ISO 22855:2008
(Main)Fruit and vegetable products — Determination of benzoic acid and sorbic acid concentrations — High performance liquid chromatography method
Fruit and vegetable products — Determination of benzoic acid and sorbic acid concentrations — High performance liquid chromatography method
ISO 22855:2008 specifies a method using high-performance liquid chromatography for the determination of the concentration of benzoic and sorbic acids in fruit and vegetable juices.
Fruits, légumes et produits dérivés — Détermination des teneurs en acides benzoïque et sorbique — Méthode par chromatographie liquide à haute performance
General Information
Buy Standard
Standards Content (Sample)
МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 22855
Первое издание
2008-01-15
Исправленная версия
2008-04-15
Продукты плодоовощные.
Определение концентраций бензойной
и сорбиновой кислот. Метод
высокоэффективной жидкостной
хроматографии
Fruit and vegetable products — Determination of benzoic acid and
sorbic acid concentration — High performance liquid chromatography
method
Ответственность за подготовку русской версии несёт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава ISO
Ссылочный номер
ISO 22855:2008(R)
©
ISO 2008
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 22855:2008(R)
Отказ от ответственности при работе в PDF
Настоящий файл PDF может содержать интегрированные шрифты. В соответствии с условиями лицензирования, принятыми
фирмой Adobe, этот файл можно распечатать или смотреть на экране, но его нельзя изменить, пока не будет получена
лицензия на установку интегрированных шрифтов в компьютере, на котором ведется редактирование. В случае загрузки
настоящего файла заинтересованные стороны принимают на себя ответственность за соблюдение лицензионных условий
фирмы Adobe. Центральный секретариат ISO не несет никакой ответственности в этом отношении.
Adobe — торговый знак Adobe Systems Incorporated.
Подробности, относящиеся к программным продуктам, использованным для создания настоящего файла PDF, можно найти в
рубрике General Info файла; параметры создания PDF оптимизированы для печати. Были приняты во внимание все меры
предосторожности с тем, чтобы обеспечить пригодность настоящего файла для использования комитетами – членами ISO. В
редких случаях возникновения проблемы, связанной со сказанным выше, просим информировать Центральный секретариат
по адресу, приведенному ниже.
ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ
© ISO 2008
Все права сохраняются. Если не указано иное, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия ISO по адресу ниже или членов ISO в стране регистрации пребывания.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO 2008 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 22855:2008(R)
Содержание Страница
Предисловие .iv
1 Область применения .1
2 Принцип.1
3 Реактивы и материалы.1
4 Аппаратура.2
5 Проба.2
6 Методика .2
7 Расчет .4
8 Прецизионность.4
9 Протокол испытания.6
Приложение А (информативное) Хроматограмма .7
Приложение В (информативное) Статистические результаты межлабораторного испытания.8
Библиография.10
© ISO 2008 – Все права сохраняются iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 22855:2008(R)
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией национальных
организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных стандартов
обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член ISO, заинтересованный
в деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть представленным в
этом комитете. Международные организации, правительственные и неправительственные, имеющие
связи с ISO, также принимают участие в работах. ISO непосредственно сотрудничает с
Международной электротехнической комиссией (IEC) по всем вопросам электротехнической
стандартизации.
Международные стандарты разрабатываются в соответствии с правилами, приведенными в
Директивах ISO/IEC, Часть 2.
Основная задача технических комитетов состоит в подготовке международных стандартов. Проекты
международных стандартов, одобренные техническими комитетами, рассылаются комитетам-членам
на голосование. Их опубликование в качестве международных стандартов требует одобрения, по
меньшей мере, 75 % комитетов-членов, принимающих участие в голосовании.
Следует иметь в виду, что некоторые элементы настоящего документа могут быть объектом патентных
прав. ISO не должен нести ответственность за идентификацию какого-либо одного или всех патентных
прав.
ISO 22855 разработан Техническим комитетом ISO/TC 34, Пищевые продукты, Подкомитетом SC 3,
Плодоовощные продукты.
