CEN/TS 16817-1:2015
(Main)Ambient air - Monitoring the effects of genetically modified organisms (GMO) - Pollen monitoring - Part 1: Technical pollen sampling using pollen mass filter (PMF) and Sigma-2-sampler
Ambient air - Monitoring the effects of genetically modified organisms (GMO) - Pollen monitoring - Part 1: Technical pollen sampling using pollen mass filter (PMF) and Sigma-2-sampler
This Technical Specification describes a procedure for the use of the passive samplers Sigma-2 and PMF to sample airborne pollen. Both are designed to sample coarse aerosol particles. Collected samples are used to analyze pollen input with regard to pollen type and amount, and input of transgenic pollen. The Sigma-2 passive sampler here provides a standardized sampling method for direct microscopic pollen analysis and quantifying the aerial pollen input at the site. The PMF yields sufficient amounts of pollen to additionally carry out molecular-biological diagnostics for detection of GMO.
Essential background information on performing GMO monitoring is given in Guideline VDI 4330 Part 1 [4], which is based on an integrated assessment of temporal and spatial variation of GMO cultivation (sources of GMO), the exposure in the environment and biological/ecological effects. Ideally, the pollen sampling using technical samplers for GMO monitoring should be undertaken in combination with the biological collection of pollen by bees (FprCEN/TS 16817-2).
The application of technical passive samplers and the use of honey bee colonies as active biological collectors complement each other in a manifold way when monitoring the exposure to GMO pollen. Technical samplers provide results regarding the pollen input at the sampling site in a representative way, whereas with biological sampling by honey bee colonies, pollen from flowering plants in the area is collected according to the bees' collection activity. Thus, this method represents GMO exposure to roaming insects. By combining the two sampling methods these two main principles of exposure are represented. Furthermore, a broad range of pollen species is covered.
The sample design depends on the intended measuring objective. Some examples are given in 6.2.
Außenluft - Monitoring der Wirkungen von gentechnisch veränderten Organismen (GVO) - Pollenmonitoring - Teil 1: Technische Pollensammlung mit Pollenmassenfilter (PMF) und Sigma-2-Sammler
Die vorliegende Technische Spezifikation beschreibt ein Verfahren zur Verwendung der Passivsammler Sigma-2 und PMF zur Sammlung von luftgetragenen Pollen. Beide Sammler sind auf die Sammlung grober Aerosolpartikel ausgelegt. Gesammelte Proben werden zur Analyse des Polleneintrags hinsichtlich Pollenart, Pollenmenge und dem Eintrag von transgenen Pollen verwendet. Der Sigma-2-Sammler dient hierbei der standardisierten Probenahme zur direkten mikroskopischen Pollenanalyse und der quantitativen Bestimmung des in der Luft vor Ort vorhandenen Polleneintrags. Durch den PMF können ausreichende Pollenmengen für zusätzliche molekularbiologische Diagnostiken zum GVO-Nachweis erhalten werden.
Wesentliche Grundlagen zur Durchführung des GVO-Monitorings werden in Richtlinie VDI 4330 Blatt 1 [4] vermittelt, basierend auf einer integrierten Beurteilung von zeitlichen und räumlichen Variationen des GVO-Anbaus (GVO-Quellen), der Umweltexposition sowie biologischen/ökologischen Wirkungen. Im Idealfall sollte die Pollensammlung mit technischen Sammlern für das GVO-Monitoring in Kombination mit der biologischen Pollensammlung durch Bienen vorgenommen werden (CEN/TS 16817-2).
Der Einsatz von technischen Passivsammlern und die Verwendung von Honigbienenvölkern als aktive biologische Sammler ergänzen sich beim Monitoring der Exposition zu GVO-Pollen in vielfältiger Weise. Während die technischen Sammler repräsentative Ergebnisse zum Polleneintrag am Standort liefern, werden bei der biologischen Sammlung durch die Honigbienen die Pollen der in einem Gebiet vorhandenen blühenden Pflanzen entsprechend der Sammelaktivität gesammelt. Hierbei wird die GVO-Exposition gegenüber umherstreifenden Insekten dargestellt. Die Kombination beider Sammelverfahren repräsentiert die beiden hauptsächlichen Grundsätze der Exposition. Darüber hinaus kann ein breiteres Spektrum an Pollenspezies erfasst werden.
Der Messplan richtet sich nach der vorgesehenen Messaufgabe. Siehe 6.2 für Beispiele.
Air ambiant - Surveillance des effets d'organismes génétiquement modifiés (OGM) - Surveillance du pollen - Partie 1 : Échantillonnage technique du pollen à l'aide d'un filtre de masse à pollen (FMP) et d'un échantillonneur Sigma-2
La présente Spécification technique décrit un mode opératoire relatif à l’utilisation des échantillonneurs passifs Sigma 2 et FMP pour échantillonner le pollen en suspension dans l’air. Tous deux sont conçus pour échantillonner les grosses particules d’aérosols. Les échantillons prélevés sont utilisés pour analyser l'apport de pollen en termes de type et de quantité de pollen, ainsi que l’apport de pollen transgénique. L’échantillonneur passif Sigma-2 offre ici une méthode d’échantillonnage standardisée pour l’analyse microscopique directe du pollen et la quantification de la dispersion aérienne du pollen sur le site. Le FMP permet d’obtenir des quantités suffisantes de pollen pour effectuer en plus des diagnostics par biologie moléculaire pour la détection des OGM.
