ISO 8784-1:2014

DRAFT INTERNATIONAL STANDARD ISO/DIS 8784-1
ISO/TC 6/SC 2 Secretariat: SIS
Voting begins on Voting terminates on

2011-11-02 2012-04-02
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION    МЕЖДУНАРОДНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ    ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION

Pulp, paper and board — Microbiological examination —
Part 1:
Enumeration of bacteria and bacterial spores based on
disintegration
Pâte, papier et carton — Analyse microbienne —
Partie 1: Dénombrement des bactéries et des spores bactériennes basé sur la désagrégation
[Revision of second edition (ISO 8784-1:2005)]
ICS 07.100.99; 85.040; 85.060

To expedite distribution, this document is circulated as received from the committee
secretariat. ISO Central Secretariat work of editing and text composition will be undertaken at
publication stage.
Pour accélérer la distribution, le présent document est distribué tel qu'il est parvenu du
secrétariat du comité. Le travail de rédaction et de composition de texte sera effectué au
Secrétariat central de l'ISO au stade de publication.

THIS DOCUMENT IS A DRAFT CIRCULATED FOR COMMENT AND APPROVAL. IT IS THEREFORE SUBJECT TO CHANGE AND MAY NOT BE
REFERRED TO AS AN INTERNATIONAL STANDARD UNTIL PUBLISHED AS SUCH.
IN ADDITION TO THEIR EVALUATION AS BEING ACCEPTABLE FOR INDUSTRIAL, TECHNOLOGICAL, COMMERCIAL AND USER PURPOSES,
DRAFT INTERNATIONAL STANDARDS MAY ON OCCASION HAVE TO BE CONSIDERED IN THE LIGHT OF THEIR POTENTIAL TO BECOME
STANDARDS TO WHICH REFERENCE MAY BE MADE IN NATIONAL REGULATIONS.
RECIPIENTS OF THIS DRAFT ARE INVITED TO SUBMIT, WITH THEIR COMMENTS, NOTIFICATION OF ANY RELEVANT PATENT RIGHTS OF WHICH
THEY ARE AWARE AND TO PROVIDE SUPPORTING DOCUMENTATION.
©  International Organization for Standardization, 2011

ISO/DIS 8784-1
Copyright notice
This ISO document is a Draft International Standard and is copyright-protected by ISO. Except as permitted
under the applicable laws of the user’s country, neither this ISO draft nor any extract from it may be
reproduced, stored in a retrieval system or transmitted in any form or by any means, electronic,
photocopying, recording or otherwise, without prior written permission being secured.
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Violators may be prosecuted.
ii © ISO 2011 – All rights reserved

ISO/DIS 8784-1
Contents Page
Foreword .iv
Introduction.v
1 Scope.1
2 Normative references.1
3 Terms and definitions .1
4 Principle .1
5 Culture media and diluents .2
5.1 General .2
5.2 Water.2
5.3 Culture media for total bacteria count and spore count .2
5.4 Diluents.2
6 Apparatus and equipment .2
6.1 General .2
6.2 List of equipment.2
7 Sampling .3
8 Preparation of the test material .3
8.1 General .3
8.2 Determination of dry-matter content.4
8.3 Weighing .4
8.4 Disintegration .4
9 Determination of the total bacterial count and spore count.4
9.1 General .4
9.2 Plating for total bacterial count .4
9.3 Plating for spore count .5
9.4 Incubation .5
10 Enumeration of the colonies .5
11 Calculation and report .5
11.1 Calculation .5
11.2 Interpretation .7
11.3 Report .7
12 Test report.7
Annex A (informative) Dilution fluid.8
Annex B (informative) Precision.9
Bibliography.10

ISO/DIS 8784-1
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 8784-1 was prepared by Technical Committee ISO/TC 6, Paper, board and pulps, Subcommittee SC 2,
Test methods and quality specifications for paper and board.
This third edition cancels and replaces the second edition (ISO 8784-1:2005), which has been technically
revised. The second edition was applicable to yeast and mould as well as bacteria. In the revision the content
has been divided into two parts, in Part 1 bacteria and bacterial spores are enumerated after disintegration
and in Part 2 yeast and mould are enumerated as surface count.
ISO 8784 consists of the following parts, under the general title Pulp, paper and board — Microbiological
examination:
⎯ Part 1: Enumeration of bacteria and bacterial spores based on disintegration
1)
⎯ Part 2: Enumeration of yeast and mould on surface

