ISO 7899-2:1984

SLOVENSKI STANDARD
SIST ISO 7899-2:1998
01-maj-1998
Kakovost vode - Ugotavljanje prisotnosti in števila fekalnih streptokokov - 2. del:
Metoda membranske filtracije
Water quality -- Detection and enumeration of faecal streptococci -- Part 2: Method by
membrane filtration
Qualité de l'eau -- Recherche et dénombrement des streptocoques fécaux -- Partie 2:
Méthode par filtration sur membrane
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO 7899-2:1984
ICS:
07.100.20 Mikrobiologija vode Microbiology of water
SIST ISO 7899-2:1998 en
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

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SIST ISO 7899-2:1998

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SIST ISO 7899-2:1998
lnternatio ndard 789912
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION~ME)I(~YHAPOAHAR 0PfAHbl3A~&lR fl0 CTAH~APTbl3AUW4~ORGANlSATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Water quality - Detection and enumeration
of faecal streptococci -
Part 2: Method by membrane filtration
Qualit de Seau - Recherche et dhombrement des streptocoques fkcaux - Partie 2: Mkthode par filtration sur membrane
First edition - 1984-12-15
UDC 579.68 : 579.862.1
Ref. No. IS0 7899/2-1984 (E)
Descriptors :
water, quality, tests, detection, bacteria, water pollution.
0
m
-
Price based on 4 pages

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SIST ISO 7899-2:1998
Foreword
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national standards bodies (IS0 member bodies). The work of preparing International
Standards is normally carried out through IS0 technical committees. Each member
body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the IS0 Council. They are approved in accordance with IS0 procedures requiring at
least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard IS0 7899/Z was prepared by Technical Committee
ISO/TC 147, Water quality.
0 International Organization for Standardization, 1984
Printed in Switzerland

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SIST ISO 7899-2:1998
INTERNATIONAL STANDARD IS0 7899/2-1984 (E)
Water quality - Detection and enumeration
of faecal streptococci -
Part 2: Method by membrane filtration
Evaluation of membrane filters used
IS0 7704, Water quality -
0 Introduction
for microbiological analyses.
Worldwide, opinions differ as to which streptococci should be
regarded as indicators of faecal pollution. In this part of
IS0 7899, a method is described for the isolation of strepto-
cocci possessing the group D antigen. For water examination
4 Definitions
purposes these organisms can be regarded as indicators of
faecal pollution. It must be realized, however, that small
numbers of group D streptococci found in water could also
4.1 presumptive faecal streptococci: Bacteria that give a
originate from other habitats. The selectivity of the media used
positive reaction with the media (6.2.1 and 6.2.2) specified in
is such that a reliable count of group D streptococci will be
this part of IS0 7899.
obtained for most practical purposes. Because serological con-
firmation is not included, the term “faecal streptococci” is
used. In special circumstances, however, further identification
4.2 faecal streptococci: Bacteria that give a positive reac-
and serological grouping of the streptococci isolated may be
tion with the medium (6.2.3) specified in this part of IS0 7899
required.
and that give a negative reaction in the catalase test.
IS0 7899 consists of the following parts:
Part 1 : Method by enrichment in a liquid medium.
Part 2: Method by membrane filtration.
5 Principle and reactions
5.1 Filtration, incubation and enumeration
1 Scope
The enumeration of faecal streptococci is based on filtration of
a specified volume of water sample through a membrane filter
This part of IS0 7899 specifies a method for the detection and
with a pore size (0,45 pm) sufficient to retain the bacteria. The
enumeration of faecal streptococci in water by membrane filtra-
tion. filter is placed on a solid selective medium containing sodium
azide (to suppress the growth of Gram-negative bacteria) and
2,3,5-triphenyltetrazolium chloride, a colourless dye, that is
reduced to red formazan by faecal streptococci.
2 Field of application
After incubation all raised colonies which show a red, maroon
or pink colour, either in the centre of the colony or throughout,
The method can be applied to all types of water, except when a
are counted as presumptive faecal streptococci.
large amount of substance liable to be retained by the mem-
brane is present.
5.2 Confirmation
Confirmation on a more selective medium may be carried out if
3 References
necessary.
IS0 5667, Water quality - Sampling -
The confirmation medium, bile-aesculin-azide agar, is in-
Part 7: Guidance on the design of sampling programmes.
cubated at 44 OC for 48 h. Faecal streptococci grow on this
Part 2: Guidance on sampling techniques.
medium and hydrolyse aesculin; the end-product, 6,7-dihydroxy-
coumarin, combines with iron(lll) ions to give a tan-coloured to
Part 3: Guidance on the preservation and handling of
samples. black compound which diffuses into the medium.
1

