ISO 8128-1:1993

SLOVENSKI STANDARD
SIST ISO 8128-1:2000
01-december-2000
-DEROþQLVRN]JRãþHQLMDEROþQLVRNLQSLMDþH]MDEROþQLPVRNRP'RORþHYDQMH
SDWXOLQDGHO0HWRGDXSRUDEHWHNRþLQVNHNURPDWRJUDILMHYLVRNHORþOMLYRVWL
Apple juice, apple juice concentrates and drinks containing apple juice -- Determination
of patulin content -- Part 1: Method using high-performance liquid chromatography
Jus de pommes, concentrés de jus de pommes et boissons à base de jus de pommes --
Détermination de la teneur en patuline -- Partie 1: Méthode par chromatographie en
phase liquide à haute performance
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO 8128-1:1993
ICS:
67.160.20 %UH]DONRKROQHSLMDþH Non-alcoholic beverages
SIST ISO 8128-1:2000 en
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

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SIST ISO 8128-1:2000

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SIST ISO 8128-1:2000
INTERNATIONAL
IS0
STANDARD
8128-1
First edition
1993-07-01
Apple juice, apple juice concentrates and
drinks containing apple juice -
Determination of patulin content -
Part 1:
Method using high-performance liquid
chromatography
Jus de pommes, concent& de jus de pommes et boissons ;i base de jus
de pommes
- Dgtermina tion de la teneur en patuline -
Partie 7: M&hode par chromatographie en phase liquide ;i haute
performance
Reference number
- - IS0 8128-1:1993(E)

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SIST ISO 8128-1:2000
IS0 8128=1:1993(E)
Foreword
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide
federation of national standards bodies (IS0 member bodies). The work
of preparing International Standards is normally carried out through IS0
technical committees. Each member body interested in a subject for
which a technical committee has been established has the right to be
represented on that committee. International organizations, governmental
and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. IS0
collaborates closely with the International Electrotechnical Commission
(IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are
circulated to the member bodies for voting. Publication as an International
Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting
a vote.
International Standard IS0 8128-1 was prepared by Technical Committee
ISO/TC 34, Agricultural food products, Sub-Committee SC 3, fruit and
vegetable products.
IS0 8128 consists of the following parts, under the general title Apple
juice, apple juice concentrates and drinks containing apple juice - Deter-
mination of patulin content:
- Part 1: Method using high-performance liquid chromatography
- Part 2: Method using thin-layer chromatography
Annex A of this part of IS0 8128 is for information only.
0 IS0 1993
All rights reserved. No part of this publication may be reproduced or utilized in any form or
by any means, electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without per-
mission in writing from the publisher.
I
International Organization for Standardization
Case Postale 56 l CH-1211 Geneve 20 l Switzerland
Printed in Switzerland
ii

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SIST ISO 8128-1:2000
INTERNATIONAL STANDARD IS0 8128=1:1993(E)
Apple juice, apple juice concentrates and drinks
containing apple juice - Determination of patulin
content -
Part 1:
Method using high-performance liquid chromatography
3.4 Acetate buffer, pH 4.
1 Scope
Mix 16,4 ml of dilute acetic acid
This part of IS0 8128 specifies a method using high-
[c(CH&OOH) = 0,2 mol/l] with 3,6 ml of sodium
performance liquid chromatography for the determi-
acetate [c(CH,COONa) = 0,2 mol/l].
nation of the patulin content of apple juice, apple juice
concentrates and drinks containing apple juice.
3.5 Acetic acid, glacial.
The limit of detection of the method is IO kg/l, based
3.6 Patulin standard solution (C,H&).
on 5 ml of ready-to-drink apple juice.
NOTE I IS0 8128-2 specifies a method using thin-layer
3.6.1 Preparation
chromatography.
Weigh, to the nearest 0,l mg, IO,0 mg of patulin in
a 100 ml one-mark volumetric flask and dissolve it in
the acetate buffer (3.4). Make up to the mark with the
2 Principle
acetate buffer.
Extraction of patulin from a test portion using ethyl
Pipette 10,O ml of this solution into another 100 ml
acetate, followed by partitioning of the extract with
one-mark volumetric flask and make up to the mark
aqueous sodium carbonate solution. Qualitative and
with the acetate buffer.
quantitative determination of the patulin content by
means of high-performance liquid chromatography
The patulin content of this standard solution is
(HPLC) using an ultraviolet (UV) detector.
IO kg/ml approximately.
Measure the absorbance at 276 nm of this standard
solution on an appropriate spectrometer using quartz
3 Reagents
cells of optical path length 10 mm.
Use only reagents of recognized analytical grade, and
NOTE 2 The preparation of the standard solution and the
water of HPLC grade.
control of its purity are based on reference [3]. ’
3.6.2 Calculation of the concentration
3.1 Solvent, ethyl acetate.
Calculate the concentration pp,, expressed in micro-
grams per millilitre, of the patulin solution (3.6.1) using
3.2 Mobile phase, acetonitrile, 10 % (VW) solution.
the formula
A x Mr x 1 000 x C
3.3 Extraction solution, 14 g/l aqueous solution of
Pps =
A276
anhydrous sodium carbonate.

