ISO 16140-3:2021

NORME ISO
INTERNATIONALE 16140-3
Première édition
2021-01
Microbiologie de la chaîne
alimentaire — Validation des
méthodes —
Partie 3:
Protocole pour la vérification dans
un seul laboratoire de méthodes de
référence et de méthodes alternatives
validées
Microbiology of the food chain — Method validation —
Part 3: Protocol for the verification of reference methods and
validated alternative methods in a single laboratory
Numéro de référence
©
ISO 2021
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Sommaire Page
Avant-propos .v
Introduction .vi
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 2
4 Principes généraux de vérification des méthodes qualitatives (recherche) et
des méthodes quantitatives . 5
4.1 Généralités . 5
4.2 Vérification de la mise en œuvre . 5
4.3 Vérification des matrices (d’aliments) . 6
4.4 Exigences relatives à la vérification de la mise en œuvre et à la vérification
des matrices (d’aliments) . 6
4.5 Caractéristiques de performance .10
5 Méthodes qualitatives — Protocole technique de vérification .10
5.1 Détermination de la LOD estimée (eLOD ) .10
50 50
5.2 Protocole d’étude .10
5.3 Sélection des matrices (d’aliments) .12
5.4 Contamination artificielle .12
5.4.1 Sélection des souches .12
5.4.2 Ensemencement des prises d’essai .12
5.5 Évaluation des résultats .14
5.5.1 Détermination de la eLOD50 à l’aide du protocole 1 .14
5.5.2 Détermination de la eLOD50 à l’aide du protocole 2 .16
5.5.3 Utilisation du protocole 3 .18
5.6 Limites d’acceptabilité .18
5.7 Analyse des causes .19
6 Méthodes quantitatives — Protocole technique de vérification .20
6.1 Détermination de l’écart-type de reproductibilité intralaboratoire .20
6.1.1 Généralités .20
6.1.2 Protocole d’étude .20
6.1.3 Sélection de la matrice (d’aliment) .22
6.1.4 Contamination naturelle .22
6.1.5 Contamination artificielle .22
6.1.6 Évaluation des résultats .24
6.1.7 Limite d’acceptabilité.24
6.1.8 Analyse des causes .26
6.2 Détermination du biais estimé (eBiais) .26
6.2.1 Généralités .26
6.2.2 Protocole d’étude .26
6.2.3 Sélection des matrices (d’aliments) .27
6.2.4 Contamination artificielle .27
6.2.5 Évaluation des résultats .28
6.2.6 Limite d’acceptabilité.28
6.2.7 Analyse des causes .29
7 Méthodes alternatives validées de confirmation et de typage — Protocole
technique de vérification .30
7.1 Généralités .30
7.2 Vérification de la mise en œuvre .30
7.3 Protocole d’étude .30
7.3.1 Généralités .30
7.3.2 Sélection des souches .31
7.4 Évaluation des résultats .31
7.5 Limite d’acceptabilité .31
7.6 Analyse des causes .32
8 Résumé des limites d’acceptabilité applicables à la vérification des méthodes validées .32
Annexe A (informative) Classification des catégories (d’aliments) et suggestions
de combinaisons cibles pour les études de vérification .33
Annexe B (informative) Recommandations sur la façon de choisir une matrice (d’aliment)
difficile ou des matrices (d’aliments) difficiles (challenging) pour la vérification
des matrices (d’aliments) .49
Annexe C (informative) Vérification de la méthode qualitative — Exemple .52
Annexe D (informative) Vérification de la méthode quantitative — Exemple .61
Annexe E (informative) Vérification de la méthode alternative validée de confirmation ou
de typage — Exemple .66
Annexe F (normative) Protocole pour la vérification dans un seul laboratoire de méthodes
de référence non validées .70
Bibliographie .79
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Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/ directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/ brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la signification des termes et expressions spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation
de la conformité, ou pour toute autre information au sujet de l’adhésion de l’ISO aux principes de
l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au commerce (OTC),
voir le lien suivant: www .iso .org/ iso/ fr/ avant -propos .html.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité
SC 9, Microbiologie, en collaboration avec le comité technique CEN/TC 463, Microbiologie de la chaîne
alimentaire, du comité européen de normalisation (CEN), conformément à l’Accord sur la coopération
technique entre l’ISO et le CEN (Accord de Vienne).
