SIST ISO 16191:2013

SLOVENSKI STANDARD
01-december-2013
.DNRYRVWYRGH'RORþHYDQMHXþLQNRYVWUXSHQRVWLVHGLPHQWDQDUDVW0\ULRSK\OOXP
DTXDWLFXP
Water quality - Determination of the toxic effect of sediment on the growth behaviour of
Myriophyllum aquaticum
Qualité de l'eau - Détermination de l'effet toxique des sédiments sur la croissance de
Myriophyllum aquaticum
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO 16191:2013
ICS:
13.060.70 Preiskava bioloških lastnosti Examination of biological
vode properties of water
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 16191
First edition
2013-05-01
Water quality — Determination of the
toxic effect of sediment on the growth
behaviour of Myriophyllum aquaticum
Qualité de l’eau — Détermination de l’effet toxique des sédiments sur
la croissance de Myriophyllum aquaticum
Reference number
©
ISO 2013
© ISO 2013
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized otherwise in any form
or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on the internet or an intranet, without prior
written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below or ISO’s member body in the country of
the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2013 – All rights reserved

Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 3
5 Interferences . 3
6 Reagents . 3
7 Apparatus . 5
8 Test with reference substance . 6
9 Test organism . 6
10 Procedure. 6
10.1 Pre-culturing of Myriophyllum aquaticum for the contact test. 6
10.2 Preparation of the control sample . 6
10.3 Sampling, storage, and preparation of the test samples . 7
10.4 Test procedure . 7
10.5 Exposure conditions . 7
10.6 Measurements . 8
11 Evaluation . 9
11.1 Growth rate r . 9
11.2 Means per test and control vessel (r , r ) . 9
V,T V,C
11.3 Means per test and control sample (r , r ) . 9
S,T S,C
11.4 Inhibition I . 9
11.5 Estimation of E C values . 9
r x
11.6 Expression of results .10
12 Validity criteria .11
13 Test report .11
Annex A (informative) Figures .12
Annex B (normative) Preparation of nutrient solution (Steinberg medium, following ISO 20079).
Annex C (informative) Suppliers .16
Annex D (normative) Preparation of spiked artificial sediments .18
Annex E (informative) Performance data .20
Bibliography .21
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2, www.iso.org/directives.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received, www.iso.org/patents.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
The committee responsible for this document is ISO/TC 147, Water quality, Subcommittee SC 5,
Biological methods.
iv © ISO 2013 – All rights reserved

Introduction
The contact test with Myriophyllum aquaticum described in this International Standard allows the
measurement of responses of the plant to dissolved and particle-bound substances present in sediment
samples within 10 d (References [3][4][5][6][7][8]).
The test plant, Myriophyllum aquaticum (Vellosco) Verdcourt (parrot feather), is a dicotyledonous
macrophyte. It is a native of the Amazon River in South America, but it has naturalized worldwide,
especially in warmer climates. It has been introduced worldwide for use in indoor and outdoor aquaria.
For its use as test organism, its capability for emersed growth (no additional liquid as supernatant is
needed), its strong regeneration potential, and its vegetative growth are harnessed in the contact test.
Furthermore, Myriophyllum aquaticum grows without generating side shoots during the test period,
which facilitates handling in the laboratory. However, it should be ensured that no live plant material is
lost from the laboratory.
Myriophyllum aquaticum can be affected by phytotoxic substances present in sediments (e.g. dredged
material). The subsequent inhibition of growth is calculated from the parameter (fresh mass) by a
number of defined calculation methods.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 16191:2013(E)
Water quality — Determination of the toxic effect of sediment
on the growth behaviour of Myriophyllum aquaticum
WARNING — Persons using this International Standard should be familiar with normal laboratory
practice. This International Standard does not purport to address all of the safety problems, if
any, associated with its use. It is the responsibility of the user to establish appropriate safety and
health practices and to ensure compliance with any national regulatory conditions. It shall be
ensured that no plant material can elude the laboratory.
IMPORTANT — It is absolutely essential that tests conducted according to this International
Standard be carried out by suitably trained staff.
1 Scope
This International Standard specifies a method for determining the toxicity of environmental samples
on the growth of Myriophyllum aquaticum. The method described is applicable to natural fresh water
sediment and artificial sediment.
2 Normative references
The following documents, in whole or in part, are normatively referenced in this document and are
indispensable for its application. For dated references, only the edition cited applies. For undated
references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 5667-15, Water quality — Sampling — Part 15: Guidance on the preservation and handling of sludge
and sediment samples
ISO 5667-16, Water quality — Sampling — Part 16: Guidance on biotesting of samples
ISO 10523, Water quality — Determination of pH
ISO 11465, Soil quality — Determination of dry matter and water content on a mass basis — Gravimetric method
ISO 20079, Water quality — Determination of the toxic effect of water constituents and waste water on
duckweed (Lemna minor) — Duckweed growth inhibition test
OECD 218, OECD Guidelines for the testing of chemicals — Sediment-water Chironomid toxicity test using
spiked sediment
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
artificial sediment
defined artificial sediment
[SOURCE: ISO 10872:2010, definition 3.3, modified]
Note 1 to entry: See 6.9.
3.2
chlorosis
loss of pigments (yellowing of plant tissue)
[SOURCE: ISO 20079:2005, definition 3.3, modified]
3.3
control sample
artificial sediment pre-treated according to the need of this test that serves as negative control to which
the effect in the respective test material is compared
[SOURCE: ISO 10872:2010, definition 3.6, modified]
3.4
effective concentration
E C
r x
concentration of a substance in a test sample (EC ) at which an effect of x % is measured, if compared
x
to the control
[SOURCE: ISO 20079:2005, definition 3.9, modified]
Note 1 to entry: To unambiguously denote an EC val
...

