ISO 16140-4:2020/Amd 1:2024
(Amendment)Microbiology of the food chain — Method validation — Part 4: Protocol for method validation in a single laboratory — Amendment 1: Validation of a larger test portion size for qualitative methods
Microbiology of the food chain — Method validation — Part 4: Protocol for method validation in a single laboratory — Amendment 1: Validation of a larger test portion size for qualitative methods
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Validation des méthodes — Partie 4: Protocole pour la validation de méthodes dans un seul laboratoire — Amendement 1: Validation d’une taille de prise d’essai plus grande pour des méthodes qualitatives
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ISO 16140-4
First edition
Microbiology of the food chain —
2020-07
Method validation —
AMENDMENT 1
Part 4:
2024-09
Protocol for method validation in a
single laboratory
AMENDMENT 1: Validation of a larger
test portion size for qualitative methods
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Validation des
méthodes —
Partie 4: Protocole pour la validation de méthodes dans un seul
laboratoire
AMENDEMENT 1: Validation d’une taille de prise d’essai plus
grande pour des méthodes qualitatives
Reference number
ISO 16140-4:2020/Amd.1:2024(en) © ISO 2024
ISO 16140-4:2020/Amd.1:2024(en)
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Published in Switzerland
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ISO 16140-4:2020/Amd.1:2024(en)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee
has been established has the right to be represented on that committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely
with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are described
in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the different types
of ISO document should be noted. This document was drafted in accordance with the editorial rules of the
ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
ISO draws attention to the possibility that the implementation of this document may involve the use of (a)
patent(s). ISO takes no position concerning the evidence, validity or applicability of any claimed patent
rights in respect thereof. As of the date of publication of this document, ISO had not received notice of (a)
patent(s) which may be required to implement this document. However, implementers are cautioned that
this may not represent the latest information, which may be obtained from the patent database available at
www.iso.org/patents. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and expressions
related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to the World Trade
Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9,
Microbiology, in collaboration with the European Committee for Standardization (CEN) Technical Committee
CEN/TC 463, Microbiology of the food chain, in accordance with the Agreement on technical cooperation
between ISO and CEN (Vienna Agreement).
A list of all parts in the ISO 16140 series can be found on the ISO website.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.
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ISO 16140-4:2020/Amd.1:2024(en)
Microbiology of the food chain — Method validation —
Part 4:
Protocol for method validation in a single laboratory
AMENDMENT 1: Validation of a larger test portion size for
qualitative methods
Clause 3
Add the following terminological entry:
3.13
larger test portion size
measured (volume or mass) representative sample taken from the laboratory sample or test sample for use
in the preparation of the initial suspension that is larger than the test portion that has been described in the
original method and/or validation document
4.1
Add the following text after the second paragraph:
The protocol used to validate a larger test portion size for qualitative methods in a single laboratory shall be
as given in Annex H.
5.1.1.4, note
Replace the text with the following:
NOTE An Excel®-based program is available for performing the RLOD calculations from https:// standards .iso
.org/ iso/ 16140/ -4/ ed -1/ en/ amd/ 1/ .
5.1.2.4, Note 2
Replace the text with the following:
NOTE 2 An Excel®-based program is available for performing the LOD calculations from https:// standards .iso
.org/ iso/ 16140/ -4/ ed -1/ en/ amd/ 1/ .
6.1.2.3, Note 2
Replace the text with the following:
NOTE 2 An Excel®-based program is available for performing the LOD calculations from https:// standards .iso
.org/ iso/ 16140/ -4/ ed -1/ en/ amd/ 1/ .
ISO 16140-4:2020/Amd.1:2024(en)
Annex H
Add the following annex after Annex G, before the Bibliography.
ISO 16140-4:2020/Amd.1:2024(en)
Annex H
(normative)
Validation of a larger test portion size for qualitative methods
H.1 General
This annex specifies a protocol for the validation of qualitative methods when using a larger test portion
size. This protocol is intended to demonstrate the effect of analysing a test portion larger than the test
portion initially used to validate the method. Validation of the larger test portion size applies only to the
laboratory conducting the study and only to the specific (food) category used.
Qualitative reference methods which were validated using a larger test portion size in accordance with
ISO 17468 and qualitative alternative (proprietary) methods which were validated using a larger test
portion size in accordance with ISO 16140-2 only need to be verified by a laboratory following ISO 16140-3.
The larger test portion size can be used in other laboratories once this has been validated in a study in
accordance with ISO 16140-2 or ISO 16140-5. See the flow diagram in Figure 1. Once validated in such a
study, any laboratory can implement the larger test portion size after verification following ISO 16140-3.
For the verification of a larger test portion size, the same (food) category shall be used. If not validated in
accordance with ISO 16140-2 or ISO 16140-5, validation in accordance with the protocol in this annex is
necessary for each laboratory wishing to use a larger test portion size.