Une liste de toutes les parties de la série ISO 16140 se trouve sur le site web de l’ISO.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/ members .html.
Introduction
0.1  La série ISO 16140
La série ISO 16140 a été élaborée en réponse à la nécessité de disposer de différentes techniques de
validation ou de vérification des méthodes d’essai. Elle succède à l’ISO 16140:2003. La série ISO 16140
comprend six parties ayant le titre général, Microbiologie de la chaîne alimentaire — Validation des
méthodes:
— Partie 1: Vocabulaire;
— Partie 2: Protocole pour la validation de méthodes alternatives (commerciales) par rapport à une
méthode de référence;
— Partie 3: Protocole pour la vérification dans un seul laboratoire de méthodes de référence et de méthodes
alternatives validées;
— Partie 4: Protocole pour la validation de méthodes dans un seul laboratoire;
— Partie 5: Protocole pour la validation interlaboratoires de méthodes non commerciales par plan
factoriel;
— Partie 6: Protocole pour la validation de méthodes alternatives (commerciales) pour la confirmation
microbiologique et le typage.
L’ISO 17468 est une Norme internationale étroitement liée, qui établit les règles techniques pour le
développement et la validation de méthodes normalisées.
En général, deux étapes sont nécessaires avant de pouvoir utiliser une méthode en laboratoire.
— La première étape est la validation de la méthode. Celle-ci est effectuée à l’aide d’une étude dans un seul
laboratoire suivie d’une étude interlaboratoires (voir l’ISO 16140-2, l’ISO 16140-5 et l’ISO 16140-6).
Dans le cas où une méthode est validée dans un unique laboratoire (voir l’ISO 16140-4), aucune
étude interlaboratoires n’est effectuée.
— La deuxième étape est la vérification des méthodes, au cours de laquelle un laboratoire prouve
qu’il peut mettre en œuvre une méthode validée de manière satisfaisante. Celle-ci est décrite dans
le présent document (c’est-à-dire, l’ISO 16140-3). La vérification est uniquement applicable aux
méthodes qui ont été validées à l’aide d’une étude interlaboratoires.
On distingue en général deux types de méthodes: les méthodes de référence et les méthodes alternatives.
Une méthode de référence est définie dans l’ISO 16140-1:2016, 2.59, comme étant une «méthode
reconnue internationalement et largement acceptée». La note à l’article clarifie qu’«il s’agit des normes
ISO et des normes publiées conjointement par l’ISO et le CEN ou d’autres normes régionales/nationales
de statut équivalent».
Dans la série ISO 16140, les méthodes de référence comprennent les méthodes de référence normalisées
(ISO et CEN) telles que définies dans l’ISO 17468:2016, 3.5, en tant que «méthode de référence décrite
dans une norme».
Une méthode alternative (méthode soumise à validation) est définie dans l’ISO 16140-1:2016, 2.4, en
tant que «méthode d’analyse permettant de détecter ou de quantifier, pour une catégorie de produits
donnée, le même analyte que celui détecté ou quantifié avec la méthode de référence correspondante».
La note à l’article clarifie que: «La méthode peut être commerciale. L’adjectif «alternatif» se réfère à la
totalité du «mode opératoire d’analyse et du système réactionnel». Ce terme recouvre tous les éléments
nécessaires à la mise en œuvre de la méthode, qu’ils soient matériels ou autres.»
