SIST ISO 11292:2003

2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.Café soluble -- Détermination des teneurs en hydrates de carbone libres et totaux -- Méthode par chromatographie d'échange d'anions à haute performanceInstant coffee -- Determination of free and total carbohydrate contents -- Method using high-performance anion-exchange chromatography67.140.20Kava in kavni nadomestkiCoffee and coffee substitutesICS:Ta slovenski standard je istoveten z:ISO 11292:1995SIST ISO 11292:2003en01-september-2003SIST ISO 11292:2003SLOVENSKI
STANDARD



SIST ISO 11292:2003



INTERNATIONAL STANDARD ISO 11292 First edition 1995-06-15 Corrected and reprinted 1997-02-01 Instant coffee - Determination of free and total carbohydrate contents - Method using high-performance anion-exchange chromatography Caf6 soluble - D&ermination des teneurs en hydrates de carbone libres et totaux - Methode par Chromatographie d’khange d’anions 2 haute Performance EyjfTfjfifcj - - -ISO- - - - - - - - - - - - - 3qQ&r.r. Reference number ISO 11292:1995(E) - SIST ISO 11292:2003



ISO 11292:1995(E) IForeword ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national Standards bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical committees. Esch member body interested in a subject for which a technical committee has been established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (l EC) on all matters of electrotechnical standardization. Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote. International Standard ISO 11292 was prepared by Technical Committee lSO/TC 34, Agrkultural food products, Subcommittee SC 15, Coffee. Annexes A and B of this International Standard are for information only. 0 ISO 1995 All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means, electronie or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from the publisher. International Organization for Standardization Case Postale 56 l CH-l 211 Geneve 20 l Switzerland Printed in Switzerland ii SIST ISO 11292:2003



INTERNATIONAL STANDARD 0 ISO ISO 11292:1995(E) Instant coffee - Determination of free and total carbohydrate contents - Method using high-performance anion-exchange chromatography 1 Scope This International Standard specifies a method for the determination of free and total carbohydrate contents in instant coffee using high-performance anion- exchange chromatography. In particular, it determines the content of individual monosaccharides, sucrose and mannitol. 2 Normative references The following Standards contain provisions which, through reference in this text, constitute provisions of this International Standard. At the time of publica- tion, the editions indicated were valid. All Standards are subject to revision, and Parties to agreements based on this International Standard are encouraged to investigate the possibility of applying the most re- cent editions of the Standards indicated below. Members of IEC and ISO maintain registers of cur- rently valid International Standards. ISO 1042: 1983, Laboratory glassware - One-mark volume tric flasks. ISO 3509: 1989, Coffee and its products - Vocabulary. ISO 3726:1983, Instant coffee - Determination of loss in mass at 70 O C under reduced pressure. 3 Definitions For the purposes of this International Standard, the definitions given in ISO 3509 and the following defi- nitions apply. 3.1 free carbohydrate content: Content of each individual monosaccharide (arabinose, fructose, galactose, glucose, mannose), and the sucrose and mannitol contents, determined under the conditions described (method A). Content is expressed as a per- centage by mass on a dry basis. 3.2 total carbohydrate content: Content of each individual monosaccharide (arabinose, galactose, glucose, mannose, Xylose) and the mannitol content, determined under the conditions described, which in- cludes a strong hydrolysis step (method B). Content is expressed as a percentage by mass on a dry basis. 4 Principle 4.1 Method A Dissolution of a test Portion in water. Separation of the carbohydrates present in the filtered extract by ion chromatography on a high-performance anion- exchange column (HPAEC) using pure water as eluent. Electrochemical detection of the eluted com- pounds by means of a pulsed amperometric detector (PAD) and quantification by comparison with peak areas given by Standard solutions. SIST ISO 11292:2003



