SIST ISO 6557-1:1995

International Standard
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATIONWblEHtAYHAPOAHAR OPfAHM3At&lR fl0 CTAH~APTbl3ALWWORGANISATlON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Fruits, vegetables and derived products - Determination
of ascorbic acid -
Part 1: Reference method
Fruits, ldgumes et produits d4rivhs - LXtermination de la teneur en acide ascorbique - Partie 7 : Methode de rhf&rence
First edition - 1986-10-01
w
-
UDC 635.1/.6 : 543.426 : 547.475.2
Ref. No. ISO 6557/1-1986 (E)
Q,
agricultural products, fruits, vegetables, fruit and vegetable products, Chemical analysis, determination of content, ascorbic acid,
Descriptors :
spectrochemical analysis.
F
5l
5:
Price based on 3 pages
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of
national Standards bodies (ISO member bodies). The work of preparing International
Standards is normally carried out through ISO technical committees. Esch member
body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to
the member bodies for approval before their acceptance as International Standards by
the ISO Council. They are approved in accordance with ISO procedures requiring at
least 75 % approval by the member bodies voting.
International Standard ISO 6557/1 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34,
Agricultural food products.
Users should note that all International Standards undergo revision from time to time
and that any reference made herein to any other International Standard implies its
Iatest edition, unless otherwise stated.
0 International Organkation for Standardkation, 1986
Printed in Switzerland
INTERNATIONAL STANDARD ISO 6557/1-1986 (E)
Fruits, vegetables and derived products - Determination
of ascorbic acid -
Part 1: Reference method
3 Reagents and materials
1 Scope and field of application
All reagents shall be of recognized analytical grade and the
This part of ISO 6557 specifies the reference method, using
water used shall be distilled or water of equivalent purity.
molecular fluorescence spectrometry, for the determination of
the combined ascorbic and dehydroascorbic acid content of
fruits, vegetables and derived products. 3.1 o-Phenylenediamine dihydrochloride
(C6H8N2 9 2HCI), 0,2 g/l Solution.
Prepare this Solution just before use.
2 Principle
3.2 Sodium acetate trihydrate (CH,COONa~3H20},
Transformation of ascorbic acid into dehydroascorbic acid
500 gll Solution.
using activated charcoal.
3.3 Boric acidkodium acetate Solution.
Reaction of the dehydroascorbic acid obtained with
o-phenylenediamine (OPDA) to give a fluorescent compound
Dissolve 3 g of boric acid (H3B03) in 100 ml of the sodium
according to the reaction
acetate Solution (3.2).
Prepare this Solution just before use.
3.4 Ascorbic acid, 1 g/l Standard solution.
N”z Weigh, to the nearest 0,Ol mg, 50 mg of ascorbic acid,
/
’
+
previously dehydrated in a desiccator protected from iight.
I
\
Transfer quantitativeiy to a 50 ml one-mark volumetric fiask and
a 0
N”z
make up to the mark with the extraction Solution (3.5), just
(Dehydroascorbic acid)
(OPDA)
before use.
t
3.5 Extraction soiution.
3.5.1 Metaphosphoric acidlacetic acid.
Transfer 30 g of metaphosphoric acid (HPO,) to a 1 000 m$
beaker or conical fiask containing 80 mi of giaciai acetic acid
(CH$OOH) and about 500 mi sf water. Warm and stir gently
until complete dissolution.
I y roxyethyl) furo 13,4-bl quinoxaline)
( 1 -Oxo-2,4 H-3-t 1,2-d’h d
Aliow the soiution to cool. Transfer it quantitativeiy to a
1 000 mi one-mark voiumetric fiask and make up to the mark
with water.
or
In a control test in the presence sf boric acid, formation of the
- dehydroascorbic acid to prevent reaction
complex HsB03
3.52 Metaphosphoric acid/methanol.
with OPDA. Any fluorescent interference tan thus be taken
into account in the calculation. Mix 3 voiumes of a 4 % (mlm) metaphosphoric acid solution
with 1 volume of methanoi.
NOTE - The initial dehydroascorbic acid content alone tan be deter-
mined by omitting the step using activated charcoal. lt is then possible,
NOTE - Metaphosphoric acid is commercialiy availabie with an HPO,
by subtraction, to determine the initial content of ascorbic acid alone.
content of 40 to 44 %.
ISO 6557/1-1986 (E)
5.2 Test Portion
3.6 Activated charcoaI.1)
Transfer a quantity, weighed to the nearest 0,l mg, of the test
Weigh 200 g of activated charcoal and add 1 litre of 10 % (V/ v)
Sample (5.1) to a conical flask (4.51, so that after dilution with
hydrochloric acid.
the extraction Solution the ascorbic acid and dehydroascorbic
acid concentration may be expected to be between 0 and
Heat to boiling, then filter through a sintered glass filter of
50 mg/l.
porosity P 40 (16 to 40 Pm)
...