L’ISO 16140-4 traite de la validation dans un seul laboratoire. Par conséquent, les résultats sont
uniquement valides dans le laboratoire effectuant l’étude. Dans ce cas, aucune vérification (comme
décrit dans le présent document) n’est requise. L’ISO 16140-5 décrit les protocoles applicables aux
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méthodes non commerciales dans lesquelles une validation plus rapide est nécessaire ou dans lesquelles
la méthode à valider est hautement spécialisée, et le nombre de laboratoires participants requis par
l’ISO 16140-2 ne peut pas être atteint. L’ISO 16140-4 et l’ISO 16140-5 peuvent être utilisées pour la
validation comparativement à une méthode de référence. L’ISO 16140-4 (méthodes qualitatives et
quantitatives) et l’ISO 16140-5 (méthodes quantitatives uniquement) peuvent également être utilisées
pour la validation sans méthode de référence.
Le logigramme de la Figure 1 donne un aperçu des relations entre les différentes parties susmentionnées.
Il aide également l’utilisateur à choisir la partie appropriée de la série ISO 16140, en tenant compte de
l’objectif de l’étude et des remarques énoncées ci-dessus.
Figure 1 — Logigramme relatif à l’application de la série ISO 16140
NOTE 1 Dans le présent document, les termes «catégorie», «type» et/ou «matrice» sont parfois associés au
terme «(aliment)» pour une meilleure compréhension. Cependant, le terme «(aliment)» peut être remplacé par
«aliment pour (animaux)» et par les autres domaines de la chaîne alimentaire tels que mentionnés à l’Article 1.
NOTE 2 Le principe général de la vérification des méthodes est que la méthode à vérifier (méthode alternative
ou de référence) doit être validée. Cependant, certaines méthodes de référence (y compris les normes ISO ou
CEN) ne sont pas encore (entièrement) validées. Pour la vérification de ces méthodes, les protocoles sont décrits
à l’Annexe F.
L’ISO 16140-6 est quelque peu différente des autres parties de la série ISO 16140 car elle concerne une
situation très spécifique dans laquelle seul le mode opératoire de confirmation d’une méthode doit
être validé [par exemple, la confirmation biochimique des Enterobacteriaceae (voir l’ISO 21528-2)].
Le mode opératoire de confirmation modifie un résultat suspecté (présomptif) en un résultat positif
confirmé. La validation des méthodes de typage alternatives (par exemple, sérotypage de Salmonella)
est également couverte par l’ISO 16140-6. L’étude de validation de l’ISO 16140-6 définit clairement la ou
les gélose(s) sélective(s) à partir de laquelle/desquelles les souches peuvent être confirmées en utilisant
la méthode alternative de confirmation. Lorsque la méthode alternative de confirmation est validée,
elle ne peut être appliquée que si les souches sont cultivées sur une gélose utilisée et jugée acceptable
lors de l’étude de validation. La Figure 2 illustre les situations dans lesquelles une méthode alternative
de confirmation validée conformément à l’ISO 16140-6 peut être appliquée (voir le texte dans les cases).
Figure 2 — Utilisation de méthodes alternatives de confirmation (voir l’ISO 16140‑6)
EXEMPLE Un exemple d’application d’une méthode alternative de confirmation validée est donné ci-après.
Une méthode alternative de confirmation fondée sur une ELISA a été validée pour remplacer la confirmation
biochimique de Salmonella telle qu’elle est décrite dans l’ISO 6579-1. Lors de l’étude de validation, la gélose XLD
(gélose obligatoire conformément à l’ISO 6579-1) ainsi que la gélose BGA et une gélose chromogène spécifiée
(deux géloses facultatives pour le deuxième ensemencement conformément à l’ISO 6579-1) ont été utilisées
pour commencer la confirmation. La méthode de confirmation validée peut être utilisée pour remplacer la
confirmation biochimique dans les conditions suivantes:
— par des laboratoires utilisant l’ISO 6579-1; ou
— par des laboratoires utilisant une méthode alternative validée de l’ISO 16140-2 faisant référence à l’ISO 6579-1
pour la confirmation; ou
— par des laboratoires utilisant une méthode alternative validée de l’ISO 16140-2 qui initie la confirmation à
partir de la gélose XLD et/ou de la gélose BGA et/ou de la gélose chromogène spécifiée.
