ISO 20186-3:2019

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 20186-3
First edition
2019-09
Molecular in vitro diagnostic
examinations — Specifications for
pre-examination processes for venous
whole blood —
Part 3:
Isolated circulating cell free DNA
from plasma
Analyses de diagnostic moléculaire in vitro — Spécifications relatives
aux processus préanalytiques pour le sang total veineux —
Partie 3: ADN libre circulant extrait du plasma
Reference number
©
ISO 2019
COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
© ISO 2019
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
Email: copyright@iso.org
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2019 – All rights reserved

Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2  Normative references . 1
3  Terms and definitions . 1
4 General consideration . 5
5 Outside the laboratory . 5
5.1 Specimen collection . 5
5.1.1 Information about the specimen donor/patient . 5
5.1.2 Selection of the venous whole blood collection tube by the laboratory . 6
5.1.3 Venous whole blood collection from the donor/patient and stabilization
procedures . 6
5.1.4 Information about the specimen and storage requirements at the blood
collection facility . 7
5.2 Transport requirements . 7
6 Inside the laboratory . 8
6.1 Specimen reception . 8
6.2 Storage requirements for blood specimens . 8
6.3 Plasma preparation . 9
6.4 Storage requirements for plasma samples . 9
6.5 Isolation of the ccfDNA .10
6.5.1 General.10
6.5.2 Using blood collection tubes with stabilizers .10
6.5.3 Using blood collection tubes without stabilizers .11
6.6 Quantity and quality assessment of isolated ccfDNA .11
6.7 Storage of isolated ccfDNA .11
6.7.1 General.11
6.7.2 ccfDNA isolated with commercially available kits .12
6.7.3 ccfDNA isolated with the laboratory's own protocols .12
Annex A (informative) Impact of pre-examination process steps on circulating cell free DNA
profiles in venous whole blood plasma .13
Bibliography .16
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www .iso
.org/iso/foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 212, Clinical laboratory testing and in
vitro diagnostic test systems.
A list of all parts in the ISO 20186 series can be found on the ISO website.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/members .html.
iv © ISO 2019 – All rights reserved

Introduction
Molecular in vitro diagnostics has enabled a significant progress in medicine. Further progress is
expected by new technologies analysing profiles of nucleic acids, proteins, and metabolites in human
tissues and body fluids. However, the profiles of these molecules can change drastically during the
pre-examination process, including the specimen collection, transport, storage and processing.
Consequently, this makes the outcome from diagnostics or research unreliable or even impossible
because the subsequent examination might not determine the real situation in the patient, but an
artificial profile generated during the pre-examination processes.
Circulating cell free DNA (ccfDNA) profiles can change significantly after blood collection (e.g. release
of genomic DNA from cells in blood, ccfDNA degradation and fragmentation and ccfDNA quantity
change). Therefore, special measures need to be taken to secure good quality specimens for ccfDNA
[23]
examination. Studies have been undertaken to determine the important influencing factors .
Standardization of the entire workflow from specimen collection to the ccfDNA examination is needed.
This document standardizes the steps of the pre-examination phase of circulating cell free DNA
prepared from plasma of venous whole blood.
In this document, the following verbal forms are used:
— “shall” indicates a requirement;
— “should” indicates a recommendation;
— “may” indicates a permission;
— “can” indicates a possibility or a capability.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 20186-3:2019(E)
Molecular in vitro diagnostic examinations —
Specifications for pre-examination processes for venous
whole blood —
Part 3:
Isolated circulating cell free DNA from plasma
1 Scope
This document provides recommendations and requirements on the handling, storage, processing
and documentation of venous whole blood specimens intended for circulating cell free DNA (ccfDNA)
examination during the pre-examination phase before an analytical test is performed. This document
covers specimens collected in venous whole blood collection tubes.
This document is applicable to any molecular in vitro diagnostic examination performed by medical
laboratories. It is also intended to be used by laboratory customers, in vitro diagnostics developers and
manufacturers, biobanks, institutions and commercial organizations performing biomedical research,
and regulatory authorities.
