ISO 11053:2009
(Main)Vegetable fats and oils — Determination of cocoa butter equivalents in milk chocolate
Vegetable fats and oils — Determination of cocoa butter equivalents in milk chocolate
ISO 11053:2009 specifies a procedure for the detection and quantification of cocoa butter equivalents (CBEs) and milk fat in milk chocolate by triacylglycerol profiling using high-resolution capillary gas-liquid chromatography, and subsequent data evaluation by simple and partial least-squares regression analysis. CBE admixtures can be detected at a minimum level of 0,5 g CBE/100 g milk chocolate and quantified at a level of 5 % mass fraction CBE addition to milk chocolate with a predicted error of 0,7 g CBE/100 g milk chocolate.
Corps gras d'origine végétale — Détermination des équivalents au beurre de cacao dans le chocolat au lait
L'ISO 11053:2009 spécifie une méthode de détection et de quantification des équivalents au beurre de cacao (EBC) et matière grasse du lait dans le chocolat au lait par établissement de profils de triacylglycérols en utilisant la chromatographie gaz-liquide sur colonne capillaire haute résolution ainsi que les évaluations subséquentes des données par analyse de régression simple ou partielle des moindres carrés. Les adjuvants d'EBC peuvent être détectés à un niveau minimal de 0,5 g d'EBC/100 g de chocolat au lait et évalués quantitativement à un niveau d'ajout de 5 % en fraction massique d'EBC au chocolat au lait, avec une erreur prévue de 0,7 g d'EBC/100 g de chocolat au lait.
General Information
Buy Standard
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 11053
First edition
2009-09-01
Vegetable fats and oils — Determination
of cocoa butter equivalents in milk
chocolate
Corps gras d'origine végétale — Détermination des équivalents au
beurre de cacao dans le chocolat au lait
Reference number
©
ISO 2009
PDF disclaimer
This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but
shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In
downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. The ISO Central Secretariat
accepts no liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.
Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation
parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies. In
the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.
© ISO 2009
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or
ISO's member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2009 – All rights reserved
Contents Page
Foreword. iv
1 Scope . 1
2 Terms and definitions. 1
3 Principle. 1
4 Reagents, solutions and standards . 2
5 Apparatus and equipment . 3
6 Sampling. 4
7 Sample preparation . 4
7.1 Preparation of IRMM-801 for calibration purposes and system suitability tests. 4
7.2 Preparation of pure milk fat for system suitability tests . 4
7.3 Preparation of chocolate sample . 5
8 Procedure . 6
8.1 Construction of calibration curve for determination of PSB content . 6
8.2 Separation of individual TAGs of IRMM-801 by HR-GLC. 7
8.3 Separation of individual TAGs of pure MF by HR-GLC. 7
8.4 Separation of individual TAGs of chocolate fat by HR-GLC . 7
8.5 Identification. 8
9 Calculation. 8
9.1 PSB and MF quantification in chocolate fat and chocolate . 8
9.2 CBE detection in chocolate fat. 9
9.3 CBE quantification in chocolate fat and chocolate. 11
10 Procedural requirements . 13
10.1 General considerations. 13
10.2 System suitability . 13
11 Precision. 13
11.1 Interlaboratory test . 13
11.2 Repeatability. 13
11.3 Reproducibility. 14
12 Test report . 14
Annex A (informative) Results of interlaboratory test. 15
Annex B (informative) Example chromatograms . 19
Bibliography . 22
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 11053 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 11, Animal
and vegetable fats and oils.
iv © ISO 2009 – All rights reserved
INTERNATIONAL STANDARD ISO 11053:2009(E)
Vegetable fats and oils — Determination of cocoa butter
equivalents in milk chocolate
1 Scope
This International Standard specifies a procedure for the detection and quantification of cocoa butter
equivalents (CBEs) and milk fat (MF) in milk chocolate by triacylglycerol (TAG) profiling using high-resolution
capillary gas-liquid chromatography (HR-GLC), and subsequent data evaluation by simple and partial least-
squares regression analysis. CBE admixtures can be detected at a minimum level of 0,5 g CBE/100 g milk
chocolate and quantified at a level of 5 % mass fraction CBE addition to milk chocolate with a predicted error
of 0,7 g CBE/100 g milk chocolate.