La méthode de confirmation validée ne peut pas être utilisée dans les conditions suivantes:
— par des laboratoires utilisant une méthode alternative validée de l’ISO 16140-2 faisant uniquement
référence à des géloses autres que celles incluses dans la validation pour initier la confirmation (par
exemple, la gélose Hektoen et la gélose SS uniquement); ou
— par des laboratoires utilisant une méthode alternative validée de l’ISO 16140-2 faisant uniquement
référence à un mode opératoire de confirmation ne nécessitant pas d’isolement sur gélose.
0.2  Vérification et validation
L’ISO 16140-1:2016 définit les termes de validation et de vérification, de la façon suivante:
— validation: étude des caractéristiques de performance d’une méthode et démonstration objective
que les exigences en termes de performance correspondent à l’utilisation prévue et spécifiée;
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— vérification: démonstration apportant la preuve que la méthode validée lorsqu’elle est mise en
œuvre par l’utilisateur est conforme aux spécifications de la méthode déterminées lors de l’étude de
validation et qu’elle est en adéquation avec l’utilisation prévue.
NOTE 1 L’utilisateur désigne le laboratoire utilisateur.
La vérification des méthodes s’applique aux méthodes qui sont:
— des méthodes de référence, y compris des normes ISO ou CEN, qui sont validées à l’aide d’au moins
une étude interlaboratoires;
NOTE 2 Cependant, certaines méthodes de référence (y compris les normes ISO ou CEN) ne sont pas
encore (entièrement) validées. Pour la vérification de ces méthodes, les protocoles sont décrits à l’Annexe F.
— des méthodes alternatives, commerciales ou autres, lorsque la validation incluait une étude
interlaboratoires. La méthode a été validée conformément à
— l’ISO 16140-2 pour les méthodes alternatives (commerciales),
— l’ISO 16140-5 pour les méthodes non commerciales, ou
— l’ISO 16140-6 pour les méthodes alternatives (commerciales) pour la confirmation et le typage.
Dans une étude de validation, il est impossible d’analyser tous les aliments existants; la diversité et
le nombre d’échantillons utilisés dans une étude de validation sont limités. Dans la plupart des cas, la
validation repose sur cinq catégories d’aliments différentes (catégories définies dans l’ISO 16140-1:2016,
2.11, et spécifiées dans l’ISO 16140-2:2016, Annexe A). La validation est parfois complétée par des
catégories supplémentaires (autres) telles que les aliments pour animaux et animaux de compagnie,
les échantillons environnementaux (de production d’aliments ou d’aliments pour animaux) et/ou les
échantillons de production primaire.
Lorsqu’au moins cinq catégories d’aliments différentes sont validées, la méthode est considérée comme
validée pour une «vaste gamme d’aliments». De plus, même si seulement cinq catégories d’aliments
sont soumises à essai pendant l’étude de validation, la méthode est censée fonctionner pour n’importe
quel type d’échantillons d’aliments des 15 catégories d’aliments mentionnées dans l’ISO 16140-2:2016,
Annexe A. En d’autres termes, le «domaine d’application» de la validation de la méthode est une vaste
gamme d’aliments, correspondant aux 15 catégories d’aliments incluses dans l’ISO 16140-2:2016,
Annexe A. Le domaine d’application de la validation est important pour choisir les catégories, les types
et les matrices pour la vérification.
On distingue deux types de vérification:
— Le premier type est la vérification de la mise en œuvre. Elle sert à prouver que le laboratoire
utilisateur est capable de mettre en œuvre correctement la méthode. Le laboratoire utilisateur
analyse une matrice (d’aliment) qui a été utilisée lors de l’étude de validation (pour les méthodes
qualitatives) et une matrice (d’aliment) du domaine d’application de la validation (pour les méthodes
quantitatives) puis compare le résultat de la vérification avec le résultat de la validation.