ISO 11292:1995(E) 0 ISO 4.2 Method B Hydrolysis of a test Portion with aqueous hydrochloric acid. Analysis of the carbohydrates present in the fil- tered hydrolysed Solution as described in method A. 5 Reagents Use only reagents of recognized analytical grade, un- less otherwise specified, and distilled or demin- eralized water or water of equivalent purity. 5.1 Sodium hydroxide (NaOH), 50 % (m/m) aqueous Solution. Weigh, to the nearest 0,l mg, approximately 100 mg of each carbohydrate into separate 100 ml volumetric flasks (6.2) and dilute to the mark with water (stock Standard solutions of 1 000 mg/l). Mixed Standard solutions tan also be prepared from separate stock solutions once the retention time of each carbohydrate is known under the prevailing chromatographic conditions. Further dilute the Standard solutions to resch carbo- hydrate concentrations similar to those found in the non-hydrolysed or hydrolysed instant coffee Sample solutions. The resolution of rhamnose from arabinose is difficult to achieve. If these two monosaccharides coelute, do not add rhamnose in a mixed Standard Solution. The reagent should contain the minimum amount of sodium carbonate and mercury. DO not Shake or stir the Solution before use. 6 Apparatus 5.2 Hydrochlorit acid (HCI), 1,OO mol/1 Standard volumetric solution. 5.3 Eluent 1 (SI), demineralized water (18 MQ=cm). Filter the demineralized water through 0,2 Pm mem- brane filters. Degas by sparging with helium for be- tween 20 min and 30 min. 5.4 Eluent 2 (S2), sodium hydroxide (NaOH), 300 mmol/l Solution. To 985 ml of degassed water (5.3), pipette 15,6 ml of the sodium hydroxide Solution (5.1). CAUTION - lt is extremely important to remove dissolved carbon dioxide from the eluents Prior to use. Carbonate will act as a strong “Pusher” on the column, resulting in a drastic reduction in resolution and efficiency. Prepare the Solution the day before the analysis. Usual laboratory apparatus and, in particular, the fol- lowing. 6.1 Analytical balance, capable of weighing to an accuracy of 5 0,l mg. 6.2 One-mark volumetric flasks, of capacity 100 ml (in accordance with class A of ISO 1042). 6.3 Graduated cylinders, of capacities 1 000 ml and 50 ml, tall form. 64 . Vacuum filtration System. 6.5 Folded filter Papers, medium fast, qualitative. 6.6 Disposable Cl8 filter cartridgesl), to be used according to the manufacturer’s recommendations. 6.7 Disposable membrane filters, 0,2 Pm pore srze. 5.5 Carbohydrate Standard solutions. Prepare fresh solutions of arabinose, fructose, galactose, glucose, mannose, sucrose and mannitol. 6.8 Water bath, capable of being maintained at 100 “C + 5 “C. - 1) Sep-Pack Cl 8 (Waters) and Supelclean LC-18 (Supelco) are examples of suitable products available commercially. This in- formation is given for the convenience of users of this International Standard and does not constitute an endorsement by ISO of these products. 2 SIST ISO 11292:2003



I 0 ISO ISO 11292:1995(E) 6.9 Metal-free liquid chromatograph2), with a high-performance anion-exchange coIumn3) filled with pellicular polystyrene-divinylbenzene resin and pre- column (guard column) 4, and postcolumn delivery System. 6.10 Pulsed amperometric detector (PAD) with gold electrode5). 6.11 Integrator chromatography data station? 6.12 Disposable cartridges7), to be used according to the manufacturer’s recommendations. 7 Sampling lt is important that the laboratory receive a Sample which is truly representative and has not been dam- aged or changed during transport or storage. Sampling is not patt of the method specified in this International Standard. A recommended sampling method is given in ISO 6670:1983, lnstant coffee in cases with liners - Sampling. When the instant coffee is not in cases with Iiners, take a well-mixed representative Sample from Single packed units. 8 Procedure 8.1 Determination of dry matter Calculate the dry matter determined on a portion of the laboratory Sample in accordance with ISO 3726. 8.2 Preparation of Sample for analysis - Method A Weigh, to the nearest 0,l mg, approximately 300 mg of the laboratory Sample directly into a 100 ml volumetric flask (6.2). Add, using a graduated cylinder (6.3), 70 ml of water and Shake until dissolution is Filter the Standard solutions (5.5) and the test sol- utions (8.2 or 8.3) through 0,2 Pm membrane filters (6.7). Inject the Same volume of filtered Standard and test solutions into the chromatograph and separate carbo- hydrates under the conditions given in tables 1 and 2. Identify and quantify carbohydrates in the Sample Solution by comparison with retention times and areas of corresponding peaks obtained using the Standard Solution. Inject a Standard Solution every four injections, in or- der to account for any changes in retention times or peak integrations. 2) The BioLC System (Dionex) consisting of a model GPM-II quarternary gradient pump (Dionex) with a model SP8875 autosampler (Spectra - Physics) filled with a 20 pl loop, model EDM-II eluent degas module (Dionex) and reagent reservoir for NaOH postcolumn addition (Dionex) are examples of suitable equipment available commercially. 3) CarboPac PA1 (10 Pm, 250 mm x 4 mm) (Dionex) is an example of a suitable analytical column available commercially. 4) CarboPac PA (Dionex) is an example of a suitable precolumn available commercially. 5) Model PAD-II (Dionex) is an example of suitable equipment available commercially. 6) Model Autolon AI-450 is an example of suitable equipment available commercially. 7) On Guard-AG (Dionex) is an example of a suitable cartridge commercially available. This information is given for the convenience of users of this International Standard and does not constitute an endorsement by ISO of these products. complete. Dilute to the mark with water. Filter 5 ml to 10 ml of this Solution through a cartridge (6.6). Discard the first few millilitres. 8.3 Preparation of Sample for analysis - Method B Weigh, to the nearest 0,l mg, approximately 300 mg of the laboratory Sample directly into a 100 ml volumetric flask (6.2). Add 50 ml of the hydrochloric acid (5.2) and swirl. Place the flask in a boiling water bath (6.8) for 150 min. Keep the level of the Sample Solution always below that of the water in the bath. Swirl the Solution by hand every 30 min. Cool to room temperature by passing the flask under tap water. Dilute to the mark with water and filter the Solution through a folded fil- ter Paper (6.5). Pass 3 ml of the filtrate through a disposable cartridge (6.12). Discard the first millilitre. 8.4 Chromatographie analysis Set up the chromatograph (6.9) detector (6.10) and integrator (6.1 1). Allow the chromatograph to equilibrate. SIST ISO 11292:2003