2 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
2.1
milk fat content of milk chocolate
mass fraction of milk fat in milk chocolate determined by the procedure specified in this International Standard
NOTE The mass fraction is expressed in grams per 100 g of milk chocolate.
2.2
cocoa butter equivalents
non-cocoa vegetable oils and fats detected in milk chocolate in accordance with the procedure prescribed in
this International Standard
NOTE The result is expressed qualitatively, i.e. CBEs present/CBEs not present (YES/NO).
2.3
cocoa butter equivalent content of milk chocolate
mass fraction of substances determined by the procedure specified in this International Standard
NOTE The mass fraction is expressed in grams per 100 g of milk chocolate.
3 Principle
Test samples, i.e. chocolate fats obtained from milk chocolate using a rapid fat extraction procedure, are
separated by HR-GLC into TAG fractions according to their relative molecular mass and degree of
unsaturation. Individual TAG fractions, i.e. 1-palmitoyl-2-stearoyl-3-butyroyl-glycerol (PSB), 1,3-dipalmitoyl-
2-oleoyl-glycerol (POP), 1-palmitoyl-2-oleoyl-3-stearoyl-glycerol (POS), 1-palmitoyl-2,3-dioleoyl-glycerol
(POO), 1,3-distearoyl-2-oleoyl-glycerol (SOS), and 1-stearoyl-2,3-dioleoyl-glycerol (SOO) are used:
a) to calculate the MF content in the chocolate fat (grams of MF per 100 g chocolate fat);
b) to determine the presence/absence of CBEs in chocolate fat using a simple linear regression model
based on the three TAGs, POP, POS, and SOS, corrected for the TAG contribution originating from MF,
and if this procedure indicates that the sample is not pure cocoa butter (CB);
c) to quantify the amount of the CBE admixture in chocolate fat (grams of CBE per 100 g chocolate fat)
using a partial least-squares (PLS) regression model with six input variables, i.e. the five TAGs, POP,
POS, POO, SOS, and SOO, normalized to 100 % and the determined MF content of the chocolate fat.
To ensure the correct labelling of milk chocolate, the results obtained relating to chocolate fat are converted
into grams of MF per 100 g chocolate and grams of CBE per 100 g chocolate, necessitating the accurate
determination of the total fat content of the chocolate using a Soxhlet extraction procedure (based on AOAC
[5]
Official Method 963.15 ). When the detection procedure proves the absence of CBEs in the chocolate fat, the
quantification and total fat content are not necessary.
4 Reagents, solutions and standards
NOTE Use only reagents of recognized analytical grade, unless otherwise specified.
WARNING — Attention is drawn to the regulations which specify the handling of dangerous matter.
Technical, organizational and personal safety measures should be followed.
1)
4.1 Cocoa butter Certified Reference Material (IRMM-801) (see Reference [6]), for calibration purposes
and system suitability tests.
4.2 Pure milk fat, for system suitability tests.
2)
4.3 1-Palmitoyl-2-stearoyl-3-butyroyl-glycerol (PSB) .
4.3.1 General
For calibration purposes, dissolve ~40 mg of PSB in a 50 ml volumetric flask (5.9) with isooctane resulting in a
stock solution of ~ρ = 0,8 mg/ml. Mix thoroughly until complete dissolution.
From this PSB stock solution prepare a series of five calibration solutions in matrix (IRMM-801) by weighing
on an analytical balance (5.1) IRMM-801 (4.1) into 25 ml volumetric flasks (5.9) and adding the respective
volumes of the PSB stock solution as given in Table 1. Make up to the mark with isooctane.