Des informations générales essentielles sur la surveillance des OGM sont données dans la ligne directrice VDI 4330 Part 1 [4], qui repose sur une évaluation intégrée de la variation spatio-temporelle de la culture d’OGM (sources d’OGM), de l’exposition dans l’environnement et des effets biologiques/écologiques. Dans l’idéal, il convient d’effectuer l’échantillonnage de pollen à l’aide d’échantillonneurs techniques pour la surveillance des OGM en association avec la récolte biologique de pollen par les abeilles (FprCEN/TS 168172).
L’application d’échantillonneurs techniques passifs et l’utilisation de colonies d’abeilles mellifiques comme échantillonneurs biologiques actifs se complètent à plusieurs niveaux lors de la surveillance de l’exposition au pollen génétiquement modifié. Les échantillonneurs techniques fournissent des résultats représentatifs concernant l’apport de pollen sur le site d’échantillonnage, alors qu’avec les échantillonneurs biologiques tels que les colonies d’abeilles mellifiques, le pollen des plantes à fleurs de la zone est récolté en fonction de l’activité de récolte des abeilles. Cette méthode représente ainsi l’exposition des OGM aux insectes itinérants. En combinant les deux méthodes d’échantillonnage, ces deux principes majeurs d’exposition sont représentés. En outre, une vaste gamme d’espèces de pollen est couverte.
Le plan d’échantillonnage dépend de l’objectif de mesurage prévu. Des exemples sont donnés en 6.2.
Zunanji zrak - Monitoring učinkov gensko spremenjenih organizmov (GSO) - Monitoring peloda - 1. del: Tehnično vzorčenje peloda z uporabo masnega filtra peloda in vzorčevalnika Sigma-2
Ta standard opisuje postopek za združeno uporabo vzorčevalnika Sigma-2 za določanje vrste usedanja in masnega filtra peloda (PMF) za vzorčenje peloda. Na podlagi zbranih vzorcev se izvede analiza vnosa peloda glede na vrsto in količino ter odstotek transgenega peloda. Vzorčevalnik Sigma-2 v tem primeru omogoča standardizirano metodo vzorčenja za namen neposredne mikroskopske analize peloda. Z uporabo filtra PMF se zagotovijo zadostne količine peloda za izvedbo molekularno-biološke diagnostike. Za podlago je na voljo dokument NWI VDI 4330, 3. del.
General Information
Standards Content (Sample)
SLOVENSKI STANDARD
01-februar-2016
=XQDQML]UDN0RQLWRULQJXþLQNRYJHQVNRVSUHPHQMHQLKRUJDQL]PRY *62
0RQLWRULQJSHORGDGHO 7HKQLþQRY]RUþHQMHSHORGD]XSRUDERPDVQHJDILOWUD
SHORGDLQY]RUþHYDOQLND6LJPD
Ambient air - Monitoring the effects of genetically modified organisms (GMO) - Pollen
monitoring - Part 1: Technical pollen sampling using pollen mass filter (PMF) and Sigma-
2-sampler
Außenluft - Monitoring der Wirkungen gentechnisch veränderter Organismen (GVO) -
Pollenmonitoring - Teil 1: Technische Pollensammlung mit Pollenmassenfilter (PMF) und
Sigma-2-Sammler
Air ambiant - Surveillance des effets d'organismes génétiquement modifiés (OGM) -
Surveillance du pollen - Partie 1 : Échantillonnage technique du pollen à l'aide d'un filtre
de masse à pollen (FMP) et d'un échantillonneur Sigma-2
Ta slovenski standard je istoveten z: CEN/TS 16817-1:2015
ICS:
13.040.20 Kakovost okoljskega zraka Ambient atmospheres
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.
CEN/TS 16817-1
TECHNICAL SPECIFICATION
SPÉCIFICATION TECHNIQUE
October 2015
TECHNISCHE SPEZIFIKATION
ICS 07.080; 13.020.99
English Version
Ambient air - Monitoring the effects of genetically
modified organisms (GMO) - Pollen monitoring - Part 1:
Technical pollen sampling using pollen mass filter (PMF)
and Sigma-2-sampler
Air ambiant - Surveillance des effets d'organismes Außenluft - Monitoring der Wirkungen von
génétiquement modifiés (OGM) - Surveillance du gentechnisch veränderten Organismen (GVO) -
pollen - Partie 1 : Échantillonnage technique du pollen Pollenmonitoring - Teil 1: Technische Pollensammlung
à l'aide d'un filtre de masse à pollen (PMF) et d'un mit Pollenmassenfilter (PMF) und Sigma-2-Sammler
échantillonneur Sigma-2
This Technical Specification (CEN/TS) was approved by CEN on 16 May 2015 for provisional application.