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SIST ISO 8128-1:2000
IS0 81284:1993(E)
6.1.1 Extract 5,0 ml of the laboratory sample (diluted
with water if necessary) with 5,0 ml of ethyl acetate
A is the absorbance of the patulin standard
(3.1) for at least 1 min. Repeat the extraction twice
solution;
more using 5,
...

Iso
NORME
8128-1
INTERNATIONALE
Première édition
1993-07-01
Jus de pommes, concentrés de jus de
pommes et boissons à base de jus de
- Détermination de la teneur en
pommes
patuline -
Partie 1:
Méthode par chromatographie en phase
liquide à haute performance
Apple juice, apple juice concentrates and drinks containing apple juice -
Determina tion of pa tulin content -
Part 1: Method using high-performance liquid chromatography
Numéro de référence
ISO 8128-I :1993(F)

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ISO 8128=1:1993(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fedération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de
I’ISO). L’elaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre intéressé par une
étude a le droit de faire partie du comité technique cree a cet effet. Les
organisations internationales, gouvernementales et non gouvernemen-
tales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux. L’ISO colla-
bore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI)
en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptes par les comités techniques
sont soumis aux comites membres pour vote. Leur publication comme
Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des co-
mites membres votants.
La Norme internationale ISO 8128-1 a été elaboree par le comité techni-
que ISOnC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comite SC 3, Produits
dérivés des fruits et légumes.
L’ISO 8128 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre gé-
néral Jus de pommes, concentk de jus de pommes et boissons à base
de jus de pommes - Ddtermination de la teneur en pa tuline:
- Partie 1: Méthode chroma tographie en phase liquide à haute
Par
performance
- Partie 2: Méthode par chromatographie sur couche mince
L’annexe A de la présente partie de I’ISO 8128 est donnée uniquement a
titre d’information.
0 60 1993
Droits de reproduction réservés. Aucune partie de cette publication ne peut être reproduite
ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord écrit de l’editeur.
Organisation internationale
de normalisation
Case Postale 56 l CH-121 1
Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse
ii