Table 1 — Masses of IRMM-801 and volumes of PSB stock solution
for preparation of series of PSB calibration solutions in matrix
Concentration of
Final IRMM-PSB
PSB in
IRMM-801 (4.1) weighed Volume taken from PSB stock
concentration of
Calibration
calibration
into 25 ml solution and added to 25 ml
solution
solution
solution
volumetric flask volumetric flask
ρ
IRMM-PSB
ρ i
PSB
mg ml mg/ml mg/ml
1 ~250 4 0,128 ~10
2 ~250 3 0,096 ~10
3 ~250 2 0,064 ~10
4 ~250 1 0,032 ~10
5 ~250 0,5 0,016 ~10
1) Commercially available from the Institute for Reference Materials and Measurements (http://irmm.jrc.ec.europa.eu/),
Belgium. This information is given for the convenience of users of this International Standard and does not constitute an
endorsement by ISO of this product.
2) Commercially available from Larodan (http://www.larodan.se/), Sweden. This information is given for the convenience
of users of this International Standard and does not constitute an endorsement by ISO of the product named. Equivalent
products may be used if they can be shown to lead to the same results.
2 © ISO 2009 – All rights reserved
4.3.2 Cold on-column (OCI) injection
Dilute each calibration solution with isooctane, ϕ = 1 ml/5 ml, to obtain a final IRMM-PSB concentration
(ρ ) of ~2 mg/ml in each solution and PSB concentrations (ρ ) ranging from 0,025 6 mg/ml
IRMM-PSB PSB
(calibration solution 1) to 0,003 2 mg/ml (calibration solution 5).
4.3.3 Split injection (e.g. split ratio of 1:10)
Dilute each calibration solution with isooctane, ϕ = 1 ml/2 ml, to obtain a final IRMM-PSB concentration
(ρ ) of ~5 mg/ml in each solution and PSB concentrations (ρ ) ranging from 0,064 mg/ml
IRMM-PSB PSB
(calibration solution 1) to 0,008 mg/ml (calibration solution 5).
NOTE The final PSB concentrations shall be calculated using the actual mass in the stock standard solution.
3)
4.4 α-Cholestane , ρ = 100 mg/100 ml, used as internal standard.
Dissolve ~50 mg α-cholestane in 50 ml of isooctane.
⎯ For cold on-column injection: Dilute 1:250 (ρ = 0,004 mg/ml).
⎯ For split injection (e.g. split ratio of 1:10): Dilute 1:100 (ρ = 0,01 mg/ml).
4.5 Fat s
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 11053
Première édition
2009-09-01
Corps gras d'origine végétale —
Détermination des équivalents au beurre
de cacao dans le chocolat au lait
Vegetable fats and oils — Determination of cocoa butter equivalents in
milk chocolate
Numéro de référence
©
ISO 2009
PDF – Exonération de responsabilité
Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier
peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
autorisant l'utilisation de ces polices et que celles-ci y soient installées. Lors du téléchargement de ce fichier, les parties concernées
acceptent de fait la responsabilité de ne pas enfreindre les conditions de licence d'Adobe. Le Secrétariat central de l'ISO décline toute
responsabilité en la matière.
Adobe est une marque déposée d'Adobe Systems Incorporated.
Les détails relatifs aux produits logiciels utilisés pour la création du présent fichier PDF sont disponibles dans la rubrique General Info
du fichier; les paramètres de création PDF ont été optimisés pour l'impression. Toutes les mesures ont été prises pour garantir
l'exploitation de ce fichier par les comités membres de l'ISO. Dans le cas peu probable où surviendrait un problème d'utilisation,
veuillez en informer le Secrétariat central à l'adresse donnée ci-dessous.