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SIST ISO 7899-2:1998
IS0 7899/2-1984 (El
Additionally a catalase test is performed on suspect colonies on Dissolve the dye in the water by stirring.
a confirmatory medium.
Sterilize by filtration (022 vm).
Colonies which give a positive aesculin reaction and are
catalase negative may be regarded as faecal streptococci.
The solution should be protected against the action of light.
6.2.1.3 Complete medium
Culture media and reagent
6
basal medium (6.2.1.1) 1 000 ml
IO ml
WARNING - All selective media described in this part of TTC solution (6.2.1.2)
IS0 7899 contain sodium azide. As this substance is
highly toxic and mutagenic, precautions should be taken Add the TTC solution to the basal medium cooled
...

Norme internationale @ 789912
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANOARDIZATION*ME)KAYHAPO~HAfl OPTAHHSAUMR fl0 CTAHfiAPTM3AUMM*ORGANlSATlON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Qualité de l'eau - Recherche et dénombrement des
streptocoques fécaux -
Partie 2: Méthode par filtration sur membrane
Water quality - Detection and enumeration of faecal streptococci - Part 2: Method by membrane filtration
Première édition - 1984-12-15
-
Réf. no : IS0 7899/2-1984 (F)
CDU 579.68 : 579.862.1
2
Descripteurs : eau, qualité, essai, détection, bactérie, pollution de l'eau.
A
O
Prix basé sur 4 pages
!E

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Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d'organismes nationaux de normalisation (comités membres de I'ISO). L'élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I'ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec I'ISO, participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I'ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I'ISO qui requièrent l'approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale IS0 7899/2 a été élaborée par le comité technique
ISO/TC 147, Qualité de /'eau.
@ Organisation internationale de normalisation, 1984 0
Imprimé en Suisse