1)
Part 2 is under development and not yet published.
ISO/DIS 8784-1
Introduction
This part of ISO 8784, which deals with the microbiological examination of dry market pulp, paper and
[1]
paperboard, is broadly based on ISO 4833 , although the conditions are not identical: However, it provides
specific amplification where necessary. It is intended for the estimation of colony-forming units, CFU, of
aerobic bacteria and bacterial spores.
Because of the exacting techniques required in aseptic procedures, reproducible good quality results can only
be ensured by skilled microbiological technicians.
DRAFT INTERNATIONAL STANDARD ISO/DIS 8784-1

Pulp, paper and board — Microbiological examination —
Part 1:
Enumeration of bacteria and bacterial spores based on
disintegration
1 Scope
This part of ISO 8784 specifies a method for determining the total number of colony-forming units of bacteria
and bacterial spores in dry market pulp, paper and paperboard after disintegration. The enumeration relates to
specific media.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 186:2002, Paper and board — Sampling to determine average quality
ISO 7213:1981, Pulps — Sampling for testing
ISO 638:2008, Paper, board and pulps — Determination of dry matter content — Oven-drying method
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
bacteria
microscopic, single-celled organisms that possess a prokaryotic type of cell structure, which reproduce by
fission and are able to grow under the test conditions specified in this part of ISO 8784
3.2
bacterial spores
highly resistant, dormant structures, e.g. endospores from certain genera of bacteria
3.3
total bacterial count
number of colony-forming units (CFU) of bacteria and bacterial spores formed after incubation in a standard
culture medium, under the test conditions specified in this part of ISO 8784
3.4
spore count
number of colony-forming units (CFU) of bacterial spores formed after incubation in a standard culture
medium, under the test conditions specified in this part of ISO 8784
4 Principle
This poured plate method involves enumeration of colonies in a standard culture medium. A fibre suspension,
prepared from paper, paperboard or pulp samples, is plated in agar. For enumeration of bacterial spores, the
fibre suspension is heated for 10 min at 80 °C prior to plating. The plates are incubated at 32 °C for 48 h. The
total numbers of bacteria or bacterial spores are enumerated by counting the colonies formed in the agar.
Results are expressed as the number of CFU per gram of sample.
ISO/DIS 8784-1
5 Culture media and diluents
5.1 General
All substrates and diluents shall be appropriately sterilized. When preparing the culture medium, make sure
that the ingredients are completely dissolved by mixing while heating prior to dispensing into suitable
[2] [3]
containers for sterilization. See ISO/TS 11133-1 and ISO/TS 11133-2 for quality assurance and guidelines
on preparation and production of culture media.
5.2 Water
[2]
When water is mentioned in a formula, use distilled water or purified water, see ISO/TS 11133-1 .
5.3 Culture media for total bacteria count and spore count
Culture medium shall be prepared as follows, or from commercially available dehydrated culture media
according to the manufacturer's instructions. Ready-to-use medium may be used when its composition is
comparable to that given in this part of ISO 8784. To test the performance of the medium, see
[3]
ISO/TS 11133-2 .
Plate count agar (PCA) composition per litre:
Tryptone 5,0 g
Yeast Extract 2,5 g
Dextrose 1,0 g
Agar 15,0 g
Water 1000 ml
Final pH 7,0 ± 0,2
If PCA is not available, Tryptone glucose extract (TGE) agar may be used (see A.3). The use of TGE as an
alternative culture medium is acceptable if it gives comparable results as the standard culture medium. The
culture medium used shall be stated in the test report (see 12).
5.4 Diluents
Ringer's solution (see A.1) is preferred, although other isotonic solutions may be used. Ringer's tabl
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 8784-1
Troisième édition
2014-12-01
Pâtes, papiers et cartons — Analyse
microbienne —
Partie 1:
Dénombrement des bactéries et
des spores bactériennes basé sur la
désintégration
Pulp, paper and board — Microbiological examination —
Part 1: Enumeration of bacteria and bacterial spores based on
disintegration
Numéro de référence
©
ISO 2014
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2014
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sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie, l’affichage sur
l’internet ou sur un Intranet, sans autorisation écrite préalable. Les demandes d’autorisation peuvent être adressées à l’ISO à
l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
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Web www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2014 – Tous droits réservés

Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Milieux de culture et diluants . 2
5.1 Généralités . 2
5.2 Eau . 2
5.3 Milieux de culture relatifs au nombre total de bactéries et au nombre de spores . 2
5.4 Diluants . 2
6 Appareillage et matériel . 3
6.1 Généralités . 3
6.2 Liste de matériel . 3
7 Échantillonnage . 3
8 Préparation du matériau pour essai . 4
8.1 Généralités . 4
8.2 Détermination de la teneur en matière sèche . 4
8.3 Pesée . 4
8.4 Désintégration . 5
9 Détermination du nombre total de bactéries et du nombre de spores bactériennes .5
9.1 Généralités . 5
9.2 Ensemencement relatif au nombre total de bactéries . 5
9.3 Ensemencement relatif au nombre de spores . 6
9.4 Incubation . 6
10 Dénombrement des colonies . 6
11 Calcul et expression des résultats . 7
11.1 Calcul . 7
11.2 Interprétation . 8
11.3 Rapport . 8
12 Rapport d’essai . 8
Annexe A (informative) Liquide de dilution . 9
Annexe B (informative) Fidélité.10
Bibliographie .14
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne
la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www.
iso.org/directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant les
références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de l’élaboration
du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de brevets reçues par
l’ISO (voir www.iso.org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données pour
information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un engagement.
Pour une explication de la signification des termes et expressions spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de
la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion de l’ISO aux principes de l’OMC concernant
les obstacles techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: Avant-propos — Informations
supplémentaires.
Le comité chargé de l’élaboration du présent document est l’ISO/TC 6, Papiers, cartons et pâtes,
sous-comité SC 2, Méthodes d’essais et spécifications de qualité des papiers et cartons.
Cette troisième édition annule et remplace la deuxième édition (ISO 8784-1:2005), qui a fait l’objet d’une
révision technique.
La deuxième édition s’appliquait aux levures et aux moisissures ainsi qu’aux bactéries. Les principales
modifications apportées par rapport à l’édition précédente sont les suivantes:
— cette troisième édition n’est applicable qu’aux bactéries et aux spores bactériennes, elle ne s’applique
plus aux levures ni aux moisissures;
— la température d’incubation est passée de (37 °C ± 1 °C) à (32 °C ± 2 °C) (9.4);
— deux déterminations sont réalisées en parallèle (Articles 8 et 9);
— le résultat peut être exprimé en fonction de la «masse reçue» en plus d’être exprimé en fonction de
la masse sèche (8.2, 11.1 et Article 12).
L’ISO 8784 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Pâtes, papiers et cartons —
Analyse microbiologique:
— Partie 1: Dénombrement des bactéries et spores bactériennes basé sur la désintégration
iv © ISO 2014 – Tous droits réservés