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2009
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
de l'ISO à l'adresse ci-après ou du comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2009 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos. iv
1 Domaine d'application. 1
2 Termes et définitions. 1
3 Principe. 1
4 Réactifs, solutions et étalons . 2
5 Appareillage et équipement. 3
6 Échantillonnage . 5
7 Préparation de l'échantillon. 5
7.1 Préparation de l'IRMM-801 pour les besoins d'étalonnage et les essais d'aptitude du
système. 5
7.2 Préparation de la matière grasse pure du lait pour les essais d'aptitude du système . 5
7.3 Préparation de l'échantillon de chocolat. 5
8 Mode opératoire . 6
8.1 Construction de la courbe d'étalonnage pour la détermination de la teneur en PSB . 6
8.2 Séparation des TAG individuels de l'IRMM-801 par CGL-HR. 7
8.3 Séparation des TAG individuels de MGL pure par CGL-HR. 8
8.4 Séparation des TAG individuels de la matière grasse du chocolat par CGL-HR. 8
8.5 Identification. 8
9 Calcul . 9
9.1 Quantification de PSB et MGL dans la matière grasse du chocolat et le chocolat . 9
9.2 Détection d'EBC dans la matière grasse du chocolat. 10
9.3 Quantification des EBC dans la matière grasse du chocolat et dans le chocolat. 12
10 Exigences de la méthode. 14
10.1 Considérations générales. 14
10.2 Aptitude à l'emploi du système. 14
11 Fidélité . 15
11.1 Essai interlaboratoires . 15
11.2 Répétabilité. 15
11.3 Reproductibilité. 15
12 Rapport d'essai . 15
Annexe A (informative) Résultats de l'essai interlaboratoires . 16
Annexe B (informative) Exemple de chromatogrammes. 20
Bibliographie . 23
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 11053 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 11,
Corps gras d'origines animale et végétale.
iv © ISO 2009 – Tous droits réservés
NORME INTERNATIONALE ISO 11053:2009(F)
Corps gras d'origine végétale — Détermination des équivalents
au beurre de cacao dans le chocolat au lait
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale spécifie une méthode de détection et de quantification des équivalents au
beurre de cacao (EBC) et matière grasse du lait (MGL) dans le chocolat au lait par établissement de profils de
triacylglycérols (TAG) en utilisant la chromatographie gaz-liquide sur colonne capillaire haute résolution
(CGL-HR) ainsi que les évaluations subséquentes des données par analyse de régression simple ou partielle
des moindres carrés. Les adjuvants d'EBC peuvent être détectés à un niveau minimal de 0,5 g d'EBC/100 g
de chocolat au lait et évalués quantitativement à un niveau d’ajout de 5 % en fraction massique d'EBC au
chocolat au lait, avec une erreur prévue de 0,7 g d'EBC/100 g de chocolat au lait.
2 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
2.1
teneur en matière grasse du lait dans le chocolat au lait
fraction massique de matière grasse du lait dans le chocolat au lait, déterminée par la méthode spécifiée dans
la présente Norme internationale
NOTE La fraction massique est exprimée en grammes par 100 g de chocolat au lait.
2.2
équivalents au beurre de cacao
EBC
corps gras d'origine végétale, autres que le cacao, détectés dans le chocolat au lait conformément à la
méthode spécifiée dans la présente Norme internationale
NOTE Le résultat est exprimé en terme qualitatif, c'est-à-dire EBC présents/EBC absents (OUI/NON).
2.3
teneur en équivalents au beurre de cacao du chocolat au lait
fraction massique des substances déterminée par la méthode spécifiée dans la présente Norme internationale
NOTE La fraction massique est exprimée en grammes par 100 g de chocolat au lait.