The period of validity of this CEN/TS is limited initially to three years. After two years the members of CEN will be requested to
submit their comments, particularly on the question whether the CEN/TS can be converted into a European Standard.
CEN members are required to announce the existence of this CEN/TS in the same way as for an EN and to make the CEN/TS
available promptly at national level in an appropriate form. It is permissible to keep conflicting national standards in force (in
parallel to the CEN/TS) until the final decision about the possible conversion of the CEN/TS into an EN is reached.
CEN members are the national standards bodies of Austria, Belgium, Bulgaria, Croatia, Cyprus, Czech Republic, Denmark, Estonia,
Finland, Former Yugoslav Republic of Macedonia, France, Germany, Greece, Hungary, Iceland, Ireland, Italy, Latvia, Lithuania,
Luxembourg, Malta, Netherlands, Norway, Poland, Portugal, Romania, Slovakia, Slovenia, Spain, Sweden, Switzerland, Turkey and
United Kingdom.
EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION
COMITÉ EUROPÉEN DE NORMALISATION
EUROPÄISCHES KOMITEE FÜR NORMUNG
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© 2015 CEN All rights of exploitation in any form and by any means reserved Ref. No. CEN/TS 16817-1:2015 E
worldwide for CEN national Members.
Contents Page
European foreword . 5
Introduction . 6
1 Scope . 7
2 Normative references . 7
3 Terms and definitions . 7
4 Basic principle of the procedure . 9
5 Sampling . 9
5.1 Instruments and materials . 9
5.1.1 General . 9
5.1.2 Sigma-2 passive sampler . 10
5.1.3 Pollen mass filter PMF . 10
5.2 Technical implementation . 12
6 Sampling procedure . 13
6.1 General . 13
6.2 Sampling design . 13
6.2.1 General . 13
6.2.2 Exposure assessment of pollen input in the vicinity of fields with genetically
modified crop (gm-fields) related to a specific GMO and region . 14
6.2.3 Exposure assessment of pollen input for validating and/or calibrating dispersal
models . 15
6.2.4 General monitoring of pollen exposure at larger scales . 15
6.2.5 Assessment of standardized and acceptor specific pollen deposition . 15
6.3 Site conditions . 15
6.4 Installing the equipment . 16
6.5 Exposure time . 17
6.6 Sampling at site . 17
6.6.1 Sigma-2 passive sampler . 17
6.6.2 PMF . 17
6.7 Sample preparation . 18
6.7.1 Preparation of slides for microscopy . 18
6.7.2 Preparation of PMF samples . 19
7 Microscopic pollen analysis . 20
7.1 General . 20
7.2 Sigma-2 passive sampler . 20
7.2.1 Microscopic imaging methods . 20
7.2.2 Qualitative analysis of the pollen diversity . 21
7.2.3 Quantitative analysis of the pollen . 21
7.3 PMF . 21
7.3.1 Microscopic analysis . 21
7.3.2 Qualitative analysis of the pollen (diversity) . 21
7.3.3 Quantitative microscopic analysis of pollen . 21
8 Molecular-biological analyses of GMO . 23
9 Determination of the target parameters for GMO monitoring and representation of
the results . 24
9.1 General . 24
9.2 Sigma-2 passive sampler . 24
9.2.1 Determination of pollen deposition per sampling period . 24
9.2.2 Determination of the daily mean pollen deposition rate per sampling period . 25
9.2.3 Determination of yearly pollen deposition . 25
9.2.4 References to pollen dispersal models . 25
9.3 PMF . 25
9.3.1 Pollen count per sample N . 25
i,PMF
9.3.2 Relative frequency of pollen species i . 26
9.3.3 Determination of pollen flux per sampling period . 26
9.3.4 Determination of the daily mean pollen flux rate per sampling period . 26
9.3.5 Determination of the yearly pollen flux . 27
9.3.6 Assessment of results from molecular-biological analyses . 27
9.3.7 References to pollen dispersal models . 28
10 Performance characteristics of the methods. 28
10.1 General . 28
10.2 Validation . 28
10.3 Distribution of measured values . 29
10.4 Methodical approach and determination of basic parameters. 29
10.5 Sigma-2 passive sampler . 31
10.5.1 Sensitivity, detection limit and reproducibility . 31
10.5.2 Detection confidence level and required numbers of cases . 33
10.6 PMF . 35
10.6.1 Sensitivity, detection limit and reproducibility . 35
10.6.2 Detection confidence level and required numbers of cases . 38
10.7 Parallel measurements. 40
10.8 Comparative measurements using a standard volumetric pollen trap (Hirst type) . 42
10.9 Pollen diversity . 43
11 Quality assurance and quality control . 44
11.1 General monitoring strategy and terms of reference of pollen monitoring with
technical samplers . 44
11.2 Site protocol .
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.