Настоящая исправленная версия ISO 22855:2008 включает следующие поправки:
⎯ В 3.5 and 3.6 были изменены концентрации основных растворов со 100 мг/мл на 1 г/л, и тексты
были сформулированы по другому.
⎯ Был удален дефис между словами высокая и эффективная в словосочетании
“высокоэффективная жидкостная хроматография”.
iv © ISO 2008 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 4 ----------------------
МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ ISO 22855:2008(R)
Продукты плодоовощные. Определение концентраций
бензойной и сорбиновой кислот. Метод
высокоэффективной жидкостной хроматографии
1 Область применения
Настоящий международный стандарт устанавливает метод высокоэффективной жидкостной
хроматографии для определения концентраций бензойной и сорбиновой кислот в плодово-ягодных и
овощных соках.
[2]
ПРИМЕЧАНИЕ Этот метод основан на IFU method 63 .
2 Принцип
Экстрагируют бензойную и/или сорбиновую кислоты из пробы для анализа смесью буферного
раствора ацетата аммония и метанола в кислых условиях.
Концентрацию бензойной и/или сорбиновой кислот определяют с помощью высокоэффективной
жидкостной хроматографии (HPLC), используя обращенно-фазовую колонку и УФ-детектор.
3 Реактивы и материалы
Если не оговорено иначе, используют только реактивы признанной аналитической чистоты и воду
степени чистоты HPLC.
3.1 Уксусная кислота (CH COOH), ледяная.
3
3.2 Метанол (CH OH), для HPLC.
3
3.3 Ацетат аммония (CH COONH ), раствор концентрацией 0,01 моль/л.
3 4
Растворяют 0,771 г ацетата аммония в 1 л воды.
3.4 Ацетат аммония/уксусная кислота (CH COONH /CH COOH), буферный раствор.
3 4 3
Смешивают 1 000 объемных частей раствора ацетата аммония (3.3) и 1,2 объемные части уксусной
кислоты (3.1).
3.5 Бензойная кислота (C H COOH), основной раствор.
6 5
Растворяют 100 мг бензойной кислоты в 40 мл метанола (3.2) и доводят до метки водой в мерной
колбе вместимостью 100 мл для получения основного раствора концентрацией, ρ(C H COOH) = 1 г/л.
6 5
3.6 Сорбиновая кислота [CH (CH:CH) COOH], основной раствор.
3 2
Растворяют 100 мг сорбиновой кислоты в 40 мл метанола (3.2) и доводят до метки водой в мерной колбе
вместимостью 100 мл для получения основного раствора концентрацией, ρ[CH (CH:CH) COOH] = 1 г/л.
3 2
© ISO 2008 – Все права сохраняются 1
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 22855:2008(R)
3.7 Гексацианоферроат калия (II), тригидрат, K [Fe(CN) ]⋅3H O.
4 6 2
3.8 Сульфат цинка, гептагидрат, (ZnSO⋅7H O), раствор концентрацией 300 г/л.
4 2
3.9 Экстрагирующий раствор
Смешивают 60 объемных частей буферного раствора ацетата аммония/уксусной кислоты (3.4) с
40 объемными частями метанола (3.2).
3.10 Элюент для HPLC
Смешивают 50 объемных частей раствора ацетата аммония (3.4) с 40 объемными частями метанола
для HPLC (3.2) и доводят значение рН до 4,5–4,6 уксусной кислотой (3.1). Фильтруют элюент через
мембранный фильтр (4.2).
3.11 Раствор Карреза I
Растворяют 150 г гексацианоферроата (II) (3.7) в воде в мерной колбе вместимостью 1 000 мл.
Разбавляют до метки водой и перемешивают раствор.
3.12 Раствор Карреза II
Растворяют 300 г сульфата цинка (3.8) в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл. Разбавляют до
метки водой и перемешивают раствор.
3.13 Гофрированная фильтровальная бумага, плотная.
4 Аппаратура
Обычная лабораторная аппаратура и, в частности, следующая.