3 Principe
Les échantillons pour essai, c'est-à-dire la matière grasse du chocolat obtenue à partir du chocolat au lait en
utilisant une méthode d'extraction rapide de matière grasse, sont séparés par CGL-HR en fractions de TAG
selon leur masse moléculaire et leur degré d'insaturation. Les fractions individuelles de TAG,
c'est-à-dire 1-palmityl-2-stéaryl-3-butyrylglycérol (PSB), 1,3-dipalmityl-2-oléylglycérol (POP),
1-palmityl-2-oléyl-3-stéarylglycérol (POS), 1-palmityl-2,3-dioléylglycérol (POO), 1,3-distéaryl-2-oléylglycérol
(SOS) et 1-stéaryl-2,3-dioléylglycérol (SOO), sont utilisées:
a) pour calculer la teneur en MGL dans la matière grasse du chocolat (grammes de MGL par 100 g de
matière grasse du chocolat);
b) pour déterminer la présence/l'absence d'EBC dans la matière grasse du chocolat en utilisant un modèle
de régression linéaire simple fondé sur les trois TAG: POP, POS et SOS corrigées pour la contribution du
TAG provenant de la MGL, et si cette méthode indique que l'échantillon n'est pas du beurre de cacao
pur (BC);
c) pour quantifier la quantité d'adjuvant d'EBC dans la matière grasse du chocolat (grammes d'EBC par
100 g de matière grasse du chocolat) en utilisant un modèle de régression partielle des moindres carrés
à six variables d'entrée, c'est-à-dire les cinq TAG: POP, POS, POO, SOS et SOO normalisés à 100 % et
la teneur en MGL déterminée de la matière grasse du chocolat.
Afin de garantir l'étiquetage correct du chocolat au lait, les résultats obtenus pour la matière grasse du
chocolat sont convertis en grammes de MGL par 100 g de chocolat et grammes d'EBC par 100 g de chocolat,
ce qui nécessite la détermination exacte de la teneur totale en matière grasse du chocolat en utilisant une
[5]
méthode d'extraction de Soxhlet (fondée sur la méthode officielle 963.15 de l'AOAC ). Lorsque la méthode
de détection montre l'absence d'EBC dans la matière grasse du chocolat, la quantification et la teneur totale
en matière grasse ne sont pas nécessaires.
4 Réactifs, solutions et étalons
Sauf spécification contraire, utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique reconnue.
AVERTISSEMENT — L'attention est attirée sur les réglementations traitant de la manipulation des
substances dangereuses. Il convient de suivre les mesures de sécurité d'ordre technique,
organisationnel et personnel.
1)
4.1 Matériau de Référence Certifié du beurre de cacao (IRMM-801) (voir Référence [6]), pour les
besoins d'étalonnage et les essais d'aptitude du système.
4.2 Matière grasse du lait pure, pour les essais d'aptitude du système.
2)
4.3 1-palmityl-2-stéaryl-3-butyrylglycérol (PSB) .
4.3.1 Généralités
Pour les besoins d'étalonnage, dissoudre environ 40 mg de PSB dans une fiole jaugée de 50 ml (5.9) avec de
l'isooctane pour obtenir une solution mère d'environ ρ = 0,8 mg/ml. Mélanger soigneusement jusqu'à
dissolution complète.
À partir de cette solution mère de PSB, préparer une série de cinq solutions étalons dans la matrice
(IRMM-801) en pesant, sur une balance analytique (5.1) l'IRMM-801 (4.1) dans des fioles jaugées de 25 ml
(5.9) et en ajoutant les volumes respectifs de la solution mère de PSB comme indiqué dans le Tableau 1.
Compléter jusqu'au repère avec de l'isooctane.
1) Disponible auprès de l'Institut des matériaux de référence et des mesures (http://irmm.jrc.ec.europa.eu/), Belgique.
Cette information est donnée à l'intention des utilisateurs de la présente Norme internationale et ne signifie nullement que
l'ISO approuve ou recommande l'emploi exclusif de ce produit.
2) Disponible auprès de Larodan (http://www.larodan.se/), Suède. Cette information est donnée à l'intention des
utilisateurs de la présente Norme internationale et ne signifie nullement que l'ISO approuve ou recommande l'emploi
exclusif du produit ainsi désigné. Des produits équivalents peuvent être utilisés s'il est démontré qu'ils conduisent aux
mêmes résultats.
2 © ISO 2009 – Tous droits réservés
Tableau 1 — Masses d'IRMM-801 et volumes de solution mère de PSB pour la préparation
de la série des solutions étalons de PSB dans la matrice
Concentration
Concentration de
finale en
IRMM-801 (4.1) pesé Volume prélevé
...
МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 11053
Первое издание
2009-09-01
Растительные жиры и масла.
Определение эквивалентов масла
какао в молочном шоколаде
Vegetable fats and oils — Determination of cocoa butter equivalents in
milk chocolate
Ответственность за подготовку русской версии несёт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава ISO
Ссылочный номер
©
ISO 2009
Отказ от ответственности при работе в PDF
Настоящий файл PDF может содержать интегрированные шрифты. В соответствии с условиями лицензирования, принятыми
фирмой Adobe, этот файл можно распечатать или вывести на экран, но его нельзя изменить, пока не будет получена
лицензия на загрузку интегрированных шрифтов в компьютер, на котором ведется редактирование. В случае загрузки
настоящего файла заинтересованные стороны принимают на себя ответственность за соблюдение лицензионных условий
фирмы Adobe. Центральный секретариат ISO не несет никакой ответственности в этом отношении.
Adobe торговый знак фирмы Adobe Systems Incorporated.
Подробности, относящиеся к программным продуктам, использованным для создания настоящего файла PDF, можно найти в
рубрике General info файла; параметры создания PDF были оптимизированы для печати. Были приняты во внимание все
меры предосторожности с тем, чтобы обеспечить пригодность настоящего файла для использования комитетами-членами
ISO. В редких случаях возникновения проблемы, связанной со сказанным выше, просьба проинформировать Центральный
секретариат по адресу, приведенному ниже.
ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ
© ISO 2009
Все права сохраняются. Если не указано иное, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия ISO по соответствующему адресу, указанному ниже, или комитета-члена ISO в стране
заявителя.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO 2009 – Все права сохраняются
Содержание Страница
Предисловие .iv
1 Область применения .1
2 Термины и определения .1
3 Сущность метода.1
4 Реактивы, растворы и эталоны.2
5 Аппаратура и оборудование .4
6 Отбор проб.5
7 Приготовление образцов.5
7.1 Приготовление IRMM-801 для калибровки и проверки пригодности системы.5
7.2 Приготовление чистого молочного жира для проверки пригодности системы.5
7.3 Приготовление образца шоколада .5
8 Процедура.7
8.1 Построение калибровочной кривой для определения содержания PSB .7
8.2 Разделение отдельных TAGs в IRMM-801 методом HR-GLC.8
8.3 Разделение отдельных TAGs чистого MF методом HR-GLC .8
8.4 Разделение отдельных TAGs шоколадного жира методом HR-GLC.8
8.5 Идентификация.9
9 Вычисление.9
9.1 Количественное определение PSB и MF в шоколадном жире и шоколаде .9
9.2 Обнаружение CBE в шоколадном жире .11
9.3 Количественное определение CBE в шоколадном жире и шоколаде .13
10 Процедурные требования .14
10.1 Общие рассуждения.14
10.2 Пригодность системы .14
11 Прецизионность.15
11.1 Межлабораторное испытание.15
11.2 Повторяемость .15
11.3 Воспроизводимость .15
12 Протокол испытания.16
Приложение А (информативное) Результаты межлабораторного испытания .17
Приложение В (информативное) Пример хроматограмм.21
Библиография.24
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией национальных
организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных стандартов
обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член, заинтересованный в
деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть представленным в этом
комитете. Международные правительственные и неправительственные организации, имеющие связи с
ISO, также принимают участие в работах. ISO осуществляет тесное сотрудничество с международной
электротехнической комиссией (IEC) по всем вопросам стандартизации в области электротехники.
Проекты международных стандартов разрабатываются по правилам, указанным в Директивах ISO/IEC,
Часть 2.
Главная задача технических комитетов состоит в разработке международных стандартов. Проекты
международных стандартов, принятые техническими комитетами, рассылаются комитетам-членам на
голосование. Их опубликование в качестве международных стандартов требует одобрения, по
меньшей мере, 75 % комитетов-членов, принимающих участие в голосовании.