Different dedicated measures are taken for stabilizing blood genomic DNA, which are not described in
this document. Blood genomic DNA is covered in ISO 20186-2.
Different dedicated measures are taken for preserving DNA in circulating exosomes, which are not
described in this document.
NOTE ccfDNA obtained from blood by the procedures cited in this document can contain DNA originally
[8][9]
present in exosomes .
DNA in pathogens present in blood is not covered by this document.
2  Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 15189:2012, Medical laboratories — Requirements for quality and competence
3  Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https: //www .iso .org/obp
— IEC Electropedia: available at http: //www .electropedia .org/
3.1
analyte
component represented in the name of a measurable quantity
[SOURCE: ISO 17511:2003, 3.2, modified — The example has been deleted.]
3.2
backflow
flow of a liquid opposite to the usual or desired direction
3.3
blood collection set
intravenous device specialized for venipuncture consisting of a stainless steel beveled needle and tube
(tubing) with attached plastic wings and fitting connector
Note 1 to entry: The connector attaches to an additional blood collection device, e.g. a blood collection tube.
3.4
blood collection tube
tube used for blood collection, usually with a vacuum which forces blood from the vein through the
needle into the tube
3.5
ccfDNA
circulating cell free DNA
extracellular human DNA present in blood and plasma
[8][9]
Note 1 to entry: ccfDNA can include DNA present in vesicles such as exosomes .
3.6
ccfDNA profile
circulating cell free DNA profile
amount of different ccfDNA molecules, present in blood and plasma that can be measured in the absence
of any losses, inhibition and interference
3.7
closed system
non-modifiable system provided by the vendor including all necessary components for the pre-
examination and/or examination (i.e. hardware, software, procedures and reagents)
3.8
DNA
deoxyribonucleic acid
polymer of deoxyribonucleotides occurring in a double-stranded (dsDNA) or single-stranded
(ssDNA) form
[SOURCE: ISO 22174:2005, 3.1.2]
3.9
DNase
deoxyribonuclease
enzyme that catalyzes the degradation of DNA into smaller components
3.10
examination
analytical test
set of operations having the object of determining the value or characteristics of a property
Note 1 to entry: Processes that start with the isolated a
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 20186-3
Première édition
2019-09
Analyses de diagnostic moléculaire in
vitro — Spécifications relatives aux
processus préanalytiques pour le sang
total veineux —
Partie 3:
ADN libre circulant extrait du plasma
Molecular in vitro diagnostic examinations — Specifications for pre-
examination processes for venous whole blood —
Part 3: Isolated circulating cell free DNA from plasma
Numéro de référence
©
ISO 2019
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2019
Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2019 – Tous droits réservés

Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3  Termes et définitions . 1
4 Considérations générales . 5
5 Hors du laboratoire . 6
5.1 Recueil des prélèvements . 6
5.1.1 Informations relatives au donneur/patient . 6
5.1.2 Choix du tube de prélèvement de sang total veineux par le laboratoire . 6
5.1.3 Protocoles de prélèvement de sang total veineux du donneur/patient et
protocoles de stabilisation . 7
5.1.4 Informations sur les échantillons primaires et exigences de stockage dans
le centre de prélèvement . 7
5.2 Exigences de transport . 8
6 Dans le laboratoire . 9
6.1 Réception des prélèvements . 9
6.2 Exigences de stockage pour les prélèvements de sang . 9
6.3 Préparation du plasma . 9
6.4 Exigences de stockage pour les échantillons de plasma .10
6.5 Extraction de l’ADNlc .11
6.5.1 Généralités .11
6.5.2 Utilisation de tubes de prélèvement sanguin contenant des stabilisateurs .11
6.5.3 Utilisation de tubes de prélèvement sanguin sans stabilisateur .12
6.6 Évaluation quantitative et qualitative de l’ADNlc extrait .12
6.7 Stockage de l’ADNlc extrait .12
6.7.1 Généralités .12
6.7.2 ADNlc extrait avec des kits disponibles dans le commerce .13
6.7.3 ADNlc extrait suivant des protocoles propres au laboratoire .13
Annexe A (informative) Impact des étapes du processus préanalytique sur les profils d’ADN
libre circulant dans le plasma du sang total veineux .14
Bibliographie .18
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir www .iso .org/avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 212, Laboratoires d'analyses de
biologie médicale et systèmes de diagnostic in vitro.
