ISO 6888-1:1999/Amd 2:2018

ISO/TC 34/SC 9
Deleted: 03-02
Date:  2018-06
Deleted: FDAM
ISO 6888-1:1999/Amd 2:2018(F)
ISO/TC 34/SC 9/GT
Secrétariat:  AFNOR
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour le dénombrement des
staphylocoques à coagulase positive (Staphylococcus aureus et autres espèces) —
Partie 1: Technique utilisant le milieu gélosé de Baird-Parker
AMENDEMENT 2: Ajout d’un essai alternatif de confirmation utilisant la méthode de
piqûre sur RPFA
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the enumeration
of coagulase-positive staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) — Part 1:
Technique using Baird-Parker agar medium
AMENDMENT 2: Inclusion of an alternative confirmation test using RPFA stab method
Deleted: i © ISO 2018 – Tous
droits réservés

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1:1999/Amd 2:2018(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a
le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir
www.iso.org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet
de droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour
responsable de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails
concernant les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés
lors de l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des
déclarations de brevets reçues par l'ISO (voir www.iso.org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de
l'adhésion de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les
obstacles techniques au commerce (OTC), voir www.iso.org/avant‐propos. Deleted: le lien suivant:
Le présent document a été élaboré par le Comité technique CEN/TC 275, Analyse des produits
alimentaires — Méthodes horizontales, du Comité européen de normalisation (CEN) en collaboration
avec le Comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, Sous‐comité SC 9, Microbiologie,
conformément à l'accord de coopération technique entre l'ISO et le CEN (Accord de Vienne).
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits
organismes se trouve à l’adresse www.iso.org/fr/members.html.
Une liste de toutes les parties de la série ISO 6888 peut être consultée sur le site de l’ISO.
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réservés iii

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1:1999/Amd 2:2018(F)
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour le
dénombrement des staphylocoques à coagulase positive
(Staphylococcus aureus et autres espèces) — Partie 1:
Technique utilisant le milieu gélosé de Baird-Parker

AMENDEMENT 2: Ajout d'un essai alternatif de confirmation
utilisant la méthode de piqûre sur RPFA

Article 2
Ajouter la référence normative suivante:
ISO 11133, Microbiologie des aliments, des aliments pour animaux et de l’eau — Préparation, production,
stockage et essais de performance des milieux de culture
Article 5
Ajouter le texte suivant.
Deleted: :
5.6  Milieu gélosé au plasma de lapin et au fibrinogène (RPFA)
5.6.1  Généralités
Des milieux de culture commercialisés et conformes aux spécifications du présent document, peuvent
être utilisés. Cependant, en raison de la variabilité établie des lots de fabrication de supplément, il est
recommandé de soumettre à essai, avant utilisation, chaque lot de solution de fibrinogène bovin et de
plasma de lapin, en effectuant des contrôles positifs et des contrôles négatifs.
5.6.2  Milieu de base
Préparer le milieu de base comme indiqué en 5.3.1, à l'exception de la répartition du milieu de base, à
raison de 90 ml par flacon ou fiole.
5.6.3  Solutions
5.6.3.1  Solution de tellurite de potassium
Préparer la solution de tellurite de potassium comme indiqué en 5.3.2.1.
5.6.3.2  Solution de fibrinogène bovin
5.6.3.2.1  Composition
a
Fibrinogène bovin 5 g à 7 g
Eau stérile 100 ml
a
Selon la pureté du fibrinogène bovin.

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1:1999/Amd 2:2018(F)
5.6.3.2.2  Préparation
Dans des conditions aseptiques, dissoudre le fibrinogène bovin dans l'eau juste avant utilisation.
5.6.3.3  Solution de plasma de lapin et d'inhibiteur de trypsine
5.6.3.3.1  Composition
Plasma de lapin avec EDTA pour coagulase 30 ml
(plasma coagulase EDTA)
Inhibiteur de trypsine 30 mg
5.6.3.3.2  Préparation
Dans des conditions aseptiques, dissoudre les composants dans l'eau juste avant utilisation.
5.6.4  Milieu complet
5.6.4.1  Composition
Milieu de base (5.6.2) 90 ml
Solution de tellurite de potassium (5.6.3.1) 0,25 ml
Solution de fibrinogène bovin (5.6.3.2) 7,5 ml
Solution de plasma de lapin et d'inhibiteur de trypsine (5.6.3.3) 2,5 ml
5.6.4.2  Préparation
Faire fondre le milieu de base, puis le laisser refroidir à 47 °C à 50 °C dans un bain d'eau (6.4), car ce
milieu se solidifie lorsque la température est inférieure à cette valeur.
Dans des conditions aseptiques, ajouter les trois solutions préalablement chauffées à 48 °C ± 1 °C dans
un bain d'eau. Après chaque ajout, mélanger soigneusement par rotation, afin de réduire le plus
possible la formation de mousse.
Utiliser le milieu complet immédiatement après sa préparation, afin d'éviter toute précipitation du
plasma.
AVERTISSEMENT — En cas d’utilisation d’une solution commercialisée de fibri
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 6888-1
Première édition
1999-02-18
AMENDEMENT 2
2018-07
Microbiologie des aliments —
Méthode horizontale pour le
dénombrement des staphylocoques
à coagulase positive (Staphylococcus
aureus et autres espèces) —
Partie 1:
Technique utilisant le milieu gélosé de
Baird-Parker
AMENDEMENT 2: Ajout d'un essai
alternatif de confirmation utilisant la
méthode de piqûre sur RPFA
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal
method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci
(Staphylococcus aureus and other species) —
Part 1: Technique using Baird-Parker agar medium
AMENDMENT 2: Inclusion of an alternative confirmation test using
RPFA stab method
Numéro de référence
ISO 6888-1:1999/Amd.2:2018(F)
©
ISO 2018

