ISO 6493:2000
(Main)Animal feeding stuffs — Determination of starch content — Polarimetric method
Animal feeding stuffs — Determination of starch content — Polarimetric method
Aliments des animaux — Détermination de la teneur en amidon — Méthode polarimétrique
L'ISO 6493:2000 spécifie une méthode pour la détermination de la teneur en amidon par polarimétrie dans les aliments des animaux et les matières premières des aliments des animaux. La méthode n'est pas applicable aux produits qui, en plus de l'amidon, contiennent d'autres substances qui sont optiquement actives pendant l'analyse et ne se dissolvent pas dans l'éthanol à 40 %. On peut citer comme exemples de ce type de produits la pulpe de pomme de terre, les chips de betterave, les sous-produits de betterave, la levure, les produits à base de soja, le lupin et les produits riches en inuline (par exemple les racines de chicorée et le topinambour). Dans ces cas, un dosage enzymatique de la teneur en amidon peut être utilisé. Cette méthode n'est pas applicable pour la quantification de l'amidon lorsque la teneur en amylose dépasse 40 % (par exemple amidon de maïs riche en amylose de type Hylon VII).
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INTERNATIONAL ISO
STANDARD 6493
First edition
2000-02-01
Animal feeding stuffs — Determination of
starch content — Polarimetric method
Aliments des animaux — Détermination de la teneur en amidon —
Méthode polarimétrique
Reference number
ISO 6493:2000(E)
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ISO 2000
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ISO 6493:2000(E)
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ISO 6493:2000(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO
member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical
committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in
liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 3.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting.
Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this International Standard may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
International Standard ISO 6493 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Agricultural food products,
Subcommittee SC 10, Animal feeding stuffs.
Annexes A and B of this International Standard are for information only.
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INTERNATIONAL STANDARD ISO 6493:2000(E)
Animal feeding stuffs — Determination of starch content —
Polarimetric method
1 Scope
This International Standard specifies a method for the polarimetric determination of the starch content of animal
feeding stuffs and raw materials for animal feeding stuffs.
The method is not applicable to products which, besides starch, contain other substances which are optically active
during the analysis and do not dissolve in 40 % ethanol. Examples of these products are potato pulp, beet chips,
beet leaves, beet tops, yeast, soya products, lupine and products rich in inulin (e.g. chicory roots and Jerusalem
artichokes). In these cases an enzymatic determination of the starch content may be used.
This method is not applicable for the quantification of starch with an amylose content exceeding 40 % (e.g. high
amylose maize starch like Hylon VII).
CAUTION — Depending on the intensity of the heat/moisture treatment the product has been subjected to,
too low a starch content may be determined.
2 Normative references
The following normative documents contain provisions which, through reference in this text, constitute provisions of
this International Standard. For dated references, subsequent amendments to, or revisions of, any of these
publications do not apply. However, parties to agreements based on this International Standard are encouraged to
investigate the possibility of applying the most recent editions of the normative documents indicated below. For
undated references, the latest edition of the normative document referred to applies. Members of ISO and IEC
maintain registers of currently valid International Standards.
ISO 3310-1, Test sieves — Technical requirements and testing — Part 1: Test sieves of metal wire cloth.
ISO 3696, Water for analytical laboratory use — Specification and test methods.
ISO 6498, Animal feeding stuffs — Preparation of test samples.
3 Terms and definitions
For the purposes of this International Standard, the following terms and definitions apply.
3.1
starch
natural vegetable polymer consisting of long unbranched chains of �-1,4-linked glucose-units (amylose) and/or
long�-1,6-branched chains of�-1,4-linked glucose-units (amylopectine)
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ISO 6493:2000(E)
3.2
starch content
mass fraction of starch and its high molecular mass breakdown products, insoluble in 40 % ethanol, and
determined in accordance with this International Standard
NOTE The starch content is expressed in grams per kilogram.
4Principle
A test portion is decomposed with dilute hydrochloric acid, then the solubilized starch is gelatinized and partially
hydrolysed.
The total optical rotation of the clarified solution is determined.
Correction is made for the optical rotation caused by other substances which are soluble in 40 % ethanol and
optically active after treatment with dilute hydrochloric acid.
The starch content is calculated by multiplying the corrected optical rotation by a known factor.