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 16191
First edition
2013-05-01
Water quality — Determination of the
toxic effect of sediment on the growth
behaviour of Myriophyllum aquaticum
Qualité de l’eau — Détermination de l’effet toxique des sédiments sur
la croissance de Myriophyllum aquaticum
Reference number
©
ISO 2013
© ISO 2013
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized otherwise in any form
or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on the internet or an intranet, without prior
written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below or ISO’s member body in the country of
the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2013 – All rights reserved

Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 3
5 Interferences . 3
6 Reagents . 3
7 Apparatus . 5
8 Test with reference substance . 6
9 Test organism . 6
10 Procedure. 6
10.1 Pre-culturing of Myriophyllum aquaticum for the contact test. 6
10.2 Preparation of the control sample . 6
10.3 Sampling, storage, and preparation of the test samples . 7
10.4 Test procedure . 7
10.5 Exposure conditions . 7
10.6 Measurements . 8
11 Evaluation . 9
11.1 Growth rate r . 9
11.2 Means per test and control vessel (r , r ) . 9
V,T V,C
11.3 Means per test and control sample (r , r ) . 9
S,T S,C
11.4 Inhibition I . 9
11.5 Estimation of E C values . 9
r x
11.6 Expression of results .10
12 Validity criteria .11
13 Test report .11
Annex A (informative) Figures .12
Annex B (normative) Preparation of nutrient solution (Steinberg medium, following ISO 20079).
Annex C (informative) Suppliers .16
Annex D (normative) Preparation of spiked artificial sediments .18
Annex E (informative) Performance data .20
Bibliography .21
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2, www.iso.org/directives.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received, www.iso.org/patents.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
The committee responsible for this document is ISO/TC 147, Water quality, Subcommittee SC 5,
Biological methods.
iv © ISO 2013 – All rights reserved