— Le second type est la vérification des matrices (d’aliments). Elle sert à prouver que le laboratoire
utilisateur est capable d’analyser les matrices (d’aliments) qu’il revendique comme étant dans le
domaine d’application du laboratoire. Le laboratoire utilisateur analyse les matrices (d’aliments)
qu’il soumet couramment à essai et qui sont incluses dans le domaine d’application de la validation
qui sont couramment examinées par l’utilisateur. Étant donné que toutes les matrices (d’aliments)
ne peuvent pas être incluses dans la vérification, le laboratoire utilisateur est invité à analyser des
matrices (d’aliments) difficiles.
Le domaine d’application spécifie le (groupe de) produits – catégories, types ou matrices – pour lesquels
la méthode peut être appliquée. On distingue différents domaines d’application:
— domaine d’application de la méthode: (groupe de) produits – catégories, types ou matrices – pour
lesquels la méthode est revendiquée comme étant applicable.
— domaine d’application de la validation: (groupe de) produits – catégories, types ou matrices –
pour lesquels l’applicabilité de la méthode est revendiquée comme étant validée.
NOTE Dans la plupart des cas, la revendication de domaine d’application de la validation est plus
large que les produits inclus dans l’étude de validation elle-même. Par exemple, dans le cas de méthodes
alternatives (commerciales) validées conformément à l’ISO 16140-2:2016, si au moins cinq (≥5) catégories
d’aliments – en utilisant au moins trois types d’aliments différents par catégorie – ont été soumises à essai
lors de l’étude de validation, alors le domaine d’application de la validation est une «vaste gamme d’aliments»
(ainsi, les 15 catégories d’aliments sont toutes revendiquées comme étant dans le domaine d’application
de la validation). Lorsque moins de cinq (<5) catégories d’aliments ont été soumises à essai, le domaine
d’application de la validation se limite aux catégories d’aliments incluses dans la validation.
— domaine d’application du laboratoire: (groupe de) produits – catégories, types ou matrices –
pour lesquels la méthode est revendiquée comme étant utilisée par le laboratoire et faisant partie
du domaine d’application de la validation.
Le recoupement entre les différents domaines d’application (exemple inclus) est illustré à la Figure 3.
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Figure 3 — Recoupement entre les différents domaines d’application (exemple inclus)
Au moment de la publication du présent document (c’est-à-dire l’ISO 16140-3:2021), certaines méthodes
de référence ne sont pas encore (entièrement) validées et ne devraient donc pas faire partie du domaine
d’application du présent document. On sait que les organismes de normalisation (y compris les comités
de l’ISO et du CEN) auront besoin de temps pour valider leurs méthodes de référence. Par conséquent,
ces méthodes de référence non validées (y compris les normes ISO ou CEN) sont vérifiées dans un
laboratoire utilisateur conformément à un protocole spécifique (voir l’Annexe F). Cette situation est
considérée comme temporaire jusqu’à ce que ces méthodes soient validées par les comités de l’ISO et/
ou du CEN. Pour plus d’informations, voir la référence [13].
Dans le présent document:
— «doit» indique une exigence;
— «il convient que» indique une recommandation;
— «peut» indique une permission;
— «il est possible que» indique une possibilité ou une capacité.
Les informations marquées sous forme de «NOTE» aident à comprendre ou préciser la phrase associée.
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NORME INTERNATIONALE ISO 16140-3:2021(F)
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Validation des
méthodes —
Partie 3:
Protocole pour la vérification dans un seul laboratoire
de méthodes de référence et de méthodes alternatives
validées
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie le protocole pour la vérification de méthodes de référence et de méthodes
alternatives validées destinées à être mises en œuvre dans le laboratoire utilisateur.
Le présent document est applicable à la vérification de méthodes utilisées pour l’analyse (recherche et/
ou quantification), la confirmation et le typage de micro-organismes présents dans:
— les produits destinés à la consommation humaine;
— les produits destinés à l’alimentation animale;
— les échantillons environnementaux dans le domaine de la production et de la manutention de
produits alimentaires;
— les échantillons au stade de la production primaire.
Le présent document est notamment applicable aux bactéries et aux moisissures. Certains articles
peuvent être applicables à d’autres (micro-)organismes ou à leurs métabolites, qui doivent être
déterminés au cas par cas.