Introduction
La présente partie de l’ISO 8784, qui traite de l’analyse microbiologique de la pâte commerciale sèche,
[1]
du papier et du carton, est dans ses grandes lignes fondée sur l’ISO 4833 , malgré des conditions
différentes. Toutefois, elle fournit des précisions particulières lorsque cela s’avère nécessaire. Elle est
destinée à l’estimation du nombre d’unités formant colonie (UFC) de bactéries aérobies et de spores
bactériennes.
Compte tenu de la précision des techniques exigées dans les modes opératoires aseptiques, des résultats
reproductibles de bonne qualité peuvent être garantis uniquement par un personnel qualifié en
microbiologie.
NORME INTERNATIONALE ISO 8784-1:2014(F)
Pâtes, papiers et cartons — Analyse microbienne —
Partie 1:
Dénombrement des bactéries et des spores bactériennes
basé sur la désintégration
1 Domaine d’application
La présente partie de l’ISO 8784 spécifie une méthode de détermination du nombre total d’unités
formant colonie de bactéries et de spores bactériennes, dans la pâte commerciale sèche, le papier et le
carton, après désintégration. Le dénombrement se rapporte à un milieu spécifique.
2 Références normatives
Les documents suivants, en tout ou partie, sont référencés de façon normative dans le présent document
et sont indispensables pour son application. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 186:2002, Papier et carton — Échantillonnage pour déterminer la qualité moyenne.
ISO 7213:1981, Pâtes — Échantillonnage pour essais.
ISO 638:2008, Papiers, cartons et pates — Détermination de la teneur en matières sèches — Méthode par
séchage à l’étuve.
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
3.1
bactérie
organisme microscopique unicellulaire ayant une structure cellulaire de type procaryote, qui se reproduit
par division et peut croître dans les conditions d’essai spécifiées dans la présente partie de l’ISO 8784
3.2
spore bactérienne
structure hautement résistante en sommeil
EXEMPLE Endospore provenant d’un genre particulier de bactérie.
3.3
nombre total de bactéries
nombre d’unités formant colonie (UFC) de bactéries et de spores bactériennes, formées après incubation
dans un milieu de culture type, dans les conditions d’essai spécifiées dans la présente partie de l’ISO 8784
3.4
nombre de spores
nombre d’unités formant colonie (UFC) de spores bactériennes, formées après incubation dans un milieu
de culture type, dans les conditions d’essai spécifiées dans la présente partie de l’ISO 8784
4 Principe
La présente méthode d’ensemencement en profondeur implique un dénombrement des colonies dans
un milieu de culture type. Une suspension fibreuse préparée à partir d’échantillons de papier, de carton
ou de pâte est ensemencée dans une gélose. Deux déterminations sont réalisées en parallèle. Pour le
dénombrement de spores bactériennes, la suspension fibreuse est chauffée av
...

PROJET DE NORME INTERNATIONALE ISO/DIS 8784-1
ISO/TC 6/SC 2 Secrétariat: SIS
Début de vote Vote clos le
2011-11-02 2012-04-02
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION    МЕЖДУНАРОДНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ    ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION

Pâte, papier et carton — Analyse microbienne —
Partie 1:
Dénombrement des bactéries et des spores bactériennes basé
sur la désagrégation
Pulp, paper and board — Microbiological examination —
Part 3: Enumeration of bacteria and bacterial spores based on disintegration
[Révision de la deuxième édition (ISO 8784-1:2005)]
ICS 07.100.99; 85.040; 85.060

Pour accélérer la distribution, le présent document est distribué tel qu'il est parvenu du

secrétariat du comité. Le travail de rédaction et de composition de texte sera effectué au
Secrétariat central de l'ISO au stade de publication.
To expedite distribution, this document is circulated as received from the committee
secretariat. ISO Central Secretariat work of editing and text composition will be undertaken at
publication stage.
CE DOCUMENT EST UN PROJET DIFFUSÉ POUR OBSERVATIONS ET APPROBATION. IL EST DONC SUSCEPTIBLE DE MODIFICATION ET NE
PEUT ETRE CITE COMME NORME INTERNATIONALE AVANT SA PUBLICATION EN TANT QUE TELLE.
OUTRE LE FAIT D'ETRE EXAMINES POUR ETABLIR S'ILS SONT ACCEPTABLES A DES FINS INDUSTRIELLES, TECHNOLOGIQUES ET
COMMERCIALES, AINSI QUE DU POINT DE VUE DES UTILISATEURS, LES PROJETS DE NORMES INTERNATIONALES DOIVENT PARFOIS ETRE
CONSIDERES DU POINT DE VUE DE LEUR POSSIBILITE DE DEVENIR DES NORMES POUVANT SERVIR DE REFERENCE DANS LA
REGLEMENTATION NATIONALE.
LES DESTINATAIRES DU PRÉSENT PROJET SONT INVITÉS À PRÉSENTER, AVEC LEURS OBSERVATIONS, NOTIFICATION DES DROITS DE PRO-
PRIÉTÉ DONT ILS AURAIENT ÉVENTUELLEMENT CONNAISSANCE ET À FOURNIR UNE DOCUMENTATION EXPLICATIVE.
©  Organisation Internationale de Normalisation, 2011