5 Reagents
Use only reagents of recognized analytical grade.
5.1 Water, complying with at least grade 3 in accordance with ISO 3696.
5.2 Ethanol (C H OH), 40 % volume fraction.
2 5
5.3 Methyl red, solution in ethanol (96 % volume fraction), �(methyl red) = 1 g/l.
5.4 Hydrochloric acid, c(HCl) = 0,31 mol/l.
Check the concentration by titration with a 0,100 mol/l sodium hydroxide solution using methyl red as indicator. An
aliquot portion of 10 ml of hydrochloric acid shall neutralize (31,0 � 0,1) ml of the sodium hydroxide solution.
CAUTION — Too high or too low a hydrochloric acid concentration will lead to incorrect values of the
determined starch content.
5.5 Hydrochloric acid, c(HCl) = 7,73 mol/l.
5.6 Clarifying solutions, according to Carrez, as follows.
5.6.1 Potassium hexacyanoiron(II) solution, c[K Fe(CN) ] = 0,25 mol/l.
4 6
In a 1 l volumetric flask, dissolve 106 g of potassium hexacyanoiron(II) trihydrate [K Fe(CN) �3H O] in water. Dilute
4 6 2
to the mark with water.
5.6.2 Zinc acetate, solution in 0,5 mol/l acetic acid, c[Zn(CH CO ) ]=1mol/l.
3 2 2
In a 1 l volumetric flask dissolve 219,5 g of zinc acetate dihydrate [Zn(CH CO ) �2H O] and 30 g of glacial acetic
3 2 2 2
acid in water. Dilute to the mark with water.
5.7 Saccharose solution, �(C H O )=100,0g/l.
12 22 11
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ISO 6493:2000(E)
6 Apparatus
Usual laboratory apparatus and, in particular, the following.
6.1 Analytical balance, capable of weighing to the nearest 1 mg.
6.2 pH-meter, capable of measuring to the nearest 0,1 pH unit.
6.3 Boiling water bath, with sufficient capacity to maintain the water at boiling point while immersing the conical
flasks.
CAUTION — If the water bath is not boiling constantly, too high a starch content will be determined.
6.4 Polarimeter, accurate to at least 0,01° and suitable for 200 mm long tubes.
Measure the optical rotation at a wavelength of 589,3 nm (sodium D line). When using polarimeter tubes of
deviating lengths, measure with a corresponding accuracy.
A saccharimeter may be used if it has an accuracy of measurement at least equal to the accuracy of the
polarimeter. In this case, convert the readings to degrees.
The polarimeter may be calibrated with the saccharose solution (5.7). This saccharose solution yields an optical
rotation of 13,30° when measured at (20 � 1) �C using a 200 mm polarimeter tube.
6.5 Burette.
6.6 Reflux condensers.
6.7 Volumetric flasks, of capacity 100 ml.
If the volumetric flasks need to be fitted to a reflux condenser (see 9.3.3), the use of wide-necked Kohlrausch
conical flasks is recommended.
NOTE Kohlrausch conical flasks are commercially available volumetric flasks used for sugar determinations.
7 Sampling
Sampling is not part of the method specified in this International Standard. A recommended sampling method is
given in ISO 6497 [1].
It is important that the laboratory receive a sample which is truly representative and has not been damaged or
changed during transport or storage.
8 Preparation of test sample
Prepare the test sample in accordance with ISO 6498.
If solid, grind the laboratory sample (usually 500 g) so that it passes completely through a sieve with 0,5 mm
apertures complying with ISO 3310-1. Mix thoroughly.
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ISO 6493:2000(E)
9 Procedure
9.1 Determination of acid consumption
9.1.1 Weigh approximately 2,5 g of the prepared test sample to the nearest 1 mg and transfer it quantitatively to a
50 ml conical flask. Add 25 ml of water and shake until a homogeneous suspension is obtained.
9.1.2 Place the electrodes of the pH-meter (6.2) in the suspension and, using a burette, add hydrochloric acid
(5.4) until the pH of the suspension is 3,0 � 0,1. Check whether the complete acid consumption of the test portion
has been compensated for, by shaking the suspension vigorously and allowing it to stand for 2 min. If during this
period the pH has increased up to a value exceeding 3,1, add more hydrochloric acid (5.4), using the burette, as
many times as necessary until no more acid is consumed.
