ISO 5765-1:2002

NORME ISO
INTERNATIONALE 5765-1
FIL
79-1
Première édition
2002-09-01
Lait sec, mélanges secs pour crèmes
glacées et fromages fondus —
Détermination de la teneur en lactose —

Partie 1:
Méthode enzymatique par la voie glucose
Dried milk, dried ice-mixes and processed cheese — Determination of
lactose content —
Part 1:
Enzymatic method utilizing the glucose moiety of the lactose

Numéros de référence
FIL 79-1:2002(F)
©
ISO et FIL 2002
FIL 79-1:2002(F)
PDF – Exonération de responsabilité
Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier
peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
autorisant l'utilisation de ces polices et que celles-ci y soient installées. Lors du téléchargement de ce fichier, les parties concernées
acceptent de fait la responsabilité de ne pas enfreindre les conditions de licence d'Adobe. Le Secrétariat central de l'ISO et la FIL
déclinent toute responsabilité en la matière.
Adobe est une marque déposée d'Adobe Systems Incorporated.
Les détails relatifs aux produits logiciels utilisés pour la création du présent fichier PDF sont disponibles dans la rubrique General Info
du fichier; les paramètres de création PDF ont été optimisés pour l'impression. Toutes les mesures ont été prises pour garantir
l'exploitation de ce fichier par les comités membres de l'ISO et les comités nationaux de la FIL. Dans le cas peu probable où
surviendrait un problème d'utilisation, veuillez en informer le Secrétariat central de l'ISO à l'adresse donnée ci-dessous.

©  ISO et FIL 2002
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
soit de l'ISO soit de la FIL à l'adresse respective ci-après.
ISO copyright office Fédération Internationale de Laiterie
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20 Diamant Building • Boulevard Auguste Reyers 80 • B-1030 Bruxelles
Tel. + 41 22 749 01 11 Tel. + 32 2 733 98 88
Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
E-mail copyright@iso.org E-mail info@fil-idf.org
Web www.iso.org Web www.fil-idf.org
Version française parue en 2003
Publié en Suisse
ii © ISO et IDF 2002 – Tous droits réservés

FIL 79-1:2002(F)
Sommaire Page
Avant-propos ISO. iv
Avant-propos FIL . v
Introduction . vi
1 Domaine d'application. 1
2 Terme et définition. 1
3 Principe . 1
4 Réactifs . 2
5 Appareillage. 3
6 Échantillonnage . 4
7 Mode opératoire . 4
7.1 Essai de vérification . 4
7.2 Préparation de l'échantillon pour essai. 5
7.3 Prise d'essai . 5
7.4 Essai à blanc des réactifs . 6
7.5 Défécation. 6
7.6 Dosage . 6
8 Calcul et expression des résultats. 8
8.1 Calcul. 8
8.2 Expression des résultats . 9
9 Fidélité. 9
9.1 Essai interlaboratoires . 9
9.2 Répétabilité. 9
9.3 Reproductibilité. 10
10 Rapport d'essai . 10
Annex A (normative) Règles de bonne pratique de laboratoire (BPL) relatives aux analyses
enzymatiques . 11
Bibliographie . 15

© ISO et IDF 2002 – Tous droits réservés iii

FIL 79-1:2002(F)
Avant-propos ISO
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 3.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments de la présente partie de l'ISO 5765FIL 79
peuvent faire l'objet de droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue
pour responsable de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 5765-1FIL 79-1 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité
SC 5, Lait et produits laitiers, et la Fédération internationale de laiterie (FIL), en collaboration avec l'AOAC
International. Elle est publiée conjointement par l'ISO et la FIL, et séparément par l'AOAC International.
L'ISO 5765FIL 79 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Lait sec, mélanges secs
pour crèmes glacées et fromages fondus — Détermination de la teneur en lactose:
 Partie 1: Méthode enzymatique par la voie glucose
 Partie 2: Méthode enzymatique par la voie galactose
L'Annexe A constitue un élément normatif de la présente partie de l'ISO 5765FIL 79.
iv © ISO et IDF 2002 – Tous droits réservés

FIL 79-1:2002(F)
Avant-propos FIL
La FIL (Fédération internationale de laiterie) est une fédération mondiale du secteur laitier avec un Comité
National dans chacun de ses pays membres. Chaque Comité National a le droit de faire partie des Comités
permanents de la FIL auxquels sont confiés les travaux techniques. La FIL collabore avec l'ISO et avec
l'AOAC International pour l'élaboration de méthodes normalisées d'analyse et d'échantillonnage pour le lait et
les produits laitiers.
Les projets de Normes internationales adoptés par les Équipes d'Action et les Comités permanents sont
soumis aux Comités Nationaux pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert
l'approbation de 50 % au moins des Comités Nationaux votants.
L'ISO 5765-1FIL 79-1 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité
SC 5, Lait et produits laitiers, et la Fédération internationale de laiterie (FIL), en collaboration avec l'AOAC
International. Elle est publiée conjointement par l'ISO et la FIL, et séparément par l'AOAC International.
L'ISO 5765FIL 79 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Lait sec, mélanges secs
pour crèmes glacées et fromages fondus — Détermination de la teneur en lactose:
 Partie 1: Méthode enzymatique par la voie glucose
 Partie 2: Méthode enzymatique par la voie galactose
L'ensemble des travaux a été confié à l'Équipe d'Action mixte ISO/FIL/AOAC, Détermination de lactose et de
lactate du Comité permanent Composants principaux du lait, sous la conduite de son chef de projet,
M. J. Labrijn (NL).
© ISO et IDF 2002 – Tous droits réservés v