Introduction
The contact test with Myriophyllum aquaticum described in this International Standard allows the
measurement of responses of the plant to dissolved and particle-bound substances present in sediment
samples within 10 d (References [3][4][5][6][7][8]).
The test plant, Myriophyllum aquaticum (Vellosco) Verdcourt (parrot feather), is a dicotyledonous
macrophyte. It is a native of the Amazon River in South America, but it has naturalized worldwide,
especially in warmer climates. It has been introduced worldwide for use in indoor and outdoor aquaria.
For its use as test organism, its capability for emersed growth (no additional liquid as supernatant is
needed), its strong regeneration potential, and its vegetative growth are harnessed in the contact test.
Furthermore, Myriophyllum aquaticum grows without generating side shoots during the test period,
which facilitates handling in the laboratory. However, it should be ensured that no live plant material is
lost from the laboratory.
Myriophyllum aquaticum can be affected by phytotoxic substances present in sediments (e.g. dredged
material). The subsequent inhibition of growth is calculated from the parameter (fresh mass) by a
number of defined calculation methods.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 16191:2013(E)
Water quality — Determination of the toxic effect of sediment
on the growth behaviour of Myriophyllum aquaticum
WARNING — Persons using this International Standard should be familiar with normal laboratory
practice. This International Standard does not purport to address all of the safety problems, if
any, associated with its use. It is the responsibility of the user to establish appropriate safety and
health practices and to ensure compliance with any national regulatory conditions. It shall be
ensured that no plant material can elude the laboratory.
IMPORTANT — It is absolutely essential that tests conducted according to this International
Standard be carried out by suitably trained staff.
1 Scope
This International Standard specifies a method for determining the toxicity of environmental samples
on the growth of Myriophyllum aquaticum. The method described is applicable to natural fresh water
sediment and artificial sediment.
2 Normative references
The following documents, in whole or in part, are normatively referenced in this document and are
indispensable for its application. For dated references, only the edition cited applies. For undated
references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 5667-15, Water quality — Sampling — Part 15: Guidance on the preservation and handling of sludge
and sediment samples
ISO 5667-16, Water quality — Sampling — Part 16: Guidance on biotesting of samples
ISO 10523, Water quality — Determination of pH
ISO 11465, Soil quality — Determination of dry matter and water content on a mass basis — Gravimetric method
ISO 20079, Water quality — Determination of the toxic effect of water constituents and waste water on
duckweed (Lemna minor) — Duckweed growth inhibition test
OECD 218, OECD Guidelines for the testing of chemicals — Sediment-water Chironomid toxicity test using
spiked sediment
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
artificial sediment
defined artificial sediment
[SOURCE: ISO 10872:2010, definition 3.3, modified]
Note 1 to entry: See 6.9.
3.2
chlorosis
loss of pigments (yellowing of plant tissue)
[SOURCE: ISO 20079:2005, definition 3.3, modified]
3.3
control sample
artificial sediment pre-treated according to the need of this test that serves as negative control to which
the effect in the respective test material is compared
[SOURCE: ISO 10872:2010, definition 3.6, modified]
3.4
effective concentration
E C
r x
concentration of a substance in a test sample (EC ) at which an effect of x % is measured, if compared
x
to the control
[SOURCE: ISO 20079:2005, definition 3.9, modified]
Note 1 to entry: To unambiguously denote an EC value deriving from growth rate, it is proposed to use the
symbol “E C ”.
r x
3.5
emersed growth
morphological habitus of aquatic macrophytes, growing above the water surface
3.6
head-whorl
apical part of a Myriophyllum plant
Note 1 to entry: See Figure A.1.
3.7
necrosis
localized dead plant tissue (i.e. brown or white)
[SOURCE: ISO 20079:2005, definition 3.16, modified]
3.8
nutrient solution
solution of nutrients and micronutrients in water which are essential for the growth of Myriophyllum
[SOURCE: ISO 20079:2005, definition 3.17, modified]
3.9
pre-culture
culture of Myriophyllum aquaticum used for acclimatization of test plants to the test conditions and for
the growing of the plants to be used as whorls at test start
[SOURCE: ISO 20079:2005, definition 3.19, modified]
Note 1 to entry: See Figure A.2.
3.10
replicate
one of a selected number of test vessels (containing sample material from one sample and test organisms)
Note 1 to entry: Each vessel is tested.
Note 2 to entry: The replicates mentioned in this
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 16191
Première édition
2013-05-01
Qualité de l’eau — Détermination de
l’effet toxique des sédiments sur la
croissance de Myriophyllum aquaticum
Water quality — Determination of the toxic effect of sediment on the
growth behaviour of Myriophyllum aquaticum
Numéro de référence
©
ISO 2013
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2013
Droits de reproduction réservés. Sauf indication contraire, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée
sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie, l’affichage sur
l’internet ou sur un Intranet, sans autorisation écrite préalable. Les demandes d’autorisation peuvent être adressées à l’ISO à
l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2013 – Tous droits réservés

Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 3
5 Interférences . 3
6 Réactifs . 3
7 Appareillage . 5
8 Essai avec la substance de référence . 6
9 Organisme d’essai . 6
10 Mode opératoire. 6
10.1 Préculture de Myriophyllum aquaticum pour l’essai contact . 6
10.2 Préparation de l’échantillon témoin . 6
10.3 Prélèvement, conservation et préparation des échantillons pour essai . 7
10.4 Mode opératoire d’essai . 7
10.5 Conditions d’exposition . 7
10.6 Mesurages . 8
11 Évaluation . 9
11.1 Taux de croissance r . 9
11.2 Moyennes par récipient d’essai et récipient témoin (r , r ) . 9
V,T V,C
11.3 Moyennes par échantillon pour essai et récipient témoin (r , r ). 9
S,T S,C
11.4 Inhibition I . 9
11.5 Estimation des valeurs de CE(r)x . 9
11.6 Expression des résultats .11
12 Critères de validité .11
13 Rapport d’essai .11
Annexe A (informative) Figures .13
Annexe B (normative) Préparation d’une solution nutritive(milieu de Steinberg, selon
l’ISO 20079) .15
Annexe C (informative) Fournisseurs .17
Annexe D (normative) Préparation de sédiments artificiels dopés .19
Annexe E (informative) Données de performances .21
Bibliographie .23
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne
la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/CEI, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/CEI, Partie 2 (voir www.
iso.org/directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant les
références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de l’élaboration
du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou sur la liste ISO des déclarations de brevets reçues
(voir www.iso.org/brevets).
Les éventuelles appellations commerciales utilisées dans le présent document sont données pour
information à l’intention des utilisateurs et ne constituent pas une approbation ou une recommandation.
Le comité chargé de l’élaboration du présent document est l’ISO/TC 147, Qualité de l’eau, sous-comité
SC 5, Méthodes biologiques.
iv © ISO 2013 – Tous droits réservés

Introduction
L’essai contact avec Myriophyllum aquaticum, décrit dans la présente Norme internationale, permet de
mesurer les réponses de la plante à des substances dissoutes et liées à des particules présentes dans des
échantillons de sédiments pendant une durée de 10 jours (Références [3],[4],[5],[6][7],[8]).
La plante d’essai, Myriophyllum aquaticum (Vellosco) Verdcourt (plume de perroquet) est un macrophyte
de la classe des dicotylédones. Elle est originaire du fleuve Amazone en Amérique du Sud, mais s’est
acclimatée dans le monde entier, en particulier dans les climats chauds. Elle a été introduite dans le
monde entier afin d’être utilisée dans les aquariums intérieurs et extérieurs. En ce qui concerne son
utilisation en tant qu’organisme d’essai, sa capacité de croissance émergée (aucun liquide supplémentaire
comme surnageant n’est requis), son fort potentiel de régénération et sa croissance végétative sont
exploités dans l’essai de contact. Par ailleurs, Myriophyllum aquaticum croît sans générer de pousses
latérales pendant la période d’essai, ce qui facilite la manipulation en laboratoire. Il convient néanmoins
de s’assurer qu’aucun matériel végétal vivant n’est perdu par le laboratoire.
Myriophyllum aquaticum peut être affectée par des substances phytotoxiques présentes dans les
sédiments et les matériaux de dragage. L’inhibition de la croissance qui en découle est calculée à partir
du paramètre (masse fraîche) par un certain nombre de méthodes de calcul définies.
NORME INTERNATIONALE ISO 16191:2013(F)
Qualité de l’eau — Détermination de l’effet toxique des
sédiments sur la croissance de Myriophyllum aquaticum
AVERTISSEMENT — Il convient que l’utilisateur de la présente Norme internationale connaisse
bien les pratiques courantes de laboratoire. La présente Norme internationale n’a pas pour but
de traiter tous les problèmes de sécurité qui sont, le cas échéant, liés à son utilisation. Il incombe
à l’utilisateur d’établir des pratiques appropriées en matière d’hygiène et de sécurité et de
s’assurer de la conformité à la réglementation nationale en vigueur. Il est nécessaire de s’assurer
qu’aucun matériel végétal ne peut sortir du laboratoire.
IMPORTANT — Il est absolument essentiel que les essais réalisés conformément à la présente
Norme internationale soient effectués par du personnel ayant suivi une formation appropriée.
1 Domaine d’application
La présente Norme internationale spécifie une méthode permettant de déterminer la toxicité
d’échantillons environnementaux sur la croissance de Myriophyllum aquaticum. La méthode décrite
s’applique aux sédiments d’eau douce naturels et aux sédiments artificiels.
2 Références normatives
Les documents suivants, en tout ou partie, sont référencés de manière normative dans le présent
document et sont indispensables pour son application. Pour les références datées, seule l’édition citée
s’applique. Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y
compris les éventuels amendements).
ISO 5667-15, Qualité de l’eau — Échantillonnage — Partie 15: Lignes directrices pour la conservation et le
traitement des échantillons de boues et de sédiments
ISO 5667-16, Qualité de l’eau — Échantillonnage — Partie 16: Lignes directrices pour les essais biologiques
des échantillons
ISO 10523, Qualité de l’eau — Détermination du pH
ISO 11465, Qualité du sol — Détermination de la teneur pondérale en matière sèche et en eau — Méthode
gravimétrique
ISO 20079, Qualité de l’eau — Détermination de l’effet toxique des constituants de l’eau et des eaux résiduaires
vis-à-vis des lentilles d’eau (Lemna minor) — Essai d’inhibition de la croissance des lentilles d’eau
OCDE 218, Lignes directrices de l’OCDE pour les essais de produits chimiques — Essai de toxicité sur les
chironomes dans un système eau-sédiment chargé
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
3.1
sédiment artificiel
sédiment artificiel défini
[SOURCE: ISO 10872:2010, définition 3.3, modifiée]
Note 1 à l’article: Voir 6.9.
3.2
chlorose
dépigmentation (jaunissement du tissu végétal)
[SOURCE: ISO 20079:2005, définition 3.3, modifiée]
3.3
échantillon témoin
sédiment artificiel prétraité selon les besoins de cet essai et servant de témoin négatif auquel est comparé
l’effet sur le matériau d’essai correspondant
[SOURCE: ISO 10872:2010, définition 3.6, modifiée]
3.4
concentration efficace
CE(r)x
concentration d’une substance dans un échantillon pour essai (CE ) à laquelle un effet de x % est mesuré
x
par rapport au témoin
[SOURCE: ISO 20079:2005, définition 3.9, modifiée]
Note 1 à l’article: Afin d’indiquer sa
...

МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 16191
Первое издание
2013-05-01
Качество воды. Определение
токсического воздействия осадка на
рост Myriophyllum aquaticum
Water quality — Determination of the toxic effect of sediment on the
growth behavior of Myriophyllum aquaticum

Ответственность за подготовку русской версии несёт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава

Ссылочный номер
©
ISO 2013
ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ

©  ISO 2013
Все права сохраняются. Если не задано иначе, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия офиса ISO по адресу, указанному ниже, или членов ISO в стране регистрации
пребывания.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO 2013 – Все права сохраняются

Содержание Страница
Предисловие. iv
Введение . v
1 Область применения . 1
2 Нормативные ссылки . 1
3 Термины и определения . 2
4 Сущность метода . 3
5 Помехи . 4
6 Реактивы . 4
7 Аппаратура . 5
8 Испытание с контрольным веществом. 6
9 Испытуемый организм . 7
10 Проведение испытания . 7
10.1 Выращивание предкультуры Myriophyllum aquaticum для контактного испытания . 7
10.2 Приготовление контрольной пробы . 7
10.3 Отбор проб, хранение и подготовка проб для испытания . 7
10.4 Проведение испытания . 8
10.5 Условия экспонирования . 8
10.6 Измерения . 9
11 Оценивание . 10
11.1 Скорость роста r . 10
11.2 Среднее значение в испытании и на контрольный сосуд (r , r ) . 10
V,T V,C
11.3 Среднее значение в испытании и контрольной пробе(r , r ) . 10
S,T S,C
11.4 Ингибирование I . 10
11.5 Оценка значений E C . 10
r x
11.6 Обработка результатов . 12
12 Критерии достоверности . 12
13 Протокол испытания . 12
Приложение А (информативное) Рисунки . 14
Приложение В (нормативное) Приготовление питательного раствора (среда Штейнберга, по
ISO 20079) . 16
Приложение С (информативное) Поставщики . 18
Приложение D (нормативное) Приготовление маркированных искусственных осадков . 20
Приложение Е (информативное) Данные по эффективности метода . 22
Библиография . 23

Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) всемирная федерация национальных органов
по стандартизации (комитеты-члены ISO). Работа по подготовке международных стандартов обычно
ведется через технические комитеты ISO. Каждый комитет-член ISO, проявляющий интерес к
тематике, по которой учрежден технический комитет, имеет право быть представленным в этом
комитете. Международные организации, государственные и негосударственные, имеющие связи с ISO,
также принимают участие в работе. ISO тесно сотрудничает с Международной электротехнической
комиссией (IEC) по всем вопросам стандартизации в области электротехники.
Процедуры, используемые для разработки данного документа, и процедуры, предусмотренные для его
дальнейшего ведения, описаны в Директивах ISO/IEC Directives, Part 1. В частности, следует отметить
различные критерии утверждения, требуемые для различных типов документов ISO. Проект данного
документа был разработан в соответствии с редакционными правилами Директив ISO/IEC Directives,
Part 2. www.iso.org/directives .
Необходимо обратить внимание на возможность того, что ряд элементов данного документа могут
быть предметом патентных прав. Международная организация ISO не должна нести ответственность
за идентификацию таких прав, частично или полностью. Сведения о патентных правах,
идентифицированных при разработке документа, будут указаны во Введении и/или в перечне
полученных ISO объявлениях о патентном праве. www.iso.org/patents .
Любое торговое название, использованное в данном документе, является информацией,
предоставляемой для удобства пользователей, а не свидетельством в пользу того или иного товара
или той или иной компании.
Технический комитет, несущий ответственность за данный документ, ISO/TC 147, Качество воды,
Подкомитет SC 5, Биологические методы.

iv © ISO 2013– Все права сохраняются

Введение
Контактное испытание с растением Myriophyllum aquaticum, описанное в данном международном
стандарте, позволяет в течение 10 дней выполнить измерение реакции рассматриваемого растения на
растворенные и связанные с твердыми частицами вещества, присутствующие в осадке проб воды
([3] [4] [5] [6] [7] [8]).
Испытуемое растение, перистолистник водный (бразильский) (попугаичье оперение), Myriophyllum
aquaticum (Vellosco) Вердкурта (Verdcurt), является двудольным макрофитом. Родом это растение из
реки Амазонки в Южной Америке, но уже распространилось по всему миру, особенно в районах с
теплым климатом. Оно также повсеместно используется в домашних аквариумах и открытых
океанариумах. Что касается применения перистолистника в качестве испытуемого организма, в
контактном испытании успешно используются его способность к росту в полупогруженном состоянии
(не требуется дополнительной жидкости в качестве надосадочной), сильный потенциал к регенерации
и вегетативный рост. Кроме того, Myriophyllum aquaticum растет без образования боковых побегов во
время испытания, что облегчает работу с ним в лаборатории. В то же время необходимо следить за
тем, чтобы из лаборатории не пропадало живого растительного материала.
На Myriophyllum aquaticum могут повлиять фитотоксичные вещества, присутствующие в осадках
(например, из вынутого грунта). Последующее подавление роста рассчитывают по определенному
параметру (масса в сыром виде) с помощью определенных методов вычисления.

МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ ISO 16191:2013(R)