ISO 11292:1995(E) Eluent Isocratic Table 1 - Preparation of column Time Eluent Eluent Brocedure SI SZ min ml ml 0 100 0 Start data acquisition 50,o 100 0 Stop data acquisition 50,l 0 100 Start clean-up 65,0 0 100 Stop clean-up 65,l 100 0 Start re-equilibrium 80,O 100 0 Stop re-equilibrium NOTES 1) Retention times tend to vary from one coPumn to another. Start clean-up only when the last monosaccharide (ribose) has been eluted. 2) lt may be necessary to perform two or three injections of Standard solution or to increase the re- equilibrium time in Order to achieve a good Separation of sucrose and Xylose. Table 2 - Conditions for analysis , 4 Injection 20 J.lI Flowrate 1,O mI/min Postcolumn addition Eluent SZ (5.4) at a flowrate of 0,6 ml/min Temperature Ambient Detector Fill up the reference cell with Eluent SZ (5.4). Use the Optimum conditions given by the manufacturer. 9 Calculation m is the mass, in grams, of the test Portion in the test Solution (8.2 or 8.3), expressed on a dry basis; The carbohydrate content, CI), expressed as a per- centage by mass, is equal to A=q-V Co= Ao=m-V. x 100 where A is the peak area of the individ
...

NORME Iso
INTERNATIONALE
11292
Première édition
1995-06-I 5
Corrigée et réimprimée
1997-02-01
Détermination des teneurs
Café soluble -
en hydrates de carbone libres et totaux -
Méthode par chromatographie d’échange
d’anions à haute performance
lnstan t coffee - Determination of free and total carbohydrate
contents - Method using high-performance anion-exchange _
chromatography
Numéro de référence
ISO II 292:1995(F)

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ISO 11292:1995(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de
I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre intéressé par une
étude a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les
organisations internationales, gouvernementales et non gouvernemen-
tales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux. L’ISO colla-
bore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI)
en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques
sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication comme
Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des co-
mités membres votants.
La Norme internationale ISO 11292 a été élaborée par le comité technique
ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comité SC 15, Café.
Les annexes A et B de la présente Norme internationale sont données
uniquement à titre d’information.
0 ISO 1995
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publi-
cation ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun pro-
cédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord
écrit de l’éditeur.
Organisation internationale de normalisation
Case Postale 56 l CH-l 211 Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse
ii

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NORME INTERNATIONALE 0 ISO [SO 11292:1995(F)
Café soluble - Détermination des teneurs en hydrates
de carbone libres et totaux - Méthode par
chromatographie d’échange d’anions à haute
performance
1 Domaine d’application 3 Définitions
Pour les besoins de la présente Norme internationale,
La présente Norme internationale prescrit une mé-
les définitions données dans I’ISO 3509 et les défini-
thode pour la détermination de la teneur en hydrates
tions suivantes s’appliquent.
de carbone libres et totaux dans le café soluble par
chromatographie d’échange d’anions à haute perfor-
3.1 teneur en hydrates de carbone libres: Teneur
mance. Elle permet en particulier de doser les mono-
en chaque monosaccharide individuel (arabinose,
saccharides individuels, le saccharose et le mannitol.
fructose, galactose, glucose, mannose), en saccha-
rose et en mannitol, déterminée dans les conditions
décrites (méthode A). Cette teneur est exprimée en
pourcentage en masse sur matière sèche.
2 Références normatives
3.2 teneur en hydrates de carbone totaux: Teneur
en chaque monosaccharide individuel (arabinose,
Les normes suivantes contiennent des dispositions
galactose, glucose, mannose, xylose) et en mannitol,
qui, par suite de la référence qui en est faite, consti-
déterminée dans les conditions décrites, ce qui inclut
tuent des dispositions valables pour la présente
une étape d’hydrolyse forte (méthode B). Cette te-
Norme internationale. Au moment de la publication,
neur est exprimée en pourcentage en masse sur ma-
les éditions indiquées étaient en vigueur. Toute
tière sèche.
norme est sujette à révision et les parties prenantes
des accords fondés sur la présente Norme internatio-
4 Principe
nale sont invitées à rechercher la possibilité d’appli-
quer les éditions les plus récentes des normes
4.1 Méthode A
indiquées ci-après. Les membres de la CEI et de I’ISO
possèdent le registre des Normes internationales en
Dissolution d’une prise d’essai dans de l’eau. Sépa-
vigueur à un moment donné.
ration des hydrates de carbone présents dans l’extrait
filtré par chromatographie ionique sur une colonne
ISO 1042:1983, Verrerie de laboratoire - Fioles jau-
échangeuse d’anions à haute performance, en utili-
gées à un trait.
sant uniquement de l’eau comme éluant. Détection
électrochimique des composés élués à l’aide d’un
ISO 3509: 1989, Cafés et dérivés - Vocabulaire.
détecteur à ampérométrie pulsée et quantification par
comparaison avec les aires des pics produits par des
ISO 3726: 1983, Café soluble - Détermination de la
perte de masse à 70 “C sous pression réduite. solutions étalons.