ISO/DIS 8784-1
Notice de droit d'auteur
Ce document de l'ISO est un projet de Norme internationale qui est protégé par les droits d'auteur de l'ISO.
Sauf autorisé par les lois en matière de droits d'auteur du pays utilisateur, aucune partie de ce projet ISO ne
peut être reproduite, enregistrée dans un système d'extraction ou transmise sous quelque forme que ce soit
et par aucun procédé électronique ou mécanique, y compris la photocopie, les enregistrements ou autres,
sans autorisation écrite préalable.
Les demandes d'autorisation de reproduction doivent être envoyées à l'ISO à l'adresse ci-après ou au
comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.
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Toute reproduction est soumise au paiement de droits ou à un contrat de licence.
Les contrevenants pourront être poursuivis.

ii © ISO 2011 – Tous droits réservés

ISO/DIS 8784-1
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction.v
1 Domaine d'application .1
2 Références normatives.1
3 Termes et définitions .1
4 Principe.2
5 Milieux de culture et diluants .2
5.1 Généralités .2
5.2 Eau.2
5.3 Milieux de culture relatifs au nombre total de bactéries et relatifs au nombre total de
spores.2
5.4 Diluants.2
6 Appareillage et matériel.3
6.1 Généralités .3
6.2 Liste de matériel .3
7 Echantillonnage.3
8 Préparation du matériau pour essai.4
8.1 Généralités .4
8.2 Détermination de la teneur en matière sèche.4
8.3 Pesée .4
8.4 Désagrégation.4
9 Détermination du nombre total de bactéries et du nombre de spores.5
9.1 Généralités .5
9.2 Ensemencement relatif au nombre total de bactéries.5
9.3 Ensemencement relatif au nombre de spores .5
9.4 Incubation .6
10 Dénombrement des colonies .6
11 Calcul et expression des résultats .6
11.1 Calcul.6
11.2 Interprétation.8
11.3 Rapport.8
12 Rapport d’essai.8
Annexe A (informative) Liquide de dilution.9
A.1 Solution de Ringer.9
A.2 Surfactant non ionique .9
A.3 Extrait de tryptone glucose .9
Annexe B (informative) Fidélité .10
B.1 Généralités .10
B.2 Recommandations .10
B.2.1 Echantillons de référence certifiés.10
[1]
B.2.2 Données de fidélité selon l’ISO 4833 .10
B.2.3 Données publiées dans l’ISO 4833.10
Bibliographie.12

ISO/DIS 8784-1
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 8784-1 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 6, Papiers, cartons et pâtes, sous-comité SC 2,
Méthodes d'essais et spécifications de qualité des papiers et cartons.
Cette troisième édition annule et remplace la deuxième édition (ISO 8784-1:2005), qui a fait l’objet d’une
révision technique. La deuxième édition s’appliquait aux levures et aux moisissures ainsi qu’aux bactéries.
Dans le texte révisé, le contenu a été divisé en deux parties, dans la Partie 1, les bactéries et les spores
bactériennes sont dénombrées après désagrégation, et dans la Partie 2, les levures et les moisissures sont
dénombrées en surface.
L'ISO 8784 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Pâtes, papiers et cartons —
Analyse microbiologique:
⎯ Partie 1 : Dénombrement des bactéries et spores bactériennes, basé sur la désagrégation
1)
⎯ Partie 2 : Dénombrement des levures et des moisissures en surface

1) La Partie 2 est en cours d’élaboration et n’est pas encore publiée.
iv © ISO 2011 – Tous droits réservés