Une liste de toutes les parties de la série ISO 20186 se trouve sur le site web de l’ISO.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.
iv © ISO 2019 – Tous droits réservés

Introduction
Le diagnostic moléculaire in vitro a permis de faire considérablement progresser la médecine. D’autres
avancées sont attendues avec les nouvelles technologies d’analyse des profils des acides nucléiques,
des protéines et des métabolites dans les tissus humains et les fluides corporels. Toutefois, les profils
de ces molécules peuvent varier considérablement au cours du processus préanalytique, incluant le
prélèvement des échantillons, le transport, le stockage et le traitement. Il en découle un résultat de
diagnostic ou de recherche peu fiable, voire impossible, car l’analyse subséquente pourrait ne pas
déterminer l’état réel du patient, mais un profil artificiel généré pendant les processus préanalytiques.
Les profils d’ADN libre circulant (ADNlc) peuvent varier considérablement suite à un prélèvement
sanguin (par exemple, libération d’ADN génomique par les cellules sanguines, dégradation et
fragmentation de l’ADNlc et changement de la quantité d’ADNlc). Par conséquent, il est nécessaire que
des mesures spécifiques soient prises pour assurer la bonne qualité des échantillons primaires en vue
[23]
de l’analyse de l’ADNlc. Des études ont été réalisées afin de définir les facteurs les plus influents .
Une normalisation de l’ensemble du flux de travail, à partir du prélèvement de l’échantillon primaire
jusqu’à l’analyse de l’ADNlc, est nécessaire.
Le présent document normalise les étapes de la phase préanalytique de l’ADN libre circulant préparé à
partir du plasma du sang total veineux.
Dans le présent document, les formes verbales suivantes sont utilisées:
— «doit» indique une exigence;
— «il convient de/que» indique une recommandation;
— «peut/il est admis/permis» indique une autorisation;
— «peut/il est possible» indique une possibilité ou une capacité.
NORME INTERNATIONALE ISO 20186-3:2019(F)
Analyses de diagnostic moléculaire in vitro —
Spécifications relatives aux processus préanalytiques pour
le sang total veineux —
Partie 3:
ADN libre circulant extrait du plasma
1 Domaine d’application
Le présent document fournit des recommandations et des exigences sur la manipulation, le stockage,
le traitement et la documentation des prélèvements de sang total veineux destinés à l’analyse de l’ADN
libre circulant (ADNlc) durant la phase préanalytique précédant la réalisation d’un essai analytique. Le
présent document concerne les échantillons primaires prélevés dans des tubes de prélèvement de sang
total veineux.
Le présent document s’applique aux analyses de diagnostic moléculaire in vitro réalisées par des
laboratoires de biologie médicale. Il est également destiné à être utilisé par des clients de laboratoires,
des développeurs et fabricants de l’industrie du diagnostic in vitro, ainsi que par des biobanques, des
institutions et des organismes commerciaux spécialisés en recherche biomédicale, de même que des
autorités de réglementation.
Des mesures spécifiques différentes, non décrites dans le présent document, sont prises pour stabiliser
l’ADN génomique sanguin. L’ADN génomique sanguin est couvert par l’ISO 20186-2.
Des mesures spécifiques différentes, non décrites dans le présent document, sont prises pour préserver
l’ADN des exosomes circulants.