Norme internationale
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATI~N.ME)I(L1YHAPO&4AR OPrAHH3ALli4R IlO CTAH~APTH3A~kWORGANISAilON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Fruits, légumes et produits dérivés - Détermination de la
,
teneur en acide ascorbique -
Partie 1: Méthode de référence
Fruits, vegetables and derived products - Determination of ascorbic acid - Part 7: Reference method
Première édition - 1986-10-01
CDU 635X6 : 543.426 : 547.475.2
Réf. n* : ISO 6557/1-1986 (F)
Descripteurs : produit agricole, fruit, légume, produit dérivé des fruits et légumes, analyse chimique, dosage, acide ascorbique, méthode
spectrochimique.
Prix basé sur 3 pages
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comites techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I’ISO qui requièrent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 6557/1 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires.
L’attention des utilisateurs est attirée sur le fait que toutes les Normes internationales
sont de temps en temps soumises à revision et que toute référence faite à une autre
Norme internationale dans le présent document implique qu’il s’agit, sauf indication
contraire, de la dernière édition.
l
0 Organisation internationale de normalisation, 1986
Imprimé en Suisse
ISO 6557/1-1986 (F)
NORME INTERNATIONALE
Fruits, légumes et produits dérivés - Détermination de la
teneur en acide ascorbique -
Partie 1: Méthode de référence
3 Réactifs
1 Objet et domaine d’application
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue, et
La présente partie de I’ISO 6557 spécifie la methode de réfé-
l’eau utilisée doit être de l’eau distillee ou de pureté équivalente.
rence pour la détermination de la teneur globale en acide ascor-
bique et en acide déhydroascorbique par spectrométrie de fluo-
rescence moléculaire dans les fruits, légumes et produits dérivés.
3.1 Dichlorhydrate d’o-ph6nyNnediamine
(C6H8N2, 2HCI), solution à 0,2 g/l.
Préparer cette solution extemporanément.
2 Principe
3.2 Acétate de sodium trihydrate (CH&OONa, 3H20),
Transformation de l’acide ascorbique présent en acide déhydro-
solution à 500 g/l.
ascorbique par action du charbon actif.
3.3 Acide borique/acétate de sodium, solution.
Réaction de l’acide déhydroascorbique ainsi obtenu avec
I’o-phénylénediamine (OPDA) pour donner un composé fluo-
Dissoudre 3 g d’acide borique (H3B03) dans 100 ml de solution
restent :
d’acétate de sodium (3.2).
Préparer cette solution extemporanément.
3.4 Acide ascorbique, solution étalon a 1 g/l.
Peser, à 0,Ol mg prés, 50 mg d’acide ascorbique préalablement
déshydraté dans un dessiccateur, à l’abri de la lumiére. Trans-
vaser quantitativement dans une fiole jaugée de 50 ml et ame-
(OPDA) (Acide déhydroascorbique)
ner au trait repère, juste avant l’utilisation avec la solution
d’extraction (3.5).
3.5 Solution d’extraction.
3.5.1 Acide m&aphosphorique/acide acétique.
Dans un bécher ou une fiole conique de 1 000 ml, introduire
30 g d’acide métaphosphorique (HP031 dans 80 ml d’acide acé-
tique cristallisable (CH$OOH) et environ 500 ml d’eau. Tiédir
et agiter doucement jusqu’à dissolution compléte.
(0x0-1 2,4 H-(dihydroxyéthyl-1,2)-3 furo [3,4-M quinoxaline)
Laisser refroidir. Transvaser quantitativement dans une fiole
jaugée de 1 000 ml. Ajuster au trait repère avec de l’eau.
OU
Sur un essai témoin, en présence d’acide borique, formation
d’un complexe H3B03 - acide déhydroascorbique ne pouvant
3.5.2 Acide m&aphosphorique/méthanol.
plus réagir avec I’OPDA. La fluorescence parasite seule sub-
siste, ce qui permet ainsi de l’éliminer de la réaction principale. Mélanger 3 volumes d’une solution d’acide métaphosphorique
à 4 % (mlm) avec 1 volume de méthanol.
NOTE - La teneur en acide déhydroascorbique seul peut être détermi-
née, en omettant l’étape du charbon actif. II est alors possible, par
NOTE - L’acide métaphosphorique disponible dans le commerce con-
soustraction, de déterminer la teneur en acide ascorbique seul.
tient de 40 à 44 % d’acide phosphorique (HPO,).

ISO 6557/1-1986 (FI
1)
3.6 Charbon actif. 5.2 Prise d’essai
Introduire dans une fiole conique (4.5), une quantité d’échantil-
Peser 200 g de charbon actif et ajouter 1 litre d’acide chlorhydri-
lon pour essai (5.11, pesée à 0,l mg près, telle qu’après dilution
queà 10 % (WV).
avec la solution d’extraction, la teneur en acide ascorbique et
en acide déhydroascorbique soit comprise entre 0 et 50 mg/I.
Porter à ébullition, puis filtrer sur filtre en verre fritté de porosité
...