ISO/DIS 8784-1
Introduction
La présente partie de l’ISO 8784, qui traite de l’analyse microbiologique de la pâte commerciale sèche, du
[1]
papier et du carton, est dans ses grandes lignes fondée sur l’ISO 4833 , malgré des conditions différentes.
Toutefois, elle fournit des précisions particulières lorsque cela s’avère nécessaire. Elle est destinée à
l’estimation de colonies formant unité, CFU, des bactéries aérobies et des spores bactériennes.
Compte tenu de la précision des techniques exigées dans les modes opératoires aseptiques, des résultats
reproductibles de bonne qualité peuvent être garantis uniquement par un personnel qualifié en microbiologie.
PROJET DE NORME INTERNATIONALE ISO/DIS 8784-1

Pâte, papier et carton — Analyse microbienne —
Partie 1:
Dénombrement des bactéries et des spores bactériennes basé
sur la désagrégation
1 Domaine d'application
La présente partie de l’ISO 8784 spécifie une méthode de détermination du nombre total de colonies de
bactéries et de spores bactériennes formant unité, dans la pâte commerciale, le papier et le carton, après
désagrégation. Le dénombrement se rapporte à un milieu spécifique.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 186:2002, Papier et carton — Échantillonnage pour déterminer la qualité moyenne.
ISO 7213:1981, Pâtes — Échantillonnage pour essais.
ISO 638:2008, Papiers, cartons et pâtes — Détermination de la teneur en matières sèches — Méthode par
séchage à l'étuve.
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
bactérie
organisme microscopique unicellulaire ayant une structure cellulaire de type procaryote, qui se reproduit par
division et pouvant croître dans les conditions d’essai spécifiées dans la présente partie de l’ISO 8784
3.2
spore bactérienne
structure hautement résistante en sommeil, par exemple endospore provenant d’un genre particulier de
bactérie
3.3
nombre total de bactéries
nombre de colonies de bactéries et de spores bactériennes formant unité (CFU), formées après incubation
dans un milieu de culture type, dans des conditions d’essai spécifiées dans la présente partie de l’ISO 8784
3.4
nombre de spores
nombre de colonies formant unité (CFU), de spores bactériennes formées après incubation dans un milieu de
culture type, dans les conditions d’essai spécifiées dans la présente partie de l’ISO 8784
© IS
...

МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 8784-1
Третье издание
2014-12-01
Бумага, картон и целлюлоза.
Микробиологическое исследование.
Часть 1.
Подсчет бактерий и бактериальных
спор на основе дезинтеграции
Pulp, paper and board – Microbiological examination –
Part 1:Enumeration of bacteria and bacterial spores basеd on
disintegration
Ссылочный номер
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ISO 2014
ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ

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какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия ISO, которое должно быть получено после запроса о разрешении, направленного по
адресу, приведенному ниже, или в комитет-член ISO в стране запрашивающей стороны.
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Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO 2014 – Все права сохраняются

Содержание Страница
Предисловие .iv
Введение .v
1 Область применения .1
2 Нормативные ссылки .1
3 Термины и определения .1
4 Принцип .2
5 Питательные среды и разбавители .2
5.1 Общие положения .2
5.2 Вода .2
5.3 Питательные среды для подсчета общего числа бактерий и бактериальных спор .2
5.4 Разбавители .3
6 Аппаратура и оборудование .3
6.1 Общие положения .3
6.2 Перечень оборудования .3
7 Отбор проб .4
8 Приготовление материала для испытания .5
8.1 Общие положения .5
8.2 Определение содержания сухого вещества .5
8.3 Взвешивание .5
8.4 Дезинтеграция .5
9 Определение общего числа бактерий и спор .6
9.1 Общие положения .6
9.2 Посев в чашки для подсчета общего количества бактерий .6
9.3 Посев для подсчета спор .7
9.4 Инкубация .7
10 Определение количества колоний .7
11 Вычисление и регистрация .8
11.1 Вычисление .8
11.2 Интерпретация .9
11.3 Отчет .9
12 Протокол испытания .9
Приложение А (информативное) Жидкость для разбавления . 11
Приложение В (информативное) Прецизионность . 12
Библиография . 16

Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией национальных
организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных стандартов
обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член, заинтересованный в
деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть представленным в этом
комитете. Международные правительственные и неправительственные организации, имеющие связи с
ISO, также принимают участие в работах. Что касается стандартизации в области электротехники, ISO
работает в тесном сотрудничестве с Международной электротехнической комиссией (IEC).
Процедуры, используемые для разработки данного документа, и процедуры, предусмотренные для его
дальнейшего ведения, описаны в Директивах ISO/IEC Directives, Part 1. В частности, следует отметить
различные критерии утверждения, требуемые для различных типов документов ISO. Проект данного
документа был разработан в соответствии с редакционными правилами Директив ISO/IEC Directives,
Part 2. www.iso.org/directives .
Необходимо обратить внимание на возможность того, что ряд элементов данного документа могут
быть предметом патентных прав. Международная организация ISO не должна нести ответственность
за идентификацию таких прав, частично или полностью. Сведения о патентных правах,
идентифицированных при разработке документа, будут указаны во Введении и/или в перечне
полученных ISO объявлений о патентном праве. www.iso.org/patents .
Любое торговое название, использованное в данном документе, является информацией,
предоставляемой для удобства пользователей, а не свидетельством в пользу того или иного товара
или той или иной компании.
Для пояснения значений конкретных терминов и выражений ISO, относящихся к оценке соответствия, а
также информация о соблюдении Международной организацией ISO принципов ВТО по техническим
барьерам в торговле (TБT), см. следующий унифицированный локатор ресурса (URL): Foreword -
Supplementary information.
Технический комитет, несущий ответственность за данный документ, ISO/TC 6, Бумага, картон и
целлюлоза, Подкомитет SC 2, Методы испытаний и требования к качеству бумаги и картона.
Настоящее третье издание отменяет и заменяет второе издание (ISO 8784-1:2005) после технического
пересмотра.
Второе издание было применимо, наряду с бактериями, к дрожжевым и плесневым грибкам. В
отношении предыдущего издания были внесены следующие основные изменения:
— настоящее третье издание применимо только к бактериям и бактериальным спорам и больше
неприменимо к к дрожжевым и плесневым грибкам;
— температура инкубации изменилась с (37 С  1 С) до (32 С  2 С) (9.4);
— необходимо проводить 2 параллельных опыта (Раздел 8 и Раздел 9);
— результат можно вносить в протокол в форме «как получено» в дополнение к сообщению на
основе сухой массы (8.2, 11.1 и Раздел 12).
ISO 8784 состоит из следующих частей под общим названием Целлюлоза, бумага и картон.
Микробиологическое исследование:
— Часть 1. Подсчет бактерий и бактериальных спор на основе дезинтеграции
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Введение
Настоящая часть ISO 8784, которая распространяется на микробиологическое исследование сухой
[1]
товарной целлюлозы, бумаги и картона, в общем, основана на ISO 4883 , хотя условия могут
оказаться неидентичными, В то же время, там где необходимо, в ней дана конкретная амплификация.
Данная часть предназначена для оценки колониеобразующих единиц (КОЕ=CFU) аэробных бактерий и
бактериальных спор.
Поскольку необходимо точно соблюдать правила асептики, воспроизводимые результаты хорошего
качества могут быть получены только квалифицированными микробиологами.

МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ
Бумага картон и целлюлоза. Микробиологическое
исследование.
Часть 1.
Подсчет бактерий и бактериальных спор на основе
дезинтеграции
1 Область применения
В настоящей части международного стандарта ISO 8784 описан метод определения общего числа
колониеобразующих единиц бактерий и бактериальных спор в сухой товарной целлюлозе, бумаге и
картоне после дезинтеграции. Принцип определения связан с конкретными средами.
2 Нормативные ссылки
Следующие нормативные документы являются обязательными для применения с настоящим
международным стандартом. Для жестких ссылок применяются только указанное по тексту издание.
Для плавающих ссылок необходимо использовать самое последнее издание нормативного ссылочного
документа (включая любые изменения).
ISO 186, Бумага и картон. Отбор проб для определения среднего качества
ISO 7213:1981, Целлюлоза. Отбор проб для испытаний
ISO 638:2008, Бумага, картон и целлюлоза. Определение содержания сухого вещества. Метод
сушки в печи
3 Термины и определения
Исходя из назначения данного документа, применимы следующие термины и определения:
3.1
бактерии
bacteria
микроскопические, одноклеточные организмы, обладающие прокариотическим типом структуры клетки,
которые размножаются делением и способны расти в условиях испытания, установленных в данной
части ISO 8784
3.2
бактериальные споры
bacterial spores
дремлющие структуры высокой сопротивляемости
ПРИМЕЧАНИЕ Эндоспоры определенных видов бактерий.
3.3
общее микробное(бактериальное) число
total bacterial count
количество колониеобразующих единиц (КОЕ) бактерий и бактериальных спор, образованных после
инкубирования в стандартной питательной среде в условиях испытания, установленных в данной
части ISO 8784
3.4
число спор
spore count
количество колониеобразующих единиц (КОЕ) бактериальных спор, образованных после
инкубирования в стандартной питательной среде в условиях испытания, установленных в данной
части ISO 8784
4 Принцип
Чашечный метод включает подсчет колоний на стандартной питательной среде. Волокнистая
суспензия, приготовленная из пробы бумаги, картона или целлюлозы разливают по чашкам на агар.
Выполняют два параллельных опыта. Для подсчета бактериальных спор волокнистую суспензию
перед разливом по чашкам нагревают в течение 10 мин при температуре 80 °C. Чашки инкубируют при
температуре 32°C в течение 48 ч. Определяют общее число бактерий или бактериальных спор,
подсчитав число колоний, образованных на агаре.
Среднее значение от двух параллельных опытов подсчитывают и результат выражают как число КОЕ
на грамм пробы.
5 Питательные среды и разбавители
5.1 Общие положения
Все субстраты и разбавители должны быть соответствующим образом стерилизованы. При
приготовлении питательной среды следует убедиться, что ингредиенты полностью растворены
перемешиванием при нагревании, прежде чем разливать в подходящие емкости для стерилизации. См.
[2]
ISO 11133 по обеспечению качества и руководства по приготовлению и производству питательных
сред.
5.2 Вода
[2]
Если в составе упомянута вода, используют дистиллированную или очищенную воду, см. ISO 11133 .
5.3 Питательные среды для подсчета общего числа бактерий и бактериальных спор
Питательные среды должны быть приготовлены из имеющихся в продаже обезвоженных питательных
сред (концентратов) в соответствии с инструкциями изготовителя. Готовую к использованию среду
можно использовать, если ее состав сопоставим с составом, приведенным в данной части ISO 8784.
[2]
Чтобы определить характеристики среды, см. ISO 11133 .
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Разливают по чашкам агар для бактериологического подсчета (PСA). Химический состав на литр:
Триптон 5,0 г
Дрожжевой экстракт 2,5 г
Декстроза 1,0 г
Агар 15,0 г
Вода 1000 мл
рН готовой среды
7,0  0,2
Если РСА нет в наличии, можно использовать агар TGE (триптон-глюкозный экстракт) (см. А.3).
Применение TGE в качестве альтернативной питательной среды допускается, если это дает
сопоставимые результаты, такие как стандартная питательная среда. Использованную питательную
среду необходимо указать в протоколе испытания (см. Раздел 12).
5.4 Разбавители
Раствор Рингера (Ringer’s) (см. А.1) является предпочтительным, но можно использовать другие
изотонические растворы. В продаже имеется реактив Рингера в таблетках.
Чтобы облегчить выделение клеток из волокон, рекомендуется добавить 20 мкл Tween 20 (см. А.2) на
литр раствора Рингера перед стерилизацией в автоклаве.
Использованный разбавитель, и Tween 80, если использовался, необходимо указать в протоколе
испытания (см. Раздел 12)
6 Аппаратура и оборудование
6.1 Общие положения
Все лабораторное оборудование и части, соприкасающиеся непосредственно с пробой и
разбавителем или питательной средой должны быть стерилизованы.
[1]
ПРИМЕЧАНИЕ Рекомендации по стандартному микробиологическому оборуд
...