Качество воды. Определение токсического воздействия
осадка на рост Myriophyllum aquaticum
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ — Пользователи данного международного стандарта должны быть знакомы
с обычной лабораторной практикой. Настоящий стандарт не преследует цели рассмотреть все
вопросы, связанные с безопасностью, если они возникают при его использовании.
Пользователь сам несет ответственность за разработку соответствующих правил техники
безопасности и охраны здоровья, а также за обеспечение соответствия условиям
национальных регламентов. Необходимо гарантировать, что растительный материал не будет
пропадать из лаборатории.
ВНИМАНИЕ! – Самое главное, чтобы анализ в соответствии с настоящим международным
стандартом выполнялся обученным персоналом.
1 Область применения
Настоящий международный стандарт устанавливает метод определения токсичности проб из объектов
окружающей среды в отношении роста перистолистника, Myriophyllum aquaticum. Описанный метод
применим к осадочным отложениям в природной пресной воды и к искусственному осадку.
2 Нормативные ссылки
Нижеследующие нормативные документы являются обязательными для применения настоящего
документа. В отношении датированных ссылок действительными являются только указанные издания.
В отношении недатированных ссылок применимо последнее издание ссылаемого документа, включая
любые изменения к нему.
ISO 5667-15, Качество воды. Отбор проб. Часть 15. Руководство по консервации и работе с
пробами отстоя и осадка
ISO 5667-16, Качество воды. Отбор проб. Часть 16. Руководство по биотестированию проб
ISO 10523, Качество воды. Определение рН
ISO 11465, Качество почвы. Определение сухого вещества и содержания воды на основе массы.
Гравиметрический метод
ISO 20079, Качество воды. Определение токсического воздействия составляющих воды и
отстойных вод на ряску (Lemna minor). Тест на подавление роста ряски
OECD 218, Руководство OECD по испытаниям химических веществ. Тест на токсичность
хирономидов в седиментационной воде с использованием маркированного осадка
ISO 14189:2013(R)
3 Термины и определения
В данном документе применяются следующие термины и определения:
3.1
искусственный осадок
artificial sediment
установленный искусственный осадок
[ИСТОЧНИК: ISO 10872:2010 определение 3.3, с изменениями]
Примечание 1 к статье: См. 6.9.
3.2
хлороз
chlorosis
потеря пигментов (пожелтение растительных тканей)
[ИСТОЧНИК: ISO 20079:2005, определение 3.3, с изменениями]
3.3
контрольная проба
control sample
искусственный осадок, предварительно обработанный в соответствии с требованиями настоящего
испытания, который служит как отрицательный контроль, с которым сравнивают воздействие в
отношении испытуемого материала
[ИСТОЧНИК: ISO 10872:2010 определение 3.6, с изменениями]
3.4
эффективная концентрация
effective concentration
E C
r x
концентрация вещества в испытуемой пробе (EC ), при которой измеряется воздействие x %, если
x
сравнивать с контролем
[ИСТОЧНИК: ISO 20079:2005, определение 3.9, с изменениями]
Примечание 1 к статье: Чтобы однозначно указать значение EC , выведенное из скорости роста, предлагается
использовать обозначение “E C ”.
r x
3.5
надводный рост
emersed growth
морфологическая предрасположенность водных макрофитов, растущих над поверхностью воды
3.6
верхушка (растения)
кольцо (пучок) листьев на конце стебля
head-whorl
верхушечная часть растения Myriophyllum
Примечание 1 к статье: См. Рисунок A.1.
2 © ISO 2013 – Все права сохраняются

ISO 14189:2013(R)
3.7
некроз
necrosis
локализованное омертвение растительной ткани (т.e. ткань коричневого или белого цвета)
[ИСТОЧНИК: ISO 20079:2005, определение 3.16, с изменениями]
3.8
питательный раствор
nutrient solution
раствор питательных веществ и микроэлементов в воде, которые важны для роста перистолистника
Myriophyllum
[ИСТОЧНИК: ISO 20079:2005, определение 3.17, с изменениями]
3.9
предкультура
pre-culture
культура Myriophyllum aquaticum, используемая для акклиматизации испытуемых растений к условиям
испытания и для выращивания растений, верхушечная часть которых будет использоваться для
испытания
[ИСТОЧНИК: ISO 20079:2005, определение 3.19, с изменениями]
Примечание 1 к статье: См. Рисунок A.2.
3.10
параллельный опыт
replicate
один из выбранного ряда испытуемых сосудов (содержащий материал одной пробы и испытуемые
организмы)
Примечание 1 к статье: Испытывают каждый сосуд.
Примечание 2 к статье: Параллельные опыты, описанные в данном международном стандарте, включают
материал пробы (например, натуральный осадок) и три кольца листьев перистолистника Myriophyllum aquaticum.
3.11
проба для испытания
test sample
отдельная часть пробы (например, осадок или искусственный осадок)
[ИСТОЧНИК: ISO 10872:2010, определение 3.14, с изменениями]
3.12
кольцо (листьев)
мутовка
whorl
листья, расположенные по радиусу из отдельных точек и окружающие стебель
Примечание 1 к статье: См. Рисунок A.1.
4 Сущность метода
Кольца листьев Myriophyllum aquaticum подвергают воздействию со стороны испытуемых проб в
течение 10 дней. Рост перистолистника Myriophyllum aquaticum в испытуемой пробе сравнивают с его
ростом в контроль
...