Les protocoles techniques pour la vérification de méthodes qualitatives validées et de méthodes
quantitatives validées sont décrits aux Articles 5 et 6. Le protocole technique pour la vérification de
méthodes alternatives validées de confirmation et de typage est décrit à l’Article 7. Les protocoles pour
la vérification de méthodes de référence non validées sont décrits à l’Annexe F.
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 6887 (toutes les parties), Microbiologie de la chaîne alimentaire — Préparation des échantillons, de la
suspension mère et des dilutions décimales en vue de l’examen microbiologique
ISO 7218, Microbiologie des aliments — Exigences générales et recommandations
ISO 16140-1:2016, Microbiologie de la chaîne alimentaire — Validation des méthodes — Partie 1:
Vocabulaire
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions donnés dans l’ISO 16140-1 ainsi que les
suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http:// www .electropedia .org/
3.1
méthode alternative de confirmation ou de typage
méthode de confirmation ou de typage soumise à validation
méthode d’analyse permettant de confirmer ou de typer le même analyte que celui confirmé ou typé à
l’aide de la méthode de référence correspondante
Note 1 à l'article: La méthode peut être commerciale. Le terme «alternative» se réfère à la totalité du «mode
opératoire d’analyse et du système réactionnel». Ce terme recouvre tous les éléments nécessaires à la mise en
œuvre de la méthode, qu’ils soient matériels ou autres.
[SOURCE: ISO 16140-6:2019, 3.2, modifiée — La Note 2 à l’article a été supprimée.]
3.2
biais
biais de mesure
estimation d’une erreur systématique de mesure, ou différence systématique entre la valeur assignée
quantitative et la moyenne des résultats de mesure de réplicats
[SOURCE: ISO 16140-1:2016, 2.9]
3.3
catégorie (d’aliment)
groupe de types (d’aliments) (3.18) ayant la même origine
EXEMPLE Catégorie d’aliment: lait et produits laitiers traités thermiquement. Type d’aliment: produits
laitiers pasteurisés. Matrice d’aliment: crème brûlée.
Note 1 à l'article: Les catégories (d’aliments) sont répertoriées à l’Annexe A.
[SOURCE: ISO 16140-1:2016, 2.11, modifiée — Dans le terme, «(d’aliment)» a été ajouté après
«catégorie». Dans la définition, «(d’aliments)» a remplacé «d’échantillons». L’exemple a été modifié pour
être conforme avec les termes utilisés à l’Annexe A. La Note 1 à l’article a été ajoutée.]
3.4
biais estimé
eBiais
détermination du biais (3.2) d’après le protocole d’étude décrit dans le présent document
Note 1 à l'article: Il est impossible de déterminer exactement le biais si le nombre d’échantillons soumis à essai
est faible. Par conséquent, le terme «biais estimé» («eBiais») est utilisé dans le présent document.
3.5
LOD estimée
eLOD
détermination de la LOD (niveau de détection avec une probabilité de détection de 50 %) d’après le
protocole d’étude décrit dans le présent document
Note 1 à l'article: Il est impossible de déterminer exactement la LOD si le nombre d’échantillons soumis à essai
est faible par rapport au nombre d’échantillons requis dans l’ISO 16140-2:2016. Par conséquent, le terme «LOD
estimée» («eLOD ») est utilisé dans le présent document.
2 © ISO 2021 – Tous droits réservés

Note 2 à l'article: La LOD est définie dans l’ISO 16140-1:2016, 2.35.
3.6
étude d’exclusivité
étude impliquant des souches non cibles (3.11) pures pouvant être sujettes à une réaction croisée, non
susceptibles d’être détectées ni dénombrées par la méthode alternative
[SOURCE: ISO 16140-1:2016, 2.22]
3.7
étude d’inclusivité
étude impliquant des souches cibles (3.15) pures devant être détectées ou dénombrées par la méthode
alternative
[SOURCE: ISO 16140-1:2016, 2.31]
3.8
matrice (d'aliment)
entité (3.10) spécifiée d’un aliment, entité spécifiée d’un aliment pour animaux, entité spécifiée issue de
l’environnement ou entité spécifiée issue du stade de la production primaire
EXEMPLE Catégorie d’aliment: lait et produits laitiers traités thermiquement. Type d’aliment: produits
laitiers pasteurisés. Matrice d’aliment: crème brûlée.