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0 ISO
ISO 11292:1995(F)
Peser, à 0,l mg près, environ 100 mg de chaque
4.2 Méthode B
hydrate de carbone dans des fioles jaugées indivi-
duelles de 100 ml (6.2) et compléter au trait repère
Hydrolyse d’une prise d’essai avec une solution
avec de l’eau (solutions mères à 1 000 mg/l).
aqueuse d’acide chlorhydrique. Analyse des hydrates
de carbone présents dans la solution hydrolysée fil-
Des solutions étalons mixtes peuvent également être
trée comme décrit pour la méthode A.
préparées à partir des solutions mères individuelles,
une fois que l’on connaÎt le temps de rétention de
chaque hydrate de carbone dans les conditions chro-
matographiques utilisées.
5 Réactifs
Effectuer des dilutions supplémentaires des solutions
Sauf indication différente, utiliser uniquement des ré-
étalons afin d’obtenir des concentrations en hydrate
actifs de qualité analytique reconnue et de l’eau dis-
de carbone semblables à celles que l’on trouve dans
pureté équi-
tillée ou déminéralisée ou de l’eau de
les solutions hydrolysées ou non hydrolysées des
valente.
échantillons de café soluble.
Une bonne séparation entre le rhamnose et I’ara-
5.1 Hydroxyde de sodium (Na0 lution
HI, SO
binose est difficile à réaliser. Si ces deux mono-
aqueuse à 50 % (m/m>.
saccharides coéluent, ne pas inclure de rhamnose
dans la solution étalon mixte.
Le réactif doit contenir le moins possible de carbonate
de sodium et de mercure. Ne pas secouer ou agiter
la solution avant l’emploi.
6 Appareillage
5.2 Acide chlorhydrique (HCI), solution titrée à
Matériel courant de laboratoire, et en particulier, ce
1 ,00 mol/l.
qui suit.
5.3 Éluant 1 (SI), eau déminéralisée (18 MQcm).
6.1 Balance analytique, précise à + 0,l mg.
Filtrer l’eau déminéralisée sur des membranes fil-
trantes de 0,2 prn. Dégazer en faisant barboter de
6.2 Fioles jaugées à un trait, d’une capacité de
l’hélium pendant 20 min à 30 min.
100 ml (conformes à la classe A de I’ISO 1042).
5.4 Éluant 2 (S2), hydroxyde de sodium (NaOH),
6.3 Éprouvettes graduées, d’une capacité de
solution à 300 mmol/l.
1 000 ml et 50 ml, forme haute.
À l’aide d’une pipette, ajouter 15,6 ml de la solution
d’hydroxyde de sodium (5.1) à 985 ml d’eau dégazée
6.4 Système de filtration sous vide.
(5.3).
ATTENTION - II est extrêmement important d’éli-
6.5 Papiers filtres plissés, moyens, qualitatifs.
miner avant l’emploi le dioxyde de carbone dissous
dans les éluants. Le carbonate a un très fort effet
((poussant)) sur la colonne, qui provoque une sévère
6.6 Cartouches filtrantes Cl8 à usage unique? à
réduction de la résolution et de l’efficacité. Préparer
utiliser selon les recommandations du fabricant.
la solution le jour précédant l’analyse.
67 Membranes filtrantes à usage unique, diamè-
5.5 Solutions étalons d’hydrate de carbone.
tre des pores 0,2 prn.
Préparer des solutions fraîches d’arabinose, fructose,
galactose, glucose, mannose, saccharose et mannitol.
6.8 Bain d’eau, réglable à 100 “C + 5 “C.
-
1) Sep-Pack Cl 8 (Waters) et Supelclean LC-18 (Supelco) sont des exemples de produits appropriés disponibles sur le marché.
Cette information est donnée à l’intention des utilisateurs de la présente Norme internationale et ne signifie nullement que I’ISO
approuve ou recommande l’emploi exclusif des produits ainsi désignés.
2