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ISO 6888-1:1999/Amd.2:2018(F)

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Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en oeuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
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Publié en Suisse
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Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir www .iso .org/avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le Comité technique CEN/TC 275, Analyse des produits alimentaires
— Méthodes horizontales, du Comité européen de normalisation (CEN) en collaboration avec le Comité
technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, Sous-comité SC 9, Microbiologie, conformément à l'accord de
coopération technique entre l'ISO et le CEN (Accord de Vienne).
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.
Une liste de toutes les parties de la série ISO 6888 peut être consultée sur le site de l’ISO.
© ISO 2018 – Tous droits réservés iii

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ISO 6888-1:1999/Amd.2:2018(F)
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour
le dénombrement des staphylocoques à coagulase positive
(Staphylococcus aureus et autres espèces) —
Partie 1:
Technique utilisant le milieu gélosé de Baird-Parker
AMENDEMENT 2: Ajout d'un essai alternatif de confirmation
utilisant la méthode de piqûre sur RPFA

Article 2
Ajouter la référence normative suivante:
ISO 11133, Microbiologie des aliments, des aliments pour animaux et de l’eau — Préparation, production,
stockage et essais de performance des milieux de culture

Article 5
Ajouter le texte suivant.
5.6   Milieu gélosé au plasma de lapin et au fibrinogène (RPFA)
5.6.1  Généralités
Des milieux de culture commercialisés et conformes aux spécifications du présent document, peuvent
être utilisés. Cependant, en raison de la variabilité établie des lots de fabrication de supplément, il est
recommandé de soumettre à essai, avant utilisation, chaque lot de solution de fibrinogène bovin et de
plasma de lapin, en effectuant des contrôles positifs et des contrôles négatifs.
5.6.2  Milieu de base
Préparer le milieu de base comme indiqué en 5.3.1, à l'exception de la répartition du milieu de base, à
raison de 90 ml par flacon ou fiole.
5.6.3  Solutions
5.6.3.1  Solution de tellurite de potassium
Préparer la solution de tellurite de potassium comme indiqué en 5.3.2.1.
© ISO 2018 – Tous droits réservés 1

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5.6.3.2   Solution de fibrinogène bovin
5.6.3.2.1  Composition
a
Fibrinogène bovin 5 g à 7 g
Eau stérile 100 ml
a
  Selon la pureté du fibrinogène bovin.
5.6.3.2.2  Préparation
Dans des conditions aseptiques, dissoudre le fibrinogène bovin dans l'eau juste avant utilisation.
5.6.3.3  Solution de plasma de lapin et d'inhibiteur de trypsine
5.6.3.3.1  Composition
Plasma de lapin avec EDTA pour coagulase 30 ml
(plasma coagulase EDTA)
Inhibiteur de trypsine 30 mg
5.6.3.3.2  Préparation
Dans des conditions aseptiques, dissoudre les composants dans l'eau juste avant utilisation.
5.6.4  Milieu complet
5.6.4.1  Composition
Milieu de base (5.6.2) 90 ml
Solution de tellurite de potassium (5.6.3.1) 0,25 ml
Solution de fibrinogène bovin (5.6.3.2) 7,5 ml
Solution de plasma de lapin et d'inhibiteur de trypsine (5.6.3.3) 2,5 ml
5.6.4.2  Préparation
Faire fondre le milieu de base, puis le laisser refroidir à 47 °C à 50 °C dans un bain d'eau (6.4), car ce
milieu se solidifie lorsque la température est inférieure à cette valeur.
Dans des conditions aseptiques, ajouter les trois solutions préalablement chauffées à 48 °C ± 1 °C dans
un bain d'eau. Après ch
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