9.1.3 Calculate the acid consumption of the test portion from the volume of hydrochloric acid (5.4) added.
9.2 Determination of total optical rotation
9.2.1 Weigh approximately 2,5 g of the prepared test sample (m ) to the nearest 1 mg and transfer it quantitatively
1
to a dry 100 ml volumetric flask (6.7). Add 25 ml of hydrochloric acid (5.4). Shake until a homogeneous suspension
is obtained, then add a further 25 ml of hydrochloric acid (5.4).
9.2.2 Compensate for the acid consumption of the test portion (see 9.1) by adding hydrochloric acid of a suitable
concentration so that the volume of the contents of the flask is changed by not more than 1 ml.
EXAMPLE Suppose that 5,0 ml of 0,1 mol/l hydrochloric acid is used in 9.1.2 for compensation of a sample rich in chalk, then
the acid consumption of the test portion is 0,5 mmol (9.1.3). In that case, add 0,5 ml of 1,0 mol/l hydrochloric
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 6493
Première édition
2000-02-01
Aliments des animaux — Détermination
de la teneur en amidon — Méthode
polarimétrique
Animal feeding stuffs — Determination of starch content —
Polarimetric method
Numéro de référence
ISO 6493:2000(F)
©
ISO 2000
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ISO 6493:2000(F)
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
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de l’ISO à l’adresse ci-après ou du comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Web www.iso.org
Version française parue en 2011
Publié en Suisse
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ISO 6493:2000(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales,
en liaison avec l’ISO participent également aux travaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission
électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI, Partie 3.
La tâche principale des comités techniques est d’élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des comités membres votants.
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de droits
de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir
identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L’ISO 6493 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comité
SC 10, Aliments des animaux.
Les Annexes A et B de la présente Norme internationale sont informatives uniquement.
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NORME INTERNATIONALE ISO 6493:2000(F)
Aliments des animaux — Détermination de la teneur
en amidon — Méthode polarimétrique
1 Domaine d’application
La présente Norme internationale spécifie une méthode pour la détermination de la teneur en amidon par
polarimétrie dans les aliments des animaux et les matières premières des aliments des animaux.
La méthode n’est pas applicable aux produits qui, en plus de l’amidon, contiennent d’autres substances qui
sont optiquement actives pendant l’analyse et ne se dissolvent pas dans l’éthanol à 40 %. On peut citer comme
exemples de ce type de produits la pulpe de pomme de terre, les chips de betterave, les sous-produits de
betterave, la levure, les produits à base de soja, le lupin et les produits riches en inuline (par exemple les
racines de chicorée et le topinambour). Dans ces cas, un dosage enzymatique de la teneur en amidon peut
être utilisé.
Cette méthode n’est pas applicable pour la quantification de l’amidon lorsque la teneur en amylose dépasse
40 % (par exemple amidon de maïs riche en amylose de type Hylon VII).
ATTENTION — Suivant l’intensité du traitement chaleur/humidité qu’a subi le produit, une teneur en
amidon trop faible peut être déterminée.
2 Références normatives
Les documents normatifs suivants contiennent des dispositions qui, par suite de la référence qui y est faite,
constituent des dispositions valables pour la présente Norme internationale. Pour les références datées,
les amendements ultérieurs ou les révisions de ces publications ne s’appliquent pas. Toutefois, les parties
prenantes aux accords fondés sur la présente Norme internationale sont invitées à rechercher la possibilité
d’appliquer les éditions les plus récentes des documents normatifs indiqués ci-après. Pour les références non
datées, la dernière édition du document normatif en référence s’applique. Les membres de l’ISO et de la CEI
possèdent le registre des Normes internationales en vigueur.
ISO 3310-1, Tamis de contrôle — Exigences techniques et vérifications — Partie 1: Tamis de contrôle en
tissus métalliques
ISO 3696, Eau pour laboratoire à usage analytique — Spécification et méthodes d’essai
ISO 6498, Aliments des animaux — Préparation des échantillons pour essai
3 Termes et définitions
Pour les besoins de la présente Norme internationale, les termes et définitions suivants s’appliquent.