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0 ISO
ISO 11292:1995(F)
6.9 Chromatographe en phase liquide exempt de 8.2 Préparation de l’échantillon pour
métaux*), comprenant une colonne analytique échan-
analyse -
Méthode A
geuse d’anions 3) remplie d’une résine pelliculaire en
polystyrène divinylbenzène, une précolonne4) et un Peser, à 0,l mg près, environ 300 mg de l’échantillon
système d’addition postcolonne. pour laboratoire directement dans une fiole jaugée de
100 ml (6.2). À l’aide d’une éprouvette graduée (6.3),
ajouter 70 ml d’eau et agiter jusqu’à dissolution com-
6.10 Détecteur à ampérométrie pulsée avec une
plète. Compléter au trait repère avec de l’eau. Filtrer
électrode en or5).
5 ml à 10 ml de cette solution sur une cartouche fil-
trante (6.6). Rejeter les premiers millilitres.
6.11 Intégrateur système de traitement des don-
nées chromatographiques?
8.3 Préparation de l’échantillon pour
analyse - Méthode B
6.12 Cartouches échangeuses d’ions à usage
Peser, à 0,l mg près, environ 300 mg de l’échantillon
unique71 à utiliser selon les recommandations du fa-
t
pour laboratoire directement dans une fiole jaugée de
bricant.
100 ml (6.2). Ajouter 50 ml d’acide chlorhydrique
(5.2) et agiter. Placer la fiole pendant 150 min dans
un bain d’eau bouillante (6.8).
7 Échantillonnage
Maintenir constamment le niveau de la solution à
II est important que le laboratoire reçoive un échan-
analyser en dessous de celui de l’eau du bain. Agiter
tillon réellement représentatif, non endommagé ou
la solution à la main toutes les 30 min. Refroidir à
modifié lors du transport et de l’entreposage.
température ambiante en passant la fiole sous l’eau
courante. Compléter au trait repère avec de l’eau et
L’échantillonnage ne fait pas partie de la méthode
filtrer la solution à travers un papier filtre plissé (6.5).
spécifiée dans la présente Norme internationale. Une
Faire passer 3 ml de filtrat sur une cartouche échan-
méthode d’échantillonnage recommandée est donnée
geuse d’ions (6.12). Rejeter le premier millilitre.
dans I’ISO 6670:1983, Café soluble en caisses dou-
blées - Échantillonnage.
8.4 Analyse chromatographique
Lorsque le café soluble n’est pas reçu en caisses
doublées, prendre un échantillon représentatif bien
Installer le chromatographe (6.91, le détecteur (6.10)
mélangé à partir d’unités emballées séparément.
et I’intégrateur (6.11).
Laisser le système s’équilibrer.
8 Mode opératoire
Filtrer les solutions étalons (5.5) et les solutions à
analyser (8.2 ou 8.3) sur des membranes filtrantes de
8.1 Détermination de la teneur en matière
0,2 prn (6.7).
sèche
Injecter dans le chromatographe le même volume de
Calculer la teneur en matière sèche sur une portion solution étalon filtrée et de solution à analyser filtrée
de l’échantillon pour laboratoire conformément à et séparer les hydrates de carbone dans les conditions
I’ISO 3726. indiquées dans les tableaux 1 et 2 .
2) Le système BioLC (Dionex) comprenant une pompe à gradient quaternaire modèle GPM-II, un passeur d’échantillons
SP8875 (Spectra - Physics) avec une boucle de 20 ~1, un module de dégazage d’éluant modèle EDM-II (Dionex) et un réservoir
pour l’addition postcolonne de NaOH (Dionex) sont des exemples de produits appropriés disponibles sur le marché.
3) CarboPac PA1 (10 prn, 250 mm x 4 mm) (Dionex) est un exemple de colonne analytique appropriée disponible sur le mar-
ché.
4) CarboPac PA (Dionex) est un exemple de précolonne appropriée disponible sur le marché.
5) Le modèle PAD-II (Dionex) est un exemple d’appareillage approprié disponible sur le marché.
6) Le modèle Autolon AI-450 est un exemple de système approprié disponible sur le marché.
7) On Guard-AG (Dionex) est un exemple de cartouche appropriée disponible sur le marché.
Ces informations sont données à l’intention des utilisateurs de la présente Norme internationale et ne signifie nullement que
I’ISO approuve ou recommande l’emploi exclusif des produits ainsi désignés.

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ISO 11292:1995(F)
Tableau 1 - Préparation de la colonne
huant
Temps Éluant Éluant Mode opératoire
Sl s2
min ml ml
Commencer I’enregis-
Isocratique 0 100 0
trement
Terminer I’enregis-
50,o 100 0
trement
50,l 0 100 Commencer le lavage
65,0 0 100 Terminer le lavage
Commencer le rééquili-
65,l 100 0
brage
80,O 100 0 Terminer le rééquilibrage
NOTES
1) Les temps de rétention peuvent varier d’une colonne à l’autre. Commencer le lavage de la colonne
uniquement lorsque le dernier monosaccharide (ribose) a été élué.
2) II peut être nécessaire d’effectuer deux ou trois injections de solution étalon ou de prolonger la
durée de rééquilibrage afin d’obtenir une bonne séparation du saccharose et du xylose.
Tableau 2 - Conditions d‘analyse
Injection 20 PI
Débit 1,0 mI/min
Addition postcolonne Éluant S2 (5.4) à un débit de 0,6 mI/min
Température Ambiante
Détecteur Remplir la cellule de référence avec I’éluant S2 (5.4).
Appliquer les conditions optimales recommandées par le fabricant.
Identifier et quantifier les hydrates de carbone dans la
où
solution à analyser par comparaison avec les temps
A est l’aire du pic de l’hydrate de carbone
de rétention et les aires des pics correspondants ob-
dans la solution à analyser (8.4);
tenus pour les solutions étalons.
est l’aire du pic de l’hydrate de carbone
Injecter une solution étalon toutes les quatre injec- AO
dans la solution étalon (8.4);
tions, afin de tenir compte de tout changement dans
les temps de rétention ou les intégrations des pics.
m est la masse, en grammes, de la prise
d’essai dans la solution à analyser (8.2 ou
9 Calcul
8.3), exprimée sur matière sèche;
est la masse, en grammes, de l’hydrate de
La teneur en hydrate de carbone, CI), exprimée en
mO
pourcentage en masse, est égale à carbone dans la solution étalon (5.5);
A-q-V
x 100
CO=
Ao=mmVo