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NORME INTERNATIONALE
ISO 8128-1:1993(F)
Jus de pommes, concentrés de jus de pommes et
boissons à base de jus de pommes - Détermination
de la teneur en patuline -
Partie 1:
Méthode par chromatographie en phase liquide à haute
performance
3.3 Solution d’extraction, solution aqueuse de car-
1 Domaine d’application
bonate de sodium anhydre à 14 g/l.
La présente partie de I’ISO 8128 prescrit une mé-
thode par chromatographie liquide à haute perfor-
3.4 Tampon d’acdtate, à pH 4.
mance (CLHP), pour la determination de la teneur en
16,4 ml d’acide acétique dilue
patuline dans les jus de pommes, les concentres de Mélanger
jus de pommes et les boissons a base de jus de [c(CH,COOH) = 0,2 mol/l] avec 3,6 ml d’acetate de
pommes. sodium [c(CH,COONa) = 0,2 mol/l].
La methode a une limite de detection de 10 pg/l, ba-
3.5 Acide aMique, glacial.
sée sur 5 ml de jus de pommes prêt à la consom-
mation.
3.6 Solution Malon de patuline (C7H60&
NOTE 1 L’ISO 8128-2 prescrit une méthode par chro-
matographie sur couche mince.
3.6.1 Préparation
2 Principe
Peser, a 0,I mg près, 10,O mg de patuline dans une
fiole jaugée de 100 ml et les dissoudre dans le tam-
Extraction de la patuline d’une prise d’essai dans
pon d’acétate (3.4). Ajuster au trait repère avec le
l’acétate d’éthyle suivie du partage de l’extrait avec
tampon d’acétate.
une solution aqueuse de carbonate de sodium. Esti-
Transférer, à l’aide d’une pipette, 10,O ml de la solu-
mation qualitative et quantitative par chromatographie
tion ainsi obtenue dans une autre fiole jaugée de
liquide à haute performance (CLHP), en utilisant un
100 ml et ajuster au trait repère avec le tampon
detecteur à ultraviolets (UV).
d’acétate.
3 Réactifs La teneur en patuline de cette solution étalon est de
10 pg/mI approximativement.
Utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique
Mesurer I’absorbance à 276 nm de cette solution
reconnue, et l’eau de qualité pour chromatographie li-
étalon a l’aide d’un spectromètre approprie, avec des
quide à haute performance.
cellules en quartz présentant un parcours optique de
10 mm.
3.1 Solvant, acétate d’éthyle.
NOTE 2 Le mode de préparation de la solution étalon
3.2 Phase mobile, 10 % (WV) d’acétonitrile dans
ainsi que la vbrification de sa pureté sont basés sur la réfé-
l’eau. rence [3].

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ISO 81284:1993(F)
3.6.2 Calcul de la concentration
6 Mode opératoire
Calculer la concentration, pns, exprimée en micro-
grammes par millilitre, de ‘ia solution de patuline
6.1 Préparation de la solution d’essai
(3.6.1) a l’aide de l’équation
A x M, x 1 000 x C
Diluer les concentrés de jus de pommes dans l’eau,
Pps =
en utilisant un mélange 1:5 de concentré et d’eau, en
A276
volume. Procéder ensuite comme pour les autres
où produits de la façon suivante.
A est I’absorbance de la solution Atalon de
patuline;
6.1.1 Extraire 5,0 ml de l’échantillon pour laboratoire
(dilué si nécessaire avec de l’eau) avec 5,0 ml d’acé-
est I’absorbance de la solution de patuline,
A276
tate d’éthyle (3.1) pendant au moins 1 min. Répéter
au maximum d’absorption de 276 nm (voir
l’extraction deux autres fois avec des portions de
note 3);
5,0 ml d’acétate d’éthyle. Regrouper les trois phases
d’acétate d’éthyle et extraire avec 2,0 ml de la solu-
est la masse moleculaire relative de la
tion de carbonate de sodium (3.3).
patuline;
ATTENTION - Procbder & l’extraction avec le car-
c est la constante de l’appareil (1 en géné-
bonate de sodiu
...

Iso
NORME
8128-1
INTERNATIONALE
Première édition
1993-07-01
Jus de pommes, concentrés de jus de
pommes et boissons à base de jus de
- Détermination de la teneur en
pommes
patuline -
Partie 1:
Méthode par chromatographie en phase
liquide à haute performance
Apple juice, apple juice concentrates and drinks containing apple juice -
Determina tion of pa tulin content -
Part 1: Method using high-performance liquid chromatography
Numéro de référence
ISO 8128-I :1993(F)

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ISO 8128=1:1993(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fedération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de
I’ISO). L’elaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre intéressé par une
étude a le droit de faire partie du comité technique cree a cet effet. Les
organisations internationales, gouvernementales et non gouvernemen-
tales, en liaison avec I’ISO participent également aux travaux. L’ISO colla-
bore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI)
en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptes par les comités techniques
sont soumis aux comites membres pour vote. Leur publication comme
Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des co-
mites membres votants.
La Norme internationale ISO 8128-1 a été elaboree par le comité techni-
que ISOnC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comite SC 3, Produits
dérivés des fruits et légumes.
L’ISO 8128 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre gé-
néral Jus de pommes, concentk de jus de pommes et boissons à base
de jus de pommes - Ddtermination de la teneur en pa tuline:
- Partie 1: Méthode chroma tographie en phase liquide à haute
Par
performance
- Partie 2: Méthode par chromatographie sur couche mince
L’annexe A de la présente partie de I’ISO 8128 est donnée uniquement a
titre d’information.
0 60 1993
Droits de reproduction réservés. Aucune partie de cette publication ne peut être reproduite
ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord écrit de l’editeur.
Organisation internationale
de normalisation
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Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse
ii