Norme internationale
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATI~N.ME)I(L1YHAPO&4AR OPrAHH3ALli4R IlO CTAH~APTH3A~kWORGANISAilON INTERNATIONALE DE NORMALISATION
Fruits, légumes et produits dérivés - Détermination de la
,
teneur en acide ascorbique -
Partie 1: Méthode de référence
Fruits, vegetables and derived products - Determination of ascorbic acid - Part 7: Reference method
Première édition - 1986-10-01
CDU 635X6 : 543.426 : 547.475.2
Réf. n* : ISO 6557/1-1986 (F)
Descripteurs : produit agricole, fruit, légume, produit dérivé des fruits et légumes, analyse chimique, dosage, acide ascorbique, méthode
spectrochimique.
Prix basé sur 3 pages
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale
d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de I’ISO). L’élaboration
des Normes internationales est confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque
comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique
créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne-
mentales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comites techniques sont soumis
aux comités membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter-
nationales par le Conseil de I’ISO. Les Normes internationales sont approuvées confor-
mément aux procédures de I’ISO qui requièrent l’approbation de 75 % au moins des
comités membres votants.
La Norme internationale ISO 6557/1 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34,
Produits agricoles alimentaires.
L’attention des utilisateurs est attirée sur le fait que toutes les Normes internationales
sont de temps en temps soumises à revision et que toute référence faite à une autre
Norme internationale dans le présent document implique qu’il s’agit, sauf indication
contraire, de la dernière édition.
l
0 Organisation internationale de normalisation, 1986
Imprimé en Suisse
ISO 6557/1-1986 (F)
NORME INTERNATIONALE
Fruits, légumes et produits dérivés - Détermination de la
teneur en acide ascorbique -
Partie 1: Méthode de référence
3 Réactifs
1 Objet et domaine d’application
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue, et
La présente partie de I’ISO 6557 spécifie la methode de réfé-
l’eau utilisée doit être de l’eau distillee ou de pureté équivalente.
rence pour la détermination de la teneur globale en acide ascor-
bique et en acide déhydroascorbique par spectrométrie de fluo-
rescence moléculaire dans les fruits, légumes et produits dérivés.
3.1 Dichlorhydrate d’o-ph6nyNnediamine
(C6H8N2, 2HCI), solution à 0,2 g/l.
Préparer cette solution extemporanément.
2 Principe
3.2 Acétate de sodium trihydrate (CH&OONa, 3H20),
Transformation de l’acide ascorbique présent en acide déhydro-
solution à 500 g/l.
ascorbique par action du charbon actif.
3.3 Acide borique/acétate de sodium, solution.
Réaction de l’acide déhydroascorbique ainsi obtenu avec
I’o-phénylénediamine (OPDA) pour donner un composé fluo-
Dissoudre 3 g d’acide borique (H3B03) dans 100 ml de solution
restent :
d’acétate de sodium (3.2).
Préparer cette solution extemporanément.
3.4 Acide ascorbique, solution étalon a 1 g/l.
Peser, à 0,Ol mg prés, 50 mg d’acide ascorbique préalablement
déshydraté dans un dessiccateur, à l’abri de la lumiére. Trans-
vaser quantitativement dans une fiole jaugée de 50 ml et ame-
(OPDA) (Acide déhydroascorbique)
ner au trait repère, juste avant l’utilisation avec la solution
d’extraction (3.5).
3.5 Solution d’extraction.
3.5.1 Acide m&aphosphorique/acide acétique.
Dans un bécher ou une fiole conique de 1 000 ml, introduire
30 g d’acide métaphosphorique (HP031 dans 80 ml d’acide acé-
tique cristallisable (CH$OOH) et environ 500 ml d’eau. Tiédir
et agiter doucement jusqu’à dissolution compléte.
(0x0-1 2,4 H-(dihydroxyéthyl-1,2)-3 furo [3,4-M quinoxaline)
Laisser refroidir. Transvaser quantitativement dans une fiole
jaugée de 1 000 ml. Ajuster au trait repère avec de l’eau.
OU
Sur un essai témoin, en présence d’acide borique, formation
d’un complexe H3B03 - acide déhydroascorbique ne pouvant
3.5.2 Acide m&aphosphorique/méthanol.
plus réagir avec I’OPDA. La fluorescence parasite seule sub-
siste, ce qui permet ainsi de l’éliminer de la réaction principale. Mélanger 3 volumes d’une solution d’acide métaphosphorique
à 4 % (mlm) avec 1 volume de méthanol.
NOTE - La teneur en acide déhydroascorbique seul peut être détermi-
née, en omettant l’étape du charbon actif. II est alors possible, par
NOTE - L’acide métaphosphorique disponible dans le commerce con-
soustraction, de déterminer la teneur en acide ascorbique seul.
tient de 40 à 44 % d’acide phosphorique (HPO,).

ISO 6557/1-1986 (FI
1)
3.6 Charbon actif. 5.2 Prise d’essai
Introduire dans une fiole conique (4.5), une quantité d’échantil-
Peser 200 g de charbon actif et ajouter 1 litre d’acide chlorhydri-
lon pour essai (5.11, pesée à 0,l mg près, telle qu’après dilution
queà 10 % (WV).
avec la solution d’extraction, la teneur en acide ascorbique et
en acide déhydroascorbique soit comprise entre 0 et 50 mg/I.
Porter à ébullition, puis filtrer sur filtre en verre fritté de porosité
...