ISO 4832:2006

NORME ISO
INTERNATIONALE 4832
Troisième édition
2006-02-15
Microbiologie des aliments — Méthode
horizontale pour le dénombrement des
coliformes — Méthode par comptage des
colonies
Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for
the enumeration of coliforms — Colony-count technique

Numéro de référence
©
ISO 2006
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Publié en Suisse
©
ii ISO 2006 – Tous droits réservés

Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec la
Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de droits
de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir
identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 4832 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 9,
Microbiologie.
Cette troisième édition de l’ISO4832 annule et remplace l’ISO4832:1991 et l’ISO5541-1:1986. Les
modifications sont les suivantes:
— la méthode alternative d’incubation à 35 °C a été supprimée (voir 4.2);
— un test de confirmation sur bouillon lactosé bilié au vert brillant a été introduit (voir 5.4 et 9.4).
Étant donné la nature des modifications à l’édition précédente de la présente Norme internationale, il est
considéré que cette révision n’a pas de conséquences sur la validation des méthodes alternatives basées sur
l’ISO 4832:1991.
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ISO 2006 – Tous droits réservés iii

Introduction
En raison de la grande variété des produits alimentaires et des produits pour animaux, la méthode horizontale
peut ne pas être totalement appropriée pour certains produits. Dans ce cas, des méthodes différentes
spécifiques à ces produits peuvent être utilisées si cela est absolument nécessaire pour des raisons techniques
justifiées. Néanmoins, tous les efforts doivent être faits pour appliquer cette méthode horizontale autant que
faire se peut.
Lorsque la présente Norme internationale sera réexaminée, il sera tenu compte de tous les renseignements
disponibles à ce moment-là, à savoir dans quelle mesure cette méthode horizontale a été suivie et les raisons
pour lesquelles il aura été nécessaire d'y déroger dans le cas de produits particuliers.
L'harmonisation des méthodes d'essai ne peut pas être immédiate et, pour certains groupes de produits, des
Normes internationales et/ou des normes nationales qui ne sont pas en conformité avec cette méthode
horizontale peuvent exister. Il est souhaitable que, lorsqu'elles viendront en révision, elles soient alignées sur la
présente Norme internationale pour que, finalement, les seules divergences restantes soient celles qui sont
nécessaires pour des raisons techniques bien établies.
La technique décrite dans la présente Norme internationale est plus précise que celle décrite dans
[1]
l'ISO 4831 , mais elle ne permet pas d’effectuer un examen microbiologique sur une prise d’essai aussi
importante. C’est donc la méthode à utiliser de préférence lorsqu’un grand nombre de coliformes est présent.
D’autre part, la définition des «coliformes» adoptée dans les deux documents étant différente, on ne dénombre
pas nécessairement les mêmes microorganismes. Pour chaque produit particulier, le choix de la technique sera
précisé dans la Norme internationale concernant ce produit.
Pour les besoins d'une méthode d'essai efficace, la définition des «coliformes» donnée dans l'Article 3 et
servant de base à la technique n'est pas nécessairement identique aux définitions correspondantes données
dans d'autres textes publiés. La méthode décrite dans la présente Norme internationale ne détectera, en
moyenne, qu'environ 90 % des souches de micro-organismes désignés dans d'autres publications, sous le nom
de «coliformes (présumés)» (par exemple certaines souches de Citrobacter, d’Enterobacter et de Klebsiella).
(Voir Référence [2]).
©
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NORME INTERNATIONALE ISO 4832:2006(F)
Microbiologie des aliments — Méthode horizontale pour le
dénombrement des coliformes — Méthode par comptage des
colonies
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale donne des directives générales pour le dénombrement des coliformes. La
présente Norme internationale s'applique à
— des produits destinés à la consommation humaine et à l'alimentation des animaux, et à
— des échantillons environnementaux au voisinage de la production et de la manipulation des aliments,
◦ ◦
par comptage des colonies après incubation à 30 C ou 37 C en milieu solide.
NOTE Cette température faisant l'objet d'un accord entre les parties concernées. Dans le cas du lait et des produits laitiers,
◦
la température d'incubation est 30 C.
Cette méthode est recommendée lorsque le nombre attendu est supposé être supérieur à 100 par millilitre ou
par gramme d'échantillon testé.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 6887 (toutes les parties), Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension
mère et des dilutions décimales en vue de l'examen microbiologique
1)
ISO 7218:— , Microbiologie des aliments— Recommandations et règles générales pour les examens
microbiologiques
ISO 8261, Lait et produits laitiers — Lignes directrices générales pour la préparation des échantillons pour
essai, de la suspension mère et des dilutions décimales en vue de l'examen microbiologique
ISO/TS 11133-1, Microbiologie des aliments — Guide pour la préparation et la production des milieux de
culture — Partie 1: Guide général pour l'assurance de la qualité pour la préparation des milieux de culture en
laboratoire
ISO/TS 11133-2:2003, Microbiologie des aliments — Guide pour la préparation et la production des milieux de
culture — Partie 2: Guide général pour les essais de performance des milieux de culture
1) À publier.
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3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
coliformes
◦ ◦
bactéries qui, à la température spécifiée (c'est-à-dire 30 C ou 37 C, selon accord), forment des colonies
caractéristiques en gélose lactosée biliée au cristal violet et au rouge neutre et qui, lors de l'essai de
confirmation, fermentent le lactose avec production de gaz, lorsque l'essai est effectué dans les conditions
spécifiées dans la présente Norme internationale
4Principe
4.1 Préparation de deux boîtes de Petri, en utilisant un milieu de culture sélectif solide et une quantité
spécifiée de l'échantillon pour essai si le produit initial est liquide ou une quantité spécifiée de suspension mère
dans le cas d'autres produits.
Préparation d'autres boîtes de Petri, dans les mêmes conditions, en utilisant des dilutions décimales de
l'échantillon
...