3.1
amidon
polymère végétal naturel composé de chaînes longues non ramifiées d’unités de glucose liées par des liaisons
a-1,4 (amylose) et/ou de chaînes longues ramifiées par des liaisons a-1,6 d’unités de glucose elles-mêmes
liées par des liaisons a-1,4 (amylopectine)
3.2
teneur en amidon
fraction massique d’amidon et de ses produits de décomposition de masse moléculaire élevée, insoluble dans
l’éthanol à 40 % et déterminée conformément à la présente Norme internationale
NOTE La teneur en amidon est exprimée en grammes par kilogramme.
© ISO 2000 – Tous droits réservés 1
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ISO 6493:2000(F)
4 Principe
Une prise d’essai est décomposée avec de l’acide chlorhydrique dilué, puis l’amidon solubilisé est gélatinisé et
partiellement hydrolysé.
Le pouvoir rotatoire total de la solution clarifiée est déterminé.
Une correction est réalisée pour tenir compte du pouvoir rotatoire causé par d’autres substances qui sont
solubles dans l’éthanol à 40 % et optiquement actives après traitement à l’acide chlorhydrique dilué.
La teneur en amidon est calculée en multipliant le pouvoir rotatoire corrigé par un facteur connu.
5 Réactifs
Utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique reconnue.
5.1 Eau, conforme au minimum à la qualité 3 selon l’ISO 3696.
5.2 Éthanol (C H OH), à 40 % (fraction volumique).
2 5
5.3 Rouge de méthyle, solution dans l’éthanol à 96 % (fraction volumique), ρ(rouge de méthyle) = 1 g/l.
5.4 Acide chlorhydrique, c(HCl) = 0,31 mol/l.
Vérifier la concentration par titrage avec une solution d’hydroxyde de sodium à 0,100 mol/l en utilisant du rouge
de méthyle comme indicateur. Une partie aliquote de 10 ml d’acide chlorhydrique doit neutraliser (31,0 ± 0,1) ml
de la solution d’hydroxyde de sodium.
ATTENTION — Une concentration en acide chlorhydrique trop faible ou trop élevée conduira à des
valeurs incorrectes de la teneur en amidon déterminée.
5.5 Acide chlorhydrique, c(HCl) = 7,73 mol/l.
5.6 Solutions de clarification, de Carrez, comme suit.
5.6.1 Solution de ferrocyanure de potassium, c[K Fe(CN) ] = 0,25 mol/l.
4 6
Dans une fiole jaugée de 1 l, dissoudre 106 g de ferrocyanure de potassium trihydraté [K Fe(CN) ,3H O] dans
4 6 2
de l’eau. Diluer jusqu’au trait avec de l’eau.
5.6.2 Acétate de zinc, solution dans de l’acide acétique à 0,5 mol/l, c[Zn(CH CO ) ] = 1 mol/l.
3 2 2
Dans une fiole jaugée de 1 l, dissoudre 219,5 g d’acétate de zinc dihydraté [Zn(CH CO ) ,2H O] et 30 g d’acide
3 2 2 2
acétique glacial dans de l’eau. Diluer jusqu’au trait avec de l’eau.
5.7 Solution de saccharose, ρ(C H O ) = 100,0 g/l.
12 22 11
6 Appareillage
Appareillage courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit.
6.1 Balance analytique, permettant de peser à 1 mg près.
6.2 pH-mètre, permettant des mesures à 0,1 unité de pH près.
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ISO 6493:2000(F)
6.3 Bain d’eau bouillante, d’une capacité suffisante pour maintenir l’eau au point d’ébullition pendant
l’immersion des fioles coniques.
ATTENTION — Si le bain d’eau n’est pas constamment en ébullition, une teneur en amidon trop élevée
sera déterminée.
6.4 Polarimètre, permettant des lectures à au moins 0,01° près et adapté pour des tubes de 200 mm de long.
Mesurer le pouvoir rotatoire à une longueur d’onde de 589,3 nm (raie D du sodium). En cas d’utilisation de
tubes polarimétriques de longueur différente, adapter la lecture à la longueur correspondante.
Un saccharimètre peut être utilisé si la précision de son échelle de mesure est au moins égale à celle du
polarimètre. Dans ce cas, convertir les lectures en degrés.