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ISO 8128-1:1993(F)
Jus de pommes, concentrés de jus de pommes et
boissons à base de jus de pommes - Détermination
de la teneur en patuline -
Partie 1:
Méthode par chromatographie en phase liquide à haute
performance
3.3 Solution d’extraction, solution aqueuse de car-
1 Domaine d’application
bonate de sodium anhydre à 14 g/l.
La présente partie de I’ISO 8128 prescrit une mé-
thode par chromatographie liquide à haute perfor-
3.4 Tampon d’acdtate, à pH 4.
mance (CLHP), pour la determination de la teneur en
16,4 ml d’acide acétique dilue
patuline dans les jus de pommes, les concentres de Mélanger
jus de pommes et les boissons a base de jus de [c(CH,COOH) = 0,2 mol/l] avec 3,6 ml d’acetate de
pommes. sodium [c(CH,COONa) = 0,2 mol/l].
La methode a une limite de detection de 10 pg/l, ba-
3.5 Acide aMique, glacial.
sée sur 5 ml de jus de pommes prêt à la consom-
mation.
3.6 Solution Malon de patuline (C7H60&
NOTE 1 L’ISO 8128-2 prescrit une méthode par chro-
matographie sur couche mince.
3.6.1 Préparation
2 Principe
Peser, a 0,I mg près, 10,O mg de patuline dans une
fiole jaugée de 100 ml et les dissoudre dans le tam-
Extraction de la patuline d’une prise d’essai dans
pon d’acétate (3.4). Ajuster au trait repère avec le
l’acétate d’éthyle suivie du partage de l’extrait avec
tampon d’acétate.
une solution aqueuse de carbonate de sodium. Esti-
Transférer, à l’aide d’une pipette, 10,O ml de la solu-
mation qualitative et quantitative par chromatographie
tion ainsi obtenue dans une autre fiole jaugée de
liquide à haute performance (CLHP), en utilisant un
100 ml et ajuster au trait repère avec le tampon
detecteur à ultraviolets (UV).
d’acétate.
3 Réactifs La teneur en patuline de cette solution étalon est de
10 pg/mI approximativement.
Utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique
Mesurer I’absorbance à 276 nm de cette solution
reconnue, et l’eau de qualité pour chromatographie li-
étalon a l’aide d’un spectromètre approprie, avec des
quide à haute performance.
cellules en quartz présentant un parcours optique de
10 mm.
3.1 Solvant, acétate d’éthyle.
NOTE 2 Le mode de préparation de la solution étalon
3.2 Phase mobile, 10 % (WV) d’acétonitrile dans
ainsi que la vbrification de sa pureté sont basés sur la réfé-
l’eau. rence [3].

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ISO 81284:1993(F)
3.6.2 Calcul de la concentration
6 Mode opératoire
Calculer la concentration, pns, exprimée en micro-
grammes par millilitre, de ‘ia solution de patuline
6.1 Préparation de la solution d’essai
(3.6.1) a l’aide de l’équation
A x M, x 1 000 x C
Diluer les concentrés de jus de pommes dans l’eau,
Pps =
en utilisant un mélange 1:5 de concentré et d’eau, en
A276
volume. Procéder ensuite comme pour les autres
où produits de la façon suivante.
A est I’absorbance de la solution Atalon de
patuline;
6.1.1 Extraire 5,0 ml de l’échantillon pour laboratoire
(dilué si nécessaire avec de l’eau) avec 5,0 ml d’acé-
est I’absorbance de la solution de patuline,
A276
tate d’éthyle (3.1) pendant au moins 1 min. Répéter
au maximum d’absorption de 276 nm (voir
l’extraction deux autres fois avec des portions de
note 3);
5,0 ml d’acétate d’éthyle. Regrouper les trois phases
d’acétate d’éthyle et extraire avec 2,0 ml de la solu-
est la masse moleculaire relative de la
tion de carbonate de sodium (3.3).
patuline;
ATTENTION - Procbder & l’extraction avec le car-
c est la constante de l’appareil (1 en géné-
bonate de sodiu
...