Requirements with regards to pooling are specified in ISO 6887-1.
When testing a larger single test portion, pooled test portion or pooled (pre-)enrichment test portion, the
dilution ratio (sample/diluent) used in the validated method shall remain the same as well as the other
incubation conditions (e.g. time and temperature). This ratio may be increased to overcome the inhibitory
effects coming from certain food materials as those mentioned in ISO 6887-4:2017, 9.1.4.4 (e.g. onion powder,
garlic, oregano, peppers, certain teas and coffees, vitamin premixes, highly salted products).
A reduction in, for example, the dilution ratio (sample/diluent) requires a validation study (details are given
in Figure H.1).
Items can either be composited, pooled out of the laboratory or in the laboratory as a test portion or as a
(pre-)enriched test portion but not as two or more combinations [i.e. pooling of (pre-)enriched as well as
test portion is not allowed].
When a laboratory, for example, wants to pool test portions as well as (pre-)enriched test portions, two
separate validation studies shall be conducted in accordance with this protocol.
Once the larger test portion size has been validated, all test portions smaller than the largest validated test
portion can be used for routine testing for this particular (food) category at the same sample/diluent ratio.
For example, a method that has been validated for 375 g test portions can be used for 25 g, 100 g, etc., up to
375 g test portions.
The protocol is intended to demonstrate that a larger test portion size provides a similar or lower level of
detection (LOD ) compared to the LOD of the (validated) test portion size as specified in the method. The
50 50
...
Norme
internationale
ISO 16140-4
Première édition
Microbiologie de la chaîne
2020-07
alimentaire — Validation des
méthodes —
AMENDEMENT 1
2024-09
Partie 4:
Protocole pour la validation de
méthodes dans un seul laboratoire
AMENDEMENT 1: Validation d’une
taille de prise d’essai plus grande pour
des méthodes qualitatives
Microbiology of the food chain — Method validation —
Part 4: Protocol for method validation in a single laboratory
AMENDMENT 1: Validation of a larger test portion size for
qualitative methods
Numéro de référence
ISO 16140-4:2020/Amd.1:2024(fr) © ISO 2024
ISO 16140-4:2020/Amd.1:2024(fr)
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Publié en Suisse
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ISO 16140-4:2020/Amd.1:2024(fr)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a
été rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir
www.iso.org/directives).
L’ISO attire l’attention sur le fait que la mise en application du présent document peut entraîner l’utilisation
d’un ou de plusieurs brevets. L’ISO ne prend pas position quant à la preuve, à la validité et à l’applicabilité de
tout droit de brevet revendiqué à cet égard. À la date de publication du présent document, l’ISO n'avait pas
reçu notification qu’un ou plusieurs brevets pouvaient être nécessaires à sa mise en application. Toutefois,
il y a lieu d’avertir les responsables de la mise en application du présent document que des informations
plus récentes sont susceptibles de figurer dans la base de données de brevets, disponible à l'adresse
www.iso.org/brevets. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir identifié tout ou partie de
tels droits de propriété.
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données pour
information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion de
l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au
commerce (OTC), voir www.iso.org/avant-propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 9,
Microbiologie, en collaboration avec le comité technique CEN/TC 463, Microbiologie de la chaîne alimentaire,
du Comité européen de normalisation (CEN) conformément à l’Accord de coopération technique entre l’ISO
et le CEN (Accord de Vienne).
Une liste de toutes les parties de la série ISO 16140 se trouve sur le site web de l’ISO.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes se
trouve à l’adresse www.iso.org/fr/members.html.
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ISO 16140-4:2020/Amd.1:2024(fr)
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Validation des
méthodes —
Partie 4:
Protocole pour la validation de méthodes dans un seul
laboratoire
AMENDEMENT 1: Validation d’une taille de prise d’essai plus
grande pour des méthodes qualitatives
Article 3
Ajouter l’entrée terminologique suivante:
3.13
taille de prise d’essai plus grande
échantillon représentatif mesuré (volume ou masse) prélevé de l’échantillon pour laboratoire ou de
l’échantillon pour essai en vue de son utilisation dans la préparation de la suspension mère, qui est plus
grand que la prise d’essai décrite dans la méthode d’origine et/ou le document de validation
4.1
Ajouter le texte suivant après le deuxième alinéa:
Le protocole utilisé pour valider une taille de prise d’essai plus grande pour des méthodes qualitatives dans
un seul laboratoire doit être tel que spécifié à l’Annexe H.
5.1.1.4, note
Remplacer le texte par ce qui suit:
NOTE Un programme Excel® est disponible pour calculer le RLOD à l’adresse https:// standards .iso .org/ iso/
16140/ -4/ ed -1/ en/ amd/ 1/ .