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0 ISO
ISO 11292:1995(F)
V est le volume, en millilitres, de la solution
10.2 Reproductibilité
à analyser (8.2 ou 8.3);
La reproductibilité est définie comme étant la diffé-
est le volume, en millilitres, de l
...

NORME Iso
INTERNATIONALE
11292
Première édition
1995-06-I 5
Corrigée et réimprimée
1997-02-01
Détermination des teneurs
Café soluble -
en hydrates de carbone libres et totaux -
Méthode par chromatographie d’échange
d’anions à haute performance
lnstan t coffee - Determination of free and total carbohydrate
contents - Method using high-performance anion-exchange _
chromatography
Numéro de référence
ISO II 292:1995(F)

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ISO 11292:1995(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de
I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre intéressé par une
étude a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les
organisations internationales, gouvernementales et non gouvernemen-
tales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux. L’ISO colla-
bore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI)
en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques
sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication comme
Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des co-
mités membres votants.
La Norme internationale ISO 11292 a été élaborée par le comité technique
ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comité SC 15, Café.
Les annexes A et B de la présente Norme internationale sont données
uniquement à titre d’information.
0 ISO 1995
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publi-
cation ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun pro-
cédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord
écrit de l’éditeur.
Organisation internationale de normalisation
Case Postale 56 l CH-l 211 Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse
ii

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NORME INTERNATIONALE 0 ISO [SO 11292:1995(F)
Café soluble - Détermination des teneurs en hydrates
de carbone libres et totaux - Méthode par
chromatographie d’échange d’anions à haute
performance
1 Domaine d’application 3 Définitions
Pour les besoins de la présente Norme internationale,
La présente Norme internationale prescrit une mé-
les définitions données dans I’ISO 3509 et les défini-
thode pour la détermination de la teneur en hydrates
tions suivantes s’appliquent.
de carbone libres et totaux dans le café soluble par
chromatographie d’échange d’anions à haute perfor-
3.1 teneur en hydrates de carbone libres: Teneur
mance. Elle permet en particulier de doser les mono-
en chaque monosaccharide individuel (arabinose,
saccharides individuels, le saccharose et le mannitol.
fructose, galactose, glucose, mannose), en saccha-
rose et en mannitol, déterminée dans les conditions
décrites (méthode A). Cette teneur est exprimée en
pourcentage en masse sur matière sèche.
2 Références normatives
3.2 teneur en hydrates de carbone totaux: Teneur
en chaque monosaccharide individuel (arabinose,
Les normes suivantes contiennent des dispositions
galactose, glucose, mannose, xylose) et en mannitol,
qui, par suite de la référence qui en est faite, consti-
déterminée dans les conditions décrites, ce qui inclut
tuent des dispositions valables pour la présente
une étape d’hydrolyse forte (méthode B). Cette te-
Norme internationale. Au moment de la publication,
neur est exprimée en pourcentage en masse sur ma-
les éditions indiquées étaient en vigueur. Toute
tière sèche.
norme est sujette à révision et les parties prenantes
des accords fondés sur la présente Norme internatio-
4 Principe
nale sont invitées à rechercher la possibilité d’appli-
quer les éditions les plus récentes des normes
4.1 Méthode A
indiquées ci-après. Les membres de la CEI et de I’ISO
possèdent le registre des Normes internationales en
Dissolution d’une prise d’essai dans de l’eau. Sépa-
vigueur à un moment donné.
ration des hydrates de carbone présents dans l’extrait
filtré par chromatographie ionique sur une colonne
ISO 1042:1983, Verrerie de laboratoire - Fioles jau-
échangeuse d’anions à haute performance, en utili-
gées à un trait.
sant uniquement de l’eau comme éluant. Détection
électrochimique des composés élués à l’aide d’un
ISO 3509: 1989, Cafés et dérivés - Vocabulaire.
détecteur à ampérométrie pulsée et quantification par
comparaison avec les aires des pics produits par des
ISO 3726: 1983, Café soluble - Détermination de la
perte de masse à 70 “C sous pression réduite. solutions étalons.