[SOURCE: ISO 16140-1:2016, 2.34, modifiée — Dans le terme, «(d’aliment)» a été ajouté après «matrice».
L’exemple a été modifié pour être conforme avec les termes utilisés à l’Annexe A.]
3.9
échantillon pour laboratoire
échantillon dans l’état de préparation où il est envoyé au laboratoire et destiné à être utilisé pour un
contrôle ou pour des essais
[SOURCE: ISO 6887-1:2017, 3.1]
3.10
matrice
ensemble des composants de l’échantillon
[SOURCE: ISO 16140-1:2016, 2.38, modifiée — Dans le terme, «(produit)» été supprimé.]
3.11
souche non cible
souche, définie selon le domaine d’application de la méthode de référence, raisonnablement susceptible
de ne pas être détectée; dénombrée ou confirmée par la méthode alternative
[SOURCE: ISO 16140-1:2016, 2.44, modifiée — Dans la définition, «confirmée» a été ajouté à «détectée
ou dénombrée».]
3.12
matériau de référence
matériau, suffisamment homogène et stable quant à une ou plusieurs propriétés spécifiées, qui a été
préparé pour être adapté à son utilisation prévue dans un processus de mesure
Note 1 à l'article: Les propriétés peuvent être quantitatives ou qualitatives, par exemple l’identité de substances
ou d’espèces.
Note 2 à l'article: Les utilisations prévues peuvent être l’étalonnage d’un système de mesure, l’évaluation d’une
méthode de mesure, l’assignation de valeurs à d’autres matériaux et le contrôle de la qualité.
[SOURCE: Guide ISO 30:2015, 2.1.1, modifiée — Les Notes d’origine 1 et 4 à l’article ont été omises et les
notes ont été renumérotées.]
3.13
domaine d’application du laboratoire
catégories, matrices, analytes et concentrations applicables à une méthode d’analyse qu’un laboratoire
utilisateur (3.19) revendique être capable de soumettre à essai de manière satisfaisante dans son
laboratoire
Note 1 à l'article: Une méthode peut avoir été validée pour une gamme (un domaine d’application) d’analytes,
de matrices et de concentrations plus vaste que le domaine d’application qui sera revendiqué par un laboratoire
utilisateur. Le domaine d’application du laboratoire est inférieur ou égal au domaine de validation (3.14).
3.14
domaine d’application de la validation
catégories, matrices, analytes et concentrations pour lesquels une méthode d’analyse validée peut être
utilisée de manière satisfaisante
[SOURCE: ISO 16140-1:2016, 2.70, modifiée — «catégories» a été ajouté et «matrices» a été déplacé
avant «analytes».]
3.15
souche cible
souche, définie selon le domaine d’application de la méthode de référence, susceptible d’être confirmée,
détectée ou dénombrée par la méthode alternative
[SOURCE: ISO 16140-1:2016, 2.74, modifiée — Dans la définition, «confirmée» a été ajouté à «détectée
ou dénombrée».]
3.16
prise d’essai
échantillon représentatif mesuré (volume ou masse) prélevé sur l’échantillon pour laboratoire (3.9) pour
servir à la préparation de la suspension mère
Note 1 à l'article: Il est parfois nécessaire de préparer un échantillon pour essai (3.17) à partir de l’échantillon
pour laboratoire avant de prélever la prise d’essai lors des examens microbiologiques, mais cela reste rare.
[SOURCE: ISO 6887-1:2017, 3.5, modifiée — Dans la Note 1 à l’article, «un échantillon pour essai à partir
de» a été ajouté avant «l’échantillon pour laboratoire».]