4.1 Ультразвуковая баня.
4.2 Мембранные фильтры, с размером пор 0,45 мкм для водных растворов (например, ацетата
целлюлозы); диаметр зависит от размера держателя фильтра.
4.3 Держатель фильтра, для мембранных фильтров с соответствующими отсосной склянкой и
приемником.
4.4 Жидкостной высокоэффективный хроматограф, оборудованный УФ-детектором (с
переменной длиной волны), регистрирующим устройством и/или интегратором либо компьютером с
соответствующей интегрирующей программой.
4.5 Обращенно-фазовая разделительная колонка, например, обращенная фаза C8,
250 мм × 4,6 мм, размер частиц 5 мкм.
5 Проба
В лабораторию следует поставлять представительную пробу. Ее не следует подвергать порче или
изменению во время транспортировки или хранения.
6 Методика
6.1 Приготовление испытуемого раствора
Тщательно гомогенизируют или перемешивают пробу.
Сгущенный сок следует разбавить до концентрации сока одинарной крепости.
2 © ISO 2008 – Все права сохраняются
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 22855:2008(R)
6.1.1 Прозрачные пробы
Разбавляют от 5,00 мл до 10,00 мл (V ) пробы приблизительно 75 мл экстрагирующего раствора (3.9) в
1
мерной колбе вместимостью 100 мл. Помещают колбу в ультразвуковую баню (4.1) и перемешивают
содержимое, по меньшей мере, в течение 10 мин, а затем разбавляют до метки экстрагирующим
раствором (3.9) при 20 °C. Фильтруют раствор через мембранный фильтр (4.2).
6.1.2 Мутные пробы
Разбавляют от 5,00 мл до 10,00 мл (V ) пробы приблизительно 75
...
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 22855
First edition
2008-01-15
Corrected version
2008-04-15
Fruit and vegetable products —
Determination of benzoic acid and sorbic
acid concentrations — High performance
liquid chromatography method
Fruits, légumes et produits dérivés — Détermination des teneurs en
acides benzoïque et sorbique — Méthode par chromatographie liquide
à haute performance
Reference number
ISO 22855:2008(E)
©
ISO 2008
---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 22855:2008(E)
PDF disclaimer
This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but
shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In
downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. The ISO Central Secretariat
accepts no liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.
Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation
parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies. In
the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.
COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
© ISO 2008
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or
ISO's member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2008 – All rights reserved
---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 22855:2008(E)
Contents Page
Foreword. iv
1 Scope. 1
2 Principle. 1
3 Reagents and materials . 1
4 Apparatus. 2
5 Sample. 2
6 Procedure. 2
7 Calculation. 4
8 Precision. 4
9 Test report. 6
Annex A (informative) Chromatogram . 7
Annex B (informative) Statistical results of the interlaboratory test . 8
Bibliography . 10
© ISO 2008 – All rights reserved iii
---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 22855:2008(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 22855 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 3, Fruit and
vegetable products.
This corrected version of ISO 22855:2008 incorporates the following corrections:
⎯ In 3.5 and 3.6, the concentrations of the stock solutions have been changed from 100 mg/ml to 1 g/l, and
the texts have been reworded.
⎯ The hyphen between high and performance in “high performance liquid chromatography” has been
removed.
iv © ISO 2008 – All rights reserved
---------------------- Page: 4 ----------------------
INTERNATIONAL STANDARD ISO 22855:2008(E)
Fruit and vegetable products — Determination of benzoic acid
and sorbic acid concentrations — High performance liquid
chromatography method
1 Scope
This International Standard specifies a method using high performance liquid chromatography for the
determination of the concentration of benzoic and sorbic acids in fruit and vegetable juices.
[2]
NOTE This method is based on IFU method 63 .
2 Principle
Extraction of benzoic acid and/or sorbic acid from a test portion using a mixture of ammonium acetate buffer
solution and methanol, under acidic conditions.