Le polarimètre peut être étalonné avec la solution de saccharose (5.7). Cette solution de saccharose conduit à
un pouvoir rotatoire de 13,30° pour un mesurage à (20 ± 1) °C avec un tube polarimétrique de 200 mm.
6.5 Burette.
6.6 Réfrigérants à reflux.
6.7 Fioles jaugées, d’une contenance de 100 ml.
Si les fioles jaugées doivent être surmontées d’un réfrigérant à reflux (voir 9.3.3), l’emploi de fioles coniques à
col large selon Kohlrausch est recommandé.
NOTE Les fioles coniques selon Kohlrausch sont des fioles jaugées disponibles dans le commerce utilisées pour le
dosage du sucre.
7 Échantillonnage
L’échantillonnage ne fait pas partie de la méthode spécifiée dans la présente Norme internationale. Une
[1]
méthode d’échantillonnage recommandée est donnée dans l’ISO 6497 .
Il est important que le laboratoire reçoive un échantillon qui soit réellement représentatif et qui n’ait pas été
endommagé ou modifié pendant le transport ou le stockage.
8 Préparation de l’échantillon pour essai
Préparer l’échantillon pour essai conformément à l’ISO 6498.
S’il est solide, broyer l’échantillon pour laboratoire (généralement 500 g) de sorte qu’il passe complètement au
travers d’un tamis de 0,5 mm d’ouverture de maille conforme à l’ISO 3310-1. Mélanger soigneusement.
9 Mode opératoire
9.1 Détermination de la consommation d’acide
9.1.1 Peser environ 2,5 g de l’échantillon pour essai préparé, à 1 mg près, et transférer quantitativement dans
une fiole conique de 50 ml. Ajouter 25 ml d’eau et agiter jusqu’à ce que la suspension soit homogène.
9.1.2 Placer les électrodes du pH-mètre (6.2) dans la suspension et, à l’aide d’une burette, ajouter de l’acide
chlorhydrique (5.4) jusqu’à ce que le pH de la suspension soit égal à 3,0 ± 0,1. Vérifier si la consommation
d’acide totale de la prise d’essai a été compensée en agitant vigoureusement la suspension et en la laissant
reposer pendant 2 min. Si au cours de cette période le pH a augmenté jusqu’à une valeur supérieure à 3,1,
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ISO 6493:2000(F)
ajouter de l’acide chlorhydrique (5.4), à l’aide de la burette, autant de fois que nécessaire jusqu’à ce qu’il n’y ait
plus d’acide consommé.
9.1.3 Calculer la consommation d’acide de la prise d’essai à partir du volume d’acide chlorhydrique (5.4) ajouté.
9.2 Détermination du pouvoir rotatoire total
9.2.1 Peser environ 2,5 g de l’échantillon pour essai préparé (m ), à 1 mg près, et transférer quantitativement
1
dans une fiole jaugée de 100 ml (6.7) sèche. Ajouter 25 ml d’acide chlorhydrique (5.4). Agiter jusqu’à ce que la
suspension soit homogène, puis ajouter 25 ml d’acide chlorhydrique (5.4).
9.2.2 Compenser la consommation d’acide de la prise d’essai (voir 9.1) en ajoutant de l’acide chlorhydrique
d’une concentration appropriée pour que le volume du contenu de la fiole ne varie pas de plus de 1 ml.
EXEMPLE Si 5,0 ml d’acide chlorhydrique à 0,1 mol/l est utilisé en 9.1.2 pour la compensation d’un échantillon riche
en carbonate de calcium, la consommation d’acide de la prise d’essai est de 0,5 mmol (9.1.3). Dans ce cas, ajouter 0,5 ml
d’acide chlorhydrique à 1,0 mol/l en 9.2.2.
ATTENTION — Si la concentration d’acide chlorhydrique dans la suspension s’écarte de 0,31 mol/l,
une teneur en amidon erronée sera déterminée. Une concentration d’acide chlorhydrique trop élevée
ou trop faible conduira respectivement à des valeurs trop faibles ou trop élevées de la teneur en
amidon déterminée.
9.2.3 Immerger la fiole dans le bain d’eau bouillante (6.3). Pendant les trois première
...
Questions, Comments and Discussion
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