidélité . 6
11 Rapport d'essai . 6
Annexe A (informative) Paramètres de fonctionnement de l'analyse chromatographique
pour LC-MS/MS . 7
Annexe B (informative) Paramètres de fonctionnement de l'analyse chromatographique
pour LC-UV ou LC-DAD . 9
Annexe C (informative) Fidélité . .10
Bibliographie .11

iii
IUC 443:2026(fr)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document
a été rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2
(voir www.iso.org/directives).
L'ISO attire l'attention sur le fait que la mise en application du présent document peut entraîner l'utilisation
d'un ou de plusieurs brevets. L'ISO ne prend pas position quant à la preuve, à la validité et à l'applicabilité
de tout droit de propriété revendiqué à cet égard. À la date de publication du présent document, l'ISO
n'avait pas reçu notification qu'un ou plusieurs brevets pouvaient être nécessaires à sa mise en application.
Toutefois, il y a lieu d'avertir les responsables de la mise en application du présent document que des
informations plus récentes sont susceptibles de figurer dans la base de données de brevets, disponible à
l'adresse www.iso.org/brevets. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir identifié tout ou
partie de tels droits de brevet.
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données pour
information, par souci de commodité, à l'intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion de
l'ISO aux principes de l'Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au
commerce (OTC), voir www.iso.org/iso/fr/avant-propos.html.
L'IULTCS, initialement créée en 1897, est une organisation mondiale de sociétés de cuir professionnelles
destinée à faire progresser la science et la technologie du cuir. L'IULTCS a trois Commissions, lesquelles sont
chargées d'établir des méthodes internationales d'échantillonnage et d'essai du cuir. L'ISO reconnaît l'IULTCS
comme un organisme international de normalisation pour la préparation des méthodes d'essai pour le cuir.
Le présent document a été élaboré par la Commission des essais chimiques de l'Union internationale des
sociétés de techniciens et chimistes du cuir (commission IUC, IULTCS), en collaboration avec le comité
technique CEN/TC 289, Cuir, du Comité européen de normalisation (CEN), conformément à l'Accord de
coopération technique entre l'ISO et le CEN (Accord de Vienne).
Il convient que l'utilisateur adresse tout retour d'information ou toute question concernant le présent
document à l'organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes se
trouve à l'adresse www.iso.org/fr/members.html.

iv
IUC 443:2026(fr)
Introduction
Le présent document comprend une procédure d'analyse de mélamine dans des produits chimiques de
tannage du cuir utilisant un équipement de chromatographie en phase liquide (LC).
Dans l'industrie du cuir, la mélamine peut être présente sous forme de monomère résiduel dans des résines
basées sur la polymérisation de la mélamine, où la résine mélamine-formaldéhyde est la plus typique. Ce
type de résine est présent dans les produits chimiques tels que la résine mélamine-formaldéhyde ou les
produits composés et est utilisé au stade de retannage du procédé de tannage.
Actuellement, la classification officielle de l'Agence européenne des produits chimiques (ECHA) reconnue
dans l'Union européenne (UE) pour la mélamine est la suivante:
[1]
— substance extrêmement préoccupante (SVHC) et incluse dans la liste des candidats à l'autorisation ;
[2]
— suspectée d'être cancérigène ;
[2]
— en cours d'évaluation en tant que produit persistant, bioaccumulatif et toxique ;
[2]
— en cours d'évaluation en tant que perturbateur endocrinien .

v
PROJET FINAL Norme internationale
IUC 443:2026(fr)
Produits chimiques pour l'industrie du tannage du cuir —
Détermination de la teneur totale en mélamine
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie une méthode de détermination de la teneur totale (extractible au solvant) de
mélamine dans les produits chimiques pour l'industrie du tannage du cuir.
Cette méthode exige l'utilisation d'une chromatographie en phase liquide (LC) avec un spectromètre de
masse triple quadripoles (MS/MS), un détecteur ultraviolet (UV) ou un détecteur à barrette de diodes (DAD)
pour identifier et quantifier la mélamine.
2 Références normatives
Le présent document ne contient aucune référence normative.
3 Termes et définitions
Aucun terme n'est défini dans le présent document.
L'ISO et l'IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en normalisation,
consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l'adresse https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: disponible à l'adresse https:// www .electropedia .org/
4 Principe
L'échantillon chimique est extrait dans un mélange de 50:50 (fraction volumique) d'acétonitrile et d'eau. Par
la suite, une aliquote de l'extrait est diluée dans la phase mobile appropriée et analysée à l'aide de LC-MS, LC-
MS/MS ou de LC avec un détecteur UV (LC-UV) ou un détecteur à barrette de diodes (DAD; LC-DAD).
La mélamine est une substance hautement polaire. Du point de vue chromatographique, la chromatographie
à interaction hydrophile (HILIC) fournit une bonne séparation et une bonne quantification de la mélamine
à l'aide de LC-MS, LC-MS/MS, LC-UV et LC-DAD. Cependant, comme les colonnes HILIC sont peu répandues
dans les laboratoires, la chromatographie en phase inverse (RP) utilisant des colonnes C8 ou C18 peut
être une alternative appropriée, offrant une bonne séparation avec une détection LC-MS et LC-MS/MS. Par
conséquent, le présent document décrit deux approches chromatographiques alternatives: l'une utilisant
une colonne HILIC et l'autre utilisant une colonne RP (C18 ou C8).
NOTE La mélamine est soluble dans l'eau, mais présente un
...