NOTE L’ADNlc extrait du sang à l’aide des protocoles cités dans le présent document est susceptible de
[8][9]
contenir de l’ADN présent à l’origine dans les exosomes .
L’ADN des pathogènes présents dans le sang n’est pas couvert par le présent document.
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s'applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 15189:2012, Laboratoires de biologie médicale — Exigences concernant la qualité et la compétence
3  Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https: //www .iso .org/obp;
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http: //www .electropedia .org/.
3.1
analyte
composant représenté sous la forme d’une grandeur mesurable
[SOURCE: ISO 17511:2003, 3.2, modifiée — L'exemple a été supprimé.]
3.2
reflux
écoulement d’un liquide dans la direction opposée à la direction d’écoulement habituelle ou souhaitée
3.3
kit de prélèvement sanguin
dispositif intraveineux conçu spécifiquement pour la ponction veineuse, constitué d’une aiguille
biseautée en acier inoxydable et d’un tube doté d’ailettes en plastique et d’un raccord
Note 1 à l'article: Le raccord se fixe sur un dispositif de prélèvement sanguin supplémentaire, par exemple un
tube de prélèvement sanguin.
3.4
tube de prélèvement sanguin
tube utilisé pour prélever du sa
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 20186-3
Première édition
2019-09
Analyses de diagnostic moléculaire in
vitro — Spécifications relatives aux
processus préanalytiques pour le sang
total veineux —
Partie 3:
ADN libre circulant extrait du plasma
Molecular in vitro diagnostic examinations — Specifications for pre-
examination processes for venous whole blood —
Part 3: Isolated circulating cell free DNA from plasma
Numéro de référence
©
ISO 2019
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2019
Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
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Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3  Termes et définitions . 1
4 Considérations générales . 5
5 Hors du laboratoire . 6
5.1 Recueil des prélèvements . 6
5.1.1 Informations relatives au donneur/patient . 6
5.1.2 Choix du tube de prélèvement de sang total veineux par le laboratoire . 6
5.1.3 Protocoles de prélèvement de sang total veineux du donneur/patient et
protocoles de stabilisation . 7
5.1.4 Informations sur les échantillons primaires et exigences de stockage dans
le centre de prélèvement . 7
5.2 Exigences de transport . 8
6 Dans le laboratoire . 9
6.1 Réception des prélèvements . 9
6.2 Exigences de stockage pour les prélèvements de sang . 9
6.3 Préparation du plasma . 9
6.4 Exigences de stockage pour les échantillons de plasma .10
6.5 Extraction de l’ADNlc .11
6.5.1 Généralités .11
6.5.2 Utilisation de tubes de prélèvement sanguin contenant des stabilisateurs .11
6.5.3 Utilisation de tubes de prélèvement sanguin sans stabilisateur .12
6.6 Évaluation quantitative et qualitative de l’ADNlc extrait .12
6.7 Stockage de l’ADNlc extrait .12
6.7.1 Généralités .12
6.7.2 ADNlc extrait avec des kits disponibles dans le commerce .13
6.7.3 ADNlc extrait suivant des protocoles propres au laboratoire .13
Annexe A (informative) Impact des étapes du processus préanalytique sur les profils d’ADN
libre circulant dans le plasma du sang total veineux .14
Bibliographie .18
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir www .iso .org/avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 212, Laboratoires d'analyses de
biologie médicale et systèmes de diagnostic in vitro.
Une liste de toutes les parties de la série ISO 20186 se trouve sur le site web de l’ISO.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/fr/members .html.
iv © ISO 2019 – Tous droits réservés

Introduction
Le diagnostic moléculaire in vitro a permis de faire considérablement progresser la médecine. D’autres
avancées sont attendues avec les nouvelles technologies d’analyse des profils des acides nucléiques,
des protéines et des métabolites dans les tissus humains et les fluides corporels. Toutefois, les profils
de ces molécules peuvent varier considérablement au cours du processus préanalytique, incluant le
prélèvement des échantillons, le transport, le stockage et le traitement. Il en découle un résultat de
diagnostic ou de recherche peu fiable, voire impossible, car l’analyse subséquente pourrait ne pas
déterminer l’état réel du patient, mais un profil artificiel généré pendant les processus préanalytiques.