Обращается внимание на возможность патентования некоторых элементов данного международного
стандарта. ISO не несет ответственности за идентификацию какого-либо или всех таких патентных
прав.
ISO 11053 подготовлен Техническим комитетом ISO/TC 34, Пищевые продукты, Подкомитетом SC 11,
Жиры и масла животные и растительные.
iv © ISO 2009 – Все права сохраняются
МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ ISO 11053:2009(R)
Растительные жиры и масла. Определение эквивалентов
масла какао в молочном шоколаде
1 Область применения
Настоящий международный стандарт устанавливает метод для обнаружения и количественного
определения эквивалентов масла какао (CBEs) и молочного жира (MF) в молочном шоколаде
посредством анализа профиля триацилглицеролов (TAG) с использованием высокоэффективной
капиллярной газожидкостной хроматографии (HR-GLC) и последующей оценки данных на основе
анализа регрессии простых и частных наименьших квадратов. Примеси CBE могут быть обнаружены
при минимальном уровне 0,5 г CBE/100 г молочного шоколада и определены количественно при
уровне 5 % массовой доли добавки CBE к молочному шоколаду с прогнозируемой погрешностью 0,7 г
CBE/100 г молочного шоколада.
2 Термины и определения
Применительно к этому документу используются следующие термины и определения.
2.1
содержание молочного жира в молочном шоколаде
milk fat content of milk chocolate
массовая доля молочного жира в молочном шоколаде, определенная методом, установленным в
настоящем международном стандарте
ПРИМЕЧАНИЕ Массовая доля выражена в граммах на 100 г молочного шоколада.
2.2
эквиваленты масла какао
cocoa butter equivalents
растительные жиры и масла не какао, обнаруживаемые в молочном шоколаде методом, описанным в
этом международном стандарте
ПРИМЕЧАНИЕ Результат выражен качественно, т.е. CBEs присутствуют/CBEs не присутствуют (ДА/НЕТ).
2.3
содержание эквивалентов масла какао в молочном шоколаде
cocoa butter equivalent content of milk chocolate
массовая доля веществ, определенная методом, установленным в этом международном стандарте
ПРИМЕЧАНИЕ Массовая доля выражена в граммах на 100 г молочного шоколада.
3 Сущность метода
Испытательные образцы, т.е. шоколадные жиры, полученные из молочного шоколада методом
быстрого экстрагирования жира, разделяют посредством HR-GLC на фракции TAG в соответствии с их
молекулярной массой и степенью ненасыщенности. Отдельные фракции TAG, i.e. 1-пальмитоил-2-
стеароил-3-бутироил-глицерол (PSB), 1,3-дипальмитоил-2-олеоил-глицерол (POP), 1-пальмитоил-2-
олеоилl-3-стеароил-глицерол (POS), 1-пальмитоил-2,3-диолеоил-глицерол (POO), 1,3-дистеароил-2-
олеоил-глицерол (SOS) и 1-стеароилl-2,3-диолеоилl-глицерол (SOO), используются, чтобы:
a) вычислить содержание MF в шоколадном жире (граммы MF на 100 г шоколадного жира);
b) определить присутствие/отсутствие CBEs в шоколадном жире, используя модель простой
линейной регрессии на основе трех TAGs, POP, POS, и SOS, с поправкой на вклад TAG,
обусловленный MF, и установить, показывает ли данный метод, что образец не является чистым
маслом какао (CB);
c) определить количество примеси CBE в шоколадном жире (граммы CBE на 100 г шоколадного
жира), используя модель регрессии частных наименьших квадратов (PLS) с шестью входными
переменными, т.е. с пятью TAGs, POP, POS, POO, SOS и SOO, нормированными к 100 %, и
определенным содержанием MF в шоколадном жире.