5.1.2.4, Note 2
Remplacer le texte par ce qui suit:
NOTE 2 Un programme Excel® est disponible pour calculer le LOD à l’adresse https:// standards .iso .org/ iso/
16140/ -4/ ed -1/ en/ amd/ 1/ .
ISO 16140-4:2020/Amd.1:2024(fr)
6.1.2.3, Note 2
Remplacer le texte par ce qui suit:
NOTE 2 Un programme Excel® est disponible pour calculer le LOD à l’adresse https:// standards .iso .org/ iso/
16140/ -4/ ed -1/ en/ amd/ 1/ .
Annexe H
Ajouter l’annexe suivante après l’Annexe G, avant la Bibliographie.
ISO 16140-4:2020/Amd.1:2024(fr)
Annexe H
(normative)
Validation d’une taille de prise d’essai plus grande pour des
méthodes qualitatives
H.1 Généralités
Cette annexe spécifie un protocole de validation de méthodes qualitatives en cas d’utilisation d’une taille de
prise d’essai plus grande. Ce protocole vise à démontrer l’effet de l’analyse d’une prise d’essai plus grande
que celle initialement utilisée pour valider la méthode. La validation de la taille de prise d’essai plus grande
s’applique uniquement au laboratoire menant l’étude et uniquement à la catégorie (d’aliment) spécifique
utilisée.
Les méthodes de référence qualitatives qui ont été validées à l’aide d’une taille de prise d’essai plus grande
conformément à l’ISO 17468 et les méthodes alternatives qualitatives (commerciales) qui ont été validées
à l’aide d’une taille de prise d’essai plus grande conformément à l’ISO 16140-2 doivent uniquement être
vérifiées par un laboratoire respectant l’ISO 16140-3.
La taille de prise d’essai plus grande peut être utilisée dans d’autres laboratoires dès lors qu’elle a été validée
au cours d’une étude conformément à l’ISO 16140-2 ou l’ISO 16140-5. Voir le logigramme à la Figure 1. Une
fois validée lors d’une étude de ce type, tout laboratoire peut mettre en œuvre la taille de prise d’essai plus
grande après vérification conformément à l’ISO 16140-3. Pour la vérification d’une taille de prise d’essai
plus grande, la même catégorie (d’aliment) doit être utilisée. En l’absence de validation conformément à
l’ISO 16140-2 ou l’ISO 16140-5, la validation conformément au protocole de cette annexe est nécessaire pour
chaque laboratoire désireux d’utiliser une taille de prise d’essai plus grande.
Les exigences concernant le regroupement sont spécifiées dans l’ISO 6887-1.
Lorsqu’une taille de prise d’essai plus grande, une prise d’essai regroupée ou une prise d’essai (pré-)enrichie
regroupée est soumise à essai, le rapport de dilution (échantillon/diluant) utilisé dans la méthode validée
doit rester le même, tout comme les autres conditions d’incubation (par exemple durée et température).
Ce rapport peut être augmenté pour résorber les effets inhibiteurs de certains aliments tels que ceux
mentionnés dans l’ISO 6887-4:2017, 9.1.4.4 (par exemple oignon en poudre, ail, origan, poivres, certains thés
et cafés, prémélanges de vitamines, produits très salés).
Une réduction du rapport de dilution (échantillon/diluant), par exemple, requiert une étude de validation
(des informations détaillées sont données à la Figure H.1).
Les matrices peuvent être composées, regroupées hors ou en laboratoire sous la forme d’une prise d’essai ou
d’une prise d’essai (pré-)enrichie, mais pas sous la forme de deux combinaisons ou plus [cela signifie qu’il est
interdit de regrouper prises d’essai (pré-)enrichies et prises d’essai].
Par exemple, lorsqu’un laboratoire veut regrouper des prises d’essai et des prises d’essai (pré-)enrichies
regroupées, deux études de validation distinctes doivent être menées conformément au présent protocole.
Une fois que la taille de prise d’essai plus grande a été validée, toutes les prises d’essai plus petites que la plus
grande prise d’essai validée peuvent être utilisées pour les essais de routine pour cette catégorie (d’aliment)
particulière au même rapport échantillon/diluant. Par exemple, une méthode validée pour des prises d’essai
de 375 g peut être utilisée pour des prises d’essai de 25 g, 100 g, etc., jusqu’à 375 g.
Le protocole vise à démontrer qu’une taille de prise d’essai plus grande donne un niveau de détection (LOD )
inférieur ou similaire au LOD de la taille de prise d’essai (validée) spécifiée dans la méthode. L’approche
par le niveau de détection relatif (RLOD) spécifiée en 6.1.1.3 doit être utilisée. Pour calculer les données, la
...
Questions, Comments and Discussion
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