FIL 79-1:2002(F)
Introduction
La présente partie de l'ISO 5765FIL 79 décrit la méthode enzymatique destinée à la détermination de la
teneur en lactose par la voie glucose. Elle est complémentaire à l'ISO 5765-2FIL 79-2, qui traite de la
détermination de la teneur en lactose par la voie galactose.
Le choix d'utiliser la méthode décrite dans la partie 1 ou celle décrite dans la partie 2 de l'ISO 5765FIL 79 se
fera en fonction de la quantité de glucose ou de galactose que contient le produit à analyser. Si la teneur en
glucose de l'échantillon est considérablement plus élevée que sa teneur en lactose, il est recommandé
d'utiliser la méthode décrite dans l'ISO 5765-2FIL 79-2. À l'inverse, en présence d'un échantillon dont la
teneur en galactose est considérablement plus élevée que la teneur en lactose, il est recommandé d'utiliser la
méthode décrite dans la présente partie de l'ISO 5765FIL 79.
Si les quantités de glucose et de galactose contenues dans les échantillons sont toutes les deux faibles, on
peut utiliser au choix l'une ou l'autre méthode. Si les quantités de glucose et de galactose contenues dans les
échantillons sont toutes les deux élevées, la précision de la détermination de la teneur en lactose sera
considérablement réduite, quelle que soit la méthode utilisée.
Dans le lait et les produits laitiers ayant subi un traitement thermique, une certaine quantité de lactose peut
avoir été convertie en lactulose. La teneur en lactulose ne peut pas être déterminée par l'application de la
méthode décrite dans la présente partie de l'ISO 5765FIL 79. Toutefois, si la méthode décrite dans
l'ISO 5765-2FIL 79-2 est appliquée, la teneur en lactulose sera partiellement déterminée en tant que lactose.
En outre, dans le lait ou les produits laitiers ayant subi un traitement thermique intense (par exemple le lait
stérilisé), une certaine quantité du lactose peut s'être liée aux protéines à la suite de réactions de Maillard.
Dans de pareils cas, la teneur en lactose lié ne peut être déterminée par aucune des méthodes décrites dans
les deux parties de l'ISO 5765FIL 79.
Des résultats valables ne peuvent être obtenus que dans la mesure où les règles de bonne pratique de
laboratoire (BPL) relatives aux analyses enzymatiques auront été strictement appliquées. Ces règles figurent
dans l'Annexe A.
vi © ISO et IDF 2002 – Tous droits réservés

NORME INTERNATIONALE
FIL 79-1:2002(F)
Lait sec, mélanges secs pour crèmes glacées et fromages
fondus — Détermination de la teneur en lactose —
Partie 1:
Méthode enzymatique par la voie glucose
1 Domaine d'application
La présente partie de l'ISO 5765FIL 79 spécifie une méthode enzymatique pour la détermination de la teneur
en lactose dans tous les types de laits secs et de mélanges secs pour crèmes glacées en présence d'autres
hydrates de carbone et de substances réductrices, ainsi que dans les fromages fondus.
2 Terme et définition
Pour les besoins de la présente partie de l'ISO 5765FIL 79, le terme et la définition suivants s'appliquent.
2.1
teneur en lactose
fraction massique de substances, déterminée par la méthode spécifiée dans la présente partie de
l'ISO 5765FIL 79
NOTE La teneur en lactose est exprimée en pourcentage massique.
3 Principe
3.1 Défécation de la solution ou de la suspension de l'échantillon pour obtenir un extrait purifié.
3.2 Traitement d'un extrait purifié de l'échantillon au moyen des enzymes et substances biochimiques
suivantes:
 b-galactosidase, destinée à scinder le lactose en glucose et en galactose;
 hexokinase et adénosine triphosphate (ATP), en vue de phosphoryler tant le glucose initialement présent
que le glucose libéré par la b-galactosidase, en glucose-6-phosphate (G6P);
 glucose-6-phosphate déshydrogénase (G6P-DH) en présence de nicotinamide-adénine-dinucléotide
+ +
phosphate (NADP ) pour catalyser l'oxydation du G6P en 6-phosphoglu
...