Чтобы обеспечить правильное этикетирование молочного шоколада, результаты, полученные для
шоколадного жира, преобразуют в граммы MF на 100 г шоколада и граммы CBE на 100 г шоколада,
для чего требуется точное определение общего содержания жира в шоколаде методом
[5]
экстрагирования Сокслета (на основе официального метода AOAC 963.15 ). Если метод обнаружения
подтверждает отсутствие CBEs в шоколадном жире, то нет необходимости в количественном
определении общего содержания жира.
4 Реактивы, растворы и эталоны
ПРИМЕЧАНИЕ Используются реактивы только признанного аналитического класса, если нет других указаний.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ — Имеется регламент для работы с опасными веществами. Должны
соблюдаться меры технической, организационной и индивидуальной безопасности.
1)
4.1 Аттестованный стандартный образец (IRMM-801) масла какао (см. Ссылку [6]) о калибровке
и проверке пригодности системы.
4.2 Чистый молочный жир, для проверки пригодности системы.
2)
4.3 1-Пальмитоил-2-стеароил-3-бутироил-глицерол (PSB) .
4.3.1 Общие положения
Для целей калибровки растворяют ~40 мг PSB в мерной колбе вместимостью 50 мл (5.9) с изооктаном,
получая исходный раствор ~ρ = 0,8 мг/мл. Тщательно перемешивают до полного растворения.
Из исходного раствора PSB готовят серию из пяти калибровочных растворов в пределах матрицы
(IRMM-801), отвешивая на аналитических весах (5.1) IRMM-801 (4.1) в мерные колбы вместимостью
25 мл (5.9) и добавляя соответствующие объемы исходного раствора PSB, как представлено в
Таблице 1. Дополняют до метки изооктаном.
1) Доступно для приобретения в Институте стандартных образцов и измерений (http://irmm.jrc.ec.europa.eu/),
Бельгия. Эта информация дается для удобства пользователей настоящего международного стандарта и не
является поддержкой этого продукта со стороны ISO.
2) Доступно для приобретения в Лародане (http://www.larodan.se/), Швеция. Эта информация дается для
удобства пользователей настоящего международного стандарта и не является поддержкой этого продукта со
стороны ISO. Можно использовать аналогичные продукты, если есть данные, что они дают такие же результаты.
2 © ISO 2009 – Все права сохраняются
Таблица 1 — Массы IRMM-801 и объемы исходного раствора PSB
для приготовления серии калибровочных растворов PSB в пределах матрицы
Концентрация Окончательная
IRMM-801 (4.1),
Объем, взятый из
PSB в концентрация
отвешенный в
Калибровочный исходного раствора PSB и
калибровочном IRMM-PSB в
мерную колбу
раствор добавленный в мерную
растворе растворе
вместимостью 25 мл
колбу вместимостью 25 мл
ρ i ρ
PSB IRMM-PSB
мг мл мг/мл мг/мл
1 ~250 4 0,128 ~10
2 ~250 3 0,096 ~10
3 ~250 2 0,064 ~10
4 ~250 1 0,032 ~10
5 ~250 0,5 0,016 ~10
4.3.2 Холодная инжекция на колонке (OCI)
Разбавляют каждый калибровочный раствор изооктаном, ϕ = 1 мл/5 мл, чтобы получить окончательную
концентрацию IRMM-PSB (ρ ) ~2 мг/мл в каждом растворе и концентрации PSB (ρ ) в
IRMM-PSB PSB
диапазоне от 0,025 6 мг/мл (калибровочный раствор 1) до 0,003 2 мг/мл (калибровочный раствор 5).
4.3.3 Инжекция с делением потока (например, отношение деления 1:10)
Разбавляют каждый калибровочный раствор изооктаном, ϕ = 1 мл/2 мл, чтобы получить окончательную
концентрацию IRMM-PSB (ρ ) ~5 мг/мл в каждом растворе и концентрации PSB (ρ ) в
IRMM-PSB PSB
диапазоне от 0,064 мг/мл (калибровочный раствор 1) до 0,008 мг/мл (калибровочный раствор 5).
ПРИМЕЧАНИЕ Окончате
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.