Les profils d’ADN libre circulant (ADNlc) peuvent varier considérablement suite à un prélèvement
sanguin (par exemple, libération d’ADN génomique par les cellules sanguines, dégradation et
fragmentation de l’ADNlc et changement de la quantité d’ADNlc). Par conséquent, il est nécessaire que
des mesures spécifiques soient prises pour assurer la bonne qualité des échantillons primaires en vue
[23]
de l’analyse de l’ADNlc. Des études ont été réalisées afin de définir les facteurs les plus influents .
Une normalisation de l’ensemble du flux de travail, à partir du prélèvement de l’échantillon primaire
jusqu’à l’analyse de l’ADNlc, est nécessaire.
Le présent document normalise les étapes de la phase préanalytique de l’ADN libre circulant préparé à
partir du plasma du sang total veineux.
Dans le présent document, les formes verbales suivantes sont utilisées:
— «doit» indique une exigence;
— «il convient de/que» indique une recommandation;
— «peut/il est admis/permis» indique une autorisation;
— «peut/il est possible» indique une possibilité ou une capacité.
NORME INTERNATIONALE ISO 20186-3:2019(F)
Analyses de diagnostic moléculaire in vitro —
Spécifications relatives aux processus préanalytiques pour
le sang total veineux —
Partie 3:
ADN libre circulant extrait du plasma
1 Domaine d’application
Le présent document fournit des recommandations et des exigences sur la manipulation, le stockage,
le traitement et la documentation des prélèvements de sang total veineux destinés à l’analyse de l’ADN
libre circulant (ADNlc) durant la phase préanalytique précédant la réalisation d’un essai analytique. Le
présent document concerne les échantillons primaires prélevés dans des tubes de prélèvement de sang
total veineux.
Le présent document s’applique aux analyses de diagnostic moléculaire in vitro réalisées par des
laboratoires de biologie médicale. Il est également destiné à être utilisé par des clients de laboratoires,
des développeurs et fabricants de l’industrie du diagnostic in vitro, ainsi que par des biobanques, des
institutions et des organismes commerciaux spécialisés en recherche biomédicale, de même que des
autorités de réglementation.
Des mesures spécifiques différentes, non décrites dans le présent document, sont prises pour stabiliser
l’ADN génomique sanguin. L’ADN génomique sanguin est couvert par l’ISO 20186-2.
Des mesures spécifiques différentes, non décrites dans le présent document, sont prises pour préserver
l’ADN des exosomes circulants.
NOTE L’ADNlc extrait du sang à l’aide des protocoles cités dans le présent document est susceptible de
[8][9]
contenir de l’ADN présent à l’origine dans les exosomes .
L’ADN des pathogènes présents dans le sang n’est pas couvert par le présent document.
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s'applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 15189:2012, Laboratoires de biologie médicale — Exigences concernant la qualité et la compétence
3  Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https: //www .iso .org/obp;
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse http: //www .electropedia .org/.
3.1
analyte
composant représenté sous la forme d’une grandeur mesurable
[SOURCE: ISO 17511:2003, 3.2, modifiée — L'exemple a été supprimé.]
3.2
reflux
écoulement d’un liquide dans la direction opposée à la direction d’écoulement habituelle ou souhaitée
3.3
kit de prélèvement sanguin
dispositif intraveineux conçu spécifiquement pour la ponction veineuse, constitué d’une aiguille
biseautée en acier inoxydable et d’un tube doté d’ailettes en plastique et d’un raccord
Note 1 à l'article: Le raccord se fixe sur un dispositif de prélèvement sanguin supplémentaire, par exemple un
tube de prélèvement sanguin.
3.4
tube de prélèvement sanguin
tube utilisé pour prélever du sa
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