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IS0 7899/2-1984 (FI
N O R M E I NTE R N AT1 ON A LE
-
Qualité de l'eau - Recherche et dénombrement des
streptocoques fécaux -
Partie 2: Méthode par filtration sur membrane
Partie 2: Guide général sur les techniques d'échantillon-
O Introduction
nage.
À travers le monde, les opinions divergent sur le fait de consi-
Partie 3: Guide général pour la conservation et la manipula-
dérer les streptocoques comme indicateurs de pollution fécale.
tion des échantillons.
Dans la présente partie de I'ISO 7899, une méthode est décrite
pour isoler les streptocoques possédant le groupe antigène D.
IS0 7704, Qualité de l'eau - Evaluation des membranes filtran-
Dans le cadre de l'examen de l'eau, ces organismes peuvent
tes utilisées pour des analyses microbiologiques.
être considérés comme indicateurs de pollution fécale. II se
peut cependant qu'un petit nombre de streptocoques du
groupe D trouvés dans l'eau proviennent également d'autres
habitats. La sélectivité des milieux utilisés permet d'obtenir en
pratique un comptage des streptocoques du groupe D, valable
4 Définitions
pour la plupart des cas. Dans cette méthode, à défaut d'une
confirmation sérologique, on utilisera le terme ((streptocoques
fécaux)).
4.1 streptocoques présumés fécaux: Bactéries donnant
une réaction positive avec les milieux (6.2.1 et 6.2.2) spécifiés
Dans certaines circonstances cependant, une identification
dans la présente partie de I'ISO 7899.
plus poussée et un groupement sérologique des streptocoques
isolés peuvent être nécessaires.
4.2 streptocoques fécaux: Bactéries, donnant une réac-
L'ISO 7899 comprend les parties suivantes:
tion positive avec le milieu (6.2.3) spécifié dans la présente par-
Partie 1 : Méthode par enrichissement en milieu liquide.
tie de I'ISO 7899, et donnant une réaction négative dans l'essai
à la catalase.
Partie 2: Méthode par filtration sur membrane.
1 Objet
5 Principe et réactions
La présente partie de 1'60 7899 spécifie une méthode pour la
recherche et le dénombrement des streptocoques fécaux dans
les eaux, par filtration sur membrane.
5.1 Filtration, incubation et dénombrement
Le dénombrement des streptocoques fécaux est basé sur la fil-
tration d'un volume donné d'échantillon d'eau à travers une
2 Domaine d'application
membrane filtrante de porosité (0,45 pm) suffisante pour rete-
nir les bactéries.
La méthode peut être appliquée à tous les types d'eaux,
excepté lorsque de grandes quantités de substances succepti-
La membrane est placée sur un milieu sélectif contenant de
bles d'être retenues par la membrane sont présentes.
l'azoture de sodium (destiné à inhiber la croissance des bacté-
ries gram-négatives) et du chlorure de triphényl-2, 3, 5 tétrazo-
lium comme indicateur incolore, réduit en rouge par les strepto-
coques fécaux.
3 Références
Après incubation, toutes les colonies développées qui présen-
IS0 5667, Qualité de l'eau - Echantillonnage -
tent une couleur rouge, marron ou rose, soit en leur centre soit
à leur périphérie, sont dénombrées comme streptocoques pré-
Partie I: Guide général pour l'etablissement du programme
sumés fécaux.
d'échantillonnage.
1

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IS0 7899/2-1984 (FI
5.2 Confirmation
glycérophosphate de sodium 10,o 9
maltose 20,o g
Une confirmation sur un milieu plus sélectif peut être réalisée si
lactose 1,o g
nécessaire.
azoture de sodium (NaN3)
0,4 g
pourpre de bromocrésol
Le milieu de confirmation, gélose biliée à I'esculine et à I'azo-
(solution à 15 g/l dans l'éthanol) 1 ml
ture, est incubé à 44 OC pendant 48 h. Les streptocoques
agar-agar 12à20 g1)
fécaux se développent sur ce milieu et hydrolysent I'esculine; le
eau 1 O00 ml
produit final, la dihydroxy-6, 7 coumarine, se combine avec les
Dissoudre les composants dans l'eau en chauffant dans un bain
ions fer(lll) pour donner un composé de coloration foncée à
d'eau à ébullition.
noire qui diffuse dans le milieu.
Après dissolution complète, poursuivre le chauffage pendant
à la catalase est effectué avec les
En complément, un essai
5 min.
colonies suspectes sur un milieu de confirmation solide.
Laisser refroidir entre 50 et 60 OC.
Les colonies qui donnent une réaction à I'esculine positive et
sont catalase-négatives peuvent être considérées comme strep-
6.2.1.2 Solution de lTC
tocoques fécaux.
chlorure de triphényl-2,3,5 tétrazolium Ig
eau 100 ml
6 Milieux de culture et réactifs
Dissoudre l'indicateur dans l'eau en agitant.
AVERTISSEMENT - Tous les milieux sélectifs décrits Stériliser par filtration (0,22 pm).
dans la présente partie de I'ISO 7899 contiennent de I'azo-
Protéger la solution de la lumière.
ture de sodium. Cette substance étant très toxique, des
précautions doivent être prises pour éviter tout contact
6.2.1.3 Milieu complet '
avec elle, en particulier par inhalation de fines poussières
lors de la préparation des milieux complets déshydratés
milieu de base (6.2.1
...