3.17
échantillon pour essai
échantillon préparé à partir de l’échantillon pour laboratoire (3.9) selon le mode opératoire spécifié dans
la méthode d’essai, et à partir duquel les prises d’essai (3.16) sont prélevées
Note 1 à l'article: Il est rare de préparer l’échantillon pour laboratoire avant de prélever la prise d’essai lors des
examens microbiologiques.
Note 2 à l'article: Pour les méthodes de confirmation et de typage, l’échantillon est une colonie isolée sur des
boîtes définies de gélose sélective ou non sélective.
[SOURCE: ISO 6887-1:2017, 3.4, modifiée — Dans la définition, «méthode d’essai» a remplacé «méthode
d’essai» et la Note 2 à l’article a été ajoutée.]
3.18
type (d’aliment)
pour une catégorie (d’aliment) (3.3) donnée, groupe de matrices (d’aliments) (3.8) traitées de manière
similaire, ayant des caractéristiques intrinsèques similaires et une écologie microbienne similaire
EXEMPLE Catégorie d’aliment: lait et produits laitiers traités thermiquement. Type d’aliment: produit laitier
pasteurisé.
[SOURCE: ISO 16140-1:2016, 2.78, modifiée — Dans le terme et la définition, «(d’aliment)» a été ajouté
après «type», «catégorie» et «matrices».]
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3.19
laboratoire utilisateur
laboratoire qui met en place une méthode alternative validée et/ou une méthode de référence validée
Note 1 à l'article: Certaines méthodes de référence (y compris les normes ISO ou CEN) ne sont pas encore
(entièrement) validées. Pour la vérification de ces méthodes, les protocoles sont décrits à l’Annexe F.
3.20
validation
étude des caractéristiques de performance d’une méthode et démonstration objective que les exigences
en termes de performance correspondent à l’utilisation prévue et spécifiée
[SOURCE: ISO 16140-1:2016, 2.81]
3.21
vérification
démonstration apportant la preuve que la méthode validée lorsqu’elle est mise en œuvre par l’utilisateur
est conforme aux spécifications de la méthode déterminées lors de l’étude de validation (3.20) et qu’elle
est en adéquation avec l’utilisation prévue
Note 1 à l'article: Certaines méthodes de référence (y compris les normes ISO ou CEN) ne sont pas encore
(entièrement) validées. Pour la vérification de ces méthodes, les protocoles sont décrits à l’Annexe F.
[SOURCE: ISO 16140-1: 2016, 2.83, modifiée — Dans la définition, «mise en œuvre» a remplacé
«appliquée» et «prévue» a été ajoutée après «utilisation». La Note 1 à l’article a été remplacée.]
4 Principes généraux de vérification des méthodes qualitatives (recherche) et
des méthodes quantitatives
4.1 Généralités
La vérification des méthodes qualitatives (recherche) et des méthodes quantitatives se déroule en
deux temps:
— vérification de la mise en œuvre;
— vérification des matrices (d’aliments).
La vérification se concentre sur les matrices (d’aliments) qui font partie du domaine d’application de la
validation et du domaine d’application du laboratoire.
Avant d’effectuer la vérification des méthodes, le laboratoire utilisateur doit se référer au(x) rapport(s)
de validation publié(s) par des organismes de normalisation et/ou certification des méthodes reconnus
comme source(s) pour le domaine d’application de la validation et pour sélectionner les matrices
(d’aliments) appropriées pour la vérification.
La vérification de la mise en œuvre a lieu avant la vérification des matrices (d’aliments). Les règles
techniques applicables à la réalisation de la vérification de la mise en œuvre et à la vérification des
matrices (d’aliments) sont données à l’Article 5 pour les méthodes qualitatives et à l’Article 6 pour les
méthodes quantitatives.
Pour la vérification de méthodes de référence non validées, le laboratoire utilisateur doit utiliser les
protocoles techniques décrits à l’Annexe F.
4.2 Vérification de la mise en œuvre
La vérification de la mise en œuvre sert à prouver que le laboratoire utilisateur est capable de mettre
en œuvre la méthode validée
...