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0 ISO
ISO 11292:1995(F)
Peser, à 0,l mg près, environ 100 mg de chaque
4.2 Méthode B
hydrate de carbone dans des fioles jaugées indivi-
duelles de 100 ml (6.2) et compléter au trait repère
Hydrolyse d’une prise d’essai avec une solution
avec de l’eau (solutions mères à 1 000 mg/l).
aqueuse d’acide chlorhydrique. Analyse des hydrates
de carbone présents dans la solution hydrolysée fil-
Des solutions étalons mixtes peuvent également être
trée comme décrit pour la méthode A.
préparées à partir des solutions mères individuelles,
une fois que l’on connaÎt le temps de rétention de
chaque hydrate de carbone dans les conditions chro-
matographiques utilisées.
5 Réactifs
Effectuer des dilutions supplémentaires des solutions
Sauf indication différente, utiliser uniquement des ré-
étalons afin d’obtenir des concentrations en hydrate
actifs de qualité analytique reconnue et de l’eau dis-
de carbone semblables à celles que l’on trouve dans
pureté équi-
tillée ou déminéralisée ou de l’eau de
les solutions hydrolysées ou non hydrolysées des
valente.
échantillons de café soluble.
Une bonne séparation entre le rhamnose et I’ara-
5.1 Hydroxyde de sodium (Na0 lution
HI, SO
binose est difficile à réaliser. Si ces deux mono-
aqueuse à 50 % (m/m>.
saccharides coéluent, ne pas inclure de rhamnose
dans la solution étalon mixte.
Le réactif doit contenir le moins possible de carbonate
de sodium et de mercure. Ne pas secouer ou agiter
la solution avant l’emploi.
6 Appareillage
5.2 Acide chlorhydrique (HCI), solution titrée à
Matériel courant de laboratoire, et en particulier, ce
1 ,00 mol/l.
qui suit.
5.3 Éluant 1 (SI), eau déminéralisée (18 MQcm).
6.1 Balance analytique, précise à + 0,l mg.
Filtrer l’eau déminéralisée sur des membranes fil-
trantes de 0,2 prn. Dégazer en faisant barboter de
6.2 Fioles jaugées à un trait, d’une capacité de
l’hélium pendant 20 min à 30 min.
100 ml (conformes à la classe A de I’ISO 1042).
5.4 Éluant 2 (S2), hydroxyde de sodium (NaOH),
6.3 Éprouvettes graduées, d’une capacité de
solution à 300 mmol/l.
1 000 ml et 50 ml, forme haute.
À l’aide d’une pipette, ajouter 15,6 ml de la solution
d’hydroxyde de sodium (5.1) à 985 ml d’eau dégazée
6.4 Système de filtration sous vide.
(5.3).
ATTENTION - II est extrêmement important d’éli-
6.5 Papiers filtres plissés, moyens, qualitatifs.
miner avant l’emploi le dioxyde de carbone dissous
dans les éluants. Le carbonate a un très fort effet
((poussant)) sur la colonne, qui provoque une sévère
6.6 Cartouches filtrantes Cl8 à usage unique? à
réduction de la résolution et de l’efficacité. Préparer
utiliser selon les recommandations du fabricant.
la solution le jour précédant l’analyse.
67 Membranes filtrantes à usage unique, diamè-
5.5 Solutions étalons d’hydrate de carbone.
tre des pores 0,2 prn.
Préparer des solutions fraîches d’arabinose, fructose,
galactose, glucose, mannose, saccharose et mannitol.
6.8 Bain d’eau, réglable à 100 “C + 5 “C.
-
1) Sep-Pack Cl 8 (Waters) et Supelclean LC-18 (Supelco) sont des exemples de produits appropriés disponibles sur le marché.
Cette information est donnée à l’intention des utilisateurs de la présente Norme internationale et ne signifie nullement que I’ISO
approuve ou recommande l’emploi exclusif des produits ainsi désignés.
2