The concentration of benzoic and/or sorbic acid is determined by means of high performance liquid
chromatography (HPLC) using a reverse phase column and ultraviolet (UV) detector.
3 Reagents and materials
Use only reagents of recognized analytical grade, unless otherwise specified, and water of HPLC grade.
3.1 Acetic acid (CH COOH), glacial.
3
3.2 Methanol (CH OH), for HPLC.
3
3.3 Ammonium acetate (CH COONH ), 0,01 mol/l solution.
3 4
Dissolve 0,771 g of ammonium acetate in 1 l of water.
3.4 Ammonium acetate/acetic acid (CH COONH /CH COOH), buffer solution.
3 4 3
Mix 1 000 volume parts of ammonium acetate solution (3.3) with 1,2 volume parts of acetic acid (3.1).
3.5 Benzoic acid (C H COOH), stock solution.
6 5
Dissolve 100 mg of benzoic acid in 40 ml of methanol (3.2) and make up to the mark with water in a 100 ml
volumetric flask, to obtain the stock solution, ρ(C H COOH) = 1 g/l.
6 5
3.6 Sorbic acid [CH (CH:CH) COOH], stock solution.
3 2
Dissolve 100 mg of sorbic acid in 40 ml of methanol (3.2) and make up to the mark with water in a 100 ml
volumetric flask, to obtain the stock solution, ρ[CH (CH:CH) COOH] = 1 g/l.
3 2
3.7 Potassium hexacyanoferrate(II), trihydrate, K [Fe(CN) ]⋅3H O.
4 6 2
© ISO 2008 – All rights reserved 1
---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 22855:2008(E)
3.8 Zinc sulfate, heptahydrate, (ZnSO⋅7H O), 300 g/l solution.
4 2
3.9 Extraction solution
Mix 60 volume parts of ammonium acetate/acetic acid buffer solution (3.4) with 40 volume parts of methanol
(3.2).
3.10 Eluent for HPLC
Mix 50 volume parts of ammonium acetate solution (3.4) with 40 volume parts of methanol for HPLC (3.2) and
adjust to a pH of 4,5 to 4,6 with acetic acid (3.1). Filter the eluent over a membrane filter (4.2).
3.11 Carrez solution I
Dissolve 150 g of potassium hexacyanoferrate(II) (3.7) in water in a 1 000 ml volumetric flask. Dilute to the
mark with water and mix the solution.
3.12 Carrez solution II
Dissolve 300 g of zinc sulfate (3.8) in water in a 100 ml volumetric flask. Dilute to the mark with water and mix
the solution.
3.13 Pleated filter paper, hard.
4 Apparatus
Usual laboratory apparatus and, in particular, the following.
4.1 Ultrasonic bath.
4.2 Membrane filters, of pore size 0,45 µm, for aqueous solutions (e.g. cellulose acetate); diameter
dependent on the filter holder.
4.3 Filter holder, for membrane filters with suitable aspirating and collection vessels.
4.4 High performance liquid chromatograph, equipped with a UV-detector (variable wavelength) and
recorder and/or integrator or computer with the appropriate integrating programme.
4.5 Reverse phase separation column, e.g. reverse phase C8, 250 mm × 4,6 mm, particle size 5 µm.
5 Sample
A representative sample should have been sent to the laboratory. It should not have been damaged or
changed during transport or storage.
6 Procedure
6.1 Preparation of test solution
Homogenize or mix the sample carefully.
Concentrated juice should be diluted to single strength.
2 © ISO 2008 – All rights reserved
---------------------- Page: 6 ----------------------
ISO 22855:2008(E)
6.1.1 Clear samples
Dilute 5,00 ml to 10,00 ml (V ) of a sample in approximately 75 ml of extraction solution (3.9) in a 100 ml
1
volumetric flask. Put the flask in the ultrasonic bath (4.1), mix the contents for at least 10 min and then dilute
to the mark with extraction solution (3.9) at 20 °C. Filter the solution through a membrane filter (4.2).
6.1.2 Cloudy samples
Dil
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.