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0 ISO
ISO 11292:1995(F)
6.9 Chromatographe en phase liquide exempt de 8.2 Préparation de l’échantillon pour
métaux*), comprenant une colonne analytique échan-
analyse -
Méthode A
geuse d’anions 3) remplie d’une résine pelliculaire en
polystyrène divinylbenzène, une précolonne4) et un Peser, à 0,l mg près, environ 300 mg de l’échantillon
système d’addition postcolonne. pour laboratoire directement dans une fiole jaugée de
100 ml (6.2). À l’aide d’une éprouvette graduée (6.3),
ajouter 70 ml d’eau et agiter jusqu’à dissolution com-
6.10 Détecteur à ampérométrie pulsée avec une
plète. Compléter au trait repère avec de l’eau. Filtrer
électrode en or5).
5 ml à 10 ml de cette solution sur une cartouche fil-
trante (6.6). Rejeter les premiers millilitres.
6.11 Intégrateur système de traitement des don-
nées chromatographiques?
8.3 Préparation de l’échantillon pour
analyse - Méthode B
6.12 Cartouches échangeuses d’ions à usage
Peser, à 0,l mg près, environ 300 mg de l’échantillon
unique71 à utiliser selon les recommandations du fa-
t
pour laboratoire directement dans une fiole jaugée de
bricant.
100 ml (6.2). Ajouter 50 ml d’acide chlorhydrique
(5.2) et agiter. Placer la fiole pendant 150 min dans
un bain d’eau bouillante (6.8).
7 Échantillonnage
Maintenir constamment le niveau de la solution à
II est important que le laboratoire reçoive un échan-
analyser en dessous de celui de l’eau du bain. Agiter
tillon réellement représentatif, non endommagé ou
la solution à la main toutes les 30 min. Refroidir à
modifié lors du transport et de l’entreposage.
température ambiante en passant la fiole sous l’eau
courante. Compléter au trait repère avec de l’eau et
L’échantillonnage ne fait pas partie de la méthode
filtrer la solution à travers un papier filtre plissé (6.5).
spécifiée dans la présente Norme internationale. Une
Faire passer 3 ml de filtrat sur une cartouche échan-
méthode d’échantillonnage recommandée est donnée
geuse d’ions (6.12). Rejeter le premier millilitre.
dans I’ISO 6670:1983, Café soluble en caisses dou-
blées - Échantillonnage.
8.4 Analyse chromatographique
Lorsque le café soluble n’est pas reçu en caisses
doublées, prendre un échantillon représentatif bien
Installer le chromatographe (6.91, le détecteur (6.10)
mélangé à partir d’unités emballées séparément.
et I’intégrateur (6.11).
Laisser le système s’équilibrer.
8 Mode opératoire
Filtrer les solutions étalons (5.5) et les solutions à
analyser (8.2 ou 8.3) sur des membranes filtrantes de
8.1 Détermination de la teneur en matière
0,2 prn (6.7).
sèche
Injecter dans le chromatographe le même volume de
Calculer la teneur en matière sèche sur une portion solution étalon filtrée et de solution à analyser filtrée
de l’échantillon pour laboratoire conformément à et séparer les hydrates de carbone dans les conditions
I’ISO 3726. indiquées dans les tableaux 1 et 2 .
2) Le système BioLC (Dionex) comprenant une pompe à gradient quaternaire modèle GPM-II, un passeur d’échantillons
SP8875 (Spectra - Physics) avec une boucle de 20 ~1, un module de dégazage d’éluant modèle EDM-II (Dionex) et un réservoir
pour l’addition postcolonne de NaOH (Dionex) sont des exemples de produits appropriés disponibles sur le marché.
3) CarboPac PA1 (10 prn, 250 mm x 4 mm) (Dionex) est un exemple de colonne analytique appropriée disponible sur le mar-
ché.
4) CarboPac PA (Dionex) est un exemple de précolonne appropriée disponible sur le marché.
5) Le modèle PAD-II (Dionex) est un exemple d’appareillage approprié disponible sur le marché.
6) Le modèle Autolon AI-450 est un exemple de système approprié disponible sur le marché.
7) On Guard-AG (Dionex) est un exemple de cartouche appropriée disponible sur le marché.
Ces informations sont données à l’intention des utilisateurs de la présente Norme internationale et ne signifie nullement que
I’ISO approuve ou recommande l’emploi exclusif des produits ainsi désignés.

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ISO 11292:1995(F)
Tableau 1 - Préparation de la colonne
huant
Temps Éluant Éluant Mode opératoire
Sl s2
min ml ml
Commencer I’enregis-
Isocratique 0 100 0
trement
Terminer I’enregis-
50,o 100 0
trement
50,l 0 100 Commencer le lavage
65,0 0 100 Terminer le lavage
Commencer le rééquili-
65,l 100 0
brage
80,O 100 0 Terminer le rééquilibrage
NOTES
1) Les temps de rétention peuvent varier d’une colonne à l’autre. Commencer le lavage de la colonne
uniquement lorsque le dernier monosaccharide (ribose) a été élué.
2) II peut être nécessaire d’effectuer deux ou trois injections de solution étalon ou de prolonger la
durée de rééquilibrage afin d’obtenir une bonne séparation du saccharose et du xylose.
Tableau 2 - Conditions d‘analyse
Injection 20 PI
Débit 1,0 mI/min
Addition postcolonne Éluant S2 (5.4) à un débit de 0,6 mI/min
Température Ambiante
Détecteur Remplir la cellule de référence avec I’éluant S2 (5.4).
Appliquer les conditions optimales recommandées par le fabricant.
Identifier et quantifier les hydrates de carbone dans la
où
solution à analyser par comparaison avec les temps
A est l’aire du pic de l’hydrate de carbone
de rétention et les aires des pics correspondants ob-
dans la solution à analyser (8.4);
tenus pour les solutions étalons.
est l’aire du pic de l’hydrate de carbone
Injecter une solution étalon toutes les quatre injec- AO
dans la solution étalon (8.4);
tions, afin de tenir compte de tout changement dans
les temps de rétention ou les intégrations des pics.
m est la masse, en grammes, de la prise
d’essai dans la solution à analyser (8.2 ou
9 Calcul
8.3), exprimée sur matière sèche;
est la masse, en grammes, de l’hydrate de
La teneur en hydrate de carbone, CI), exprimée en
mO
pourcentage en masse, est égale à carbone dans la solution étalon (5.5);
A-q-V
x 100
CO=
Ao=mmVo

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0 ISO
ISO 11292:1995(F)
V est le volume, en millilitres, de la solution
10.2 Reproductibilité
à analyser (8.2 ou 8.3);
La reproductibilité est définie comme étant la diffé-
est le volume, en millilitres, de l
...