ISO 5508:1990

NORME
INTERNATIONALE
Deuxième édition
1990-09-l 5
Corps gras d’origines animale et végétale -
Analyse par chromatographie en phase gazeuse
des esters méthyliques d’acides gras
Animal and vegetable by gas chromafography
fats and oils - Analysis
of methyl esters of fat ‘ty acids
Numéro de référence
ISO 5508: 1990(F)

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 5508:1990(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres
de I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre inté-
ressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique créé
à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux tra-
vaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique
internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotech-
nique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techni-
ques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins
des comités membres votants.
La Norme internationale ISO 5508 a été élaborée par le comité techni-
que ISO/TC 34, Produits agrkoles alimentaires.
Cette deuxiéme édition annule et remplace la Premiere édition
(ISO 5508:1978), dont elle constitue une révision technique.
0 ISO 1990
Droits de reproduction réservés. Aucune partie de cette publication ne peut être repro-
duite pi utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou
mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord écrit de l’éditeur.
Organisation internationale de normalisation
Case Postale 56 l CH-1211 Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse
ii

---------------------- Page: 2 ----------------------
NORME INTERNATIONALE ISO 5508:1990(F)
Corps gras d’origines animale et végétale - Analyse par
chromatographie en phase gazeuse des esters méthyliques
d’acides gras
doubler la vitesse d’analyse mais présente des dangers.
1 Domaine d’application
II existe cependant des dispositifs de sécurité.
La présente Norme internationale donne des direc-
3.2 Gaz auxiliaires
tives générales pour la détermination par chro-
matographie en phase gazeuse de la composition
3.2.1 Hydrogéne (de pureté 2 99,9 %), ne conte-
qualitative et quantitative d’un mélange d’esters
nant pas d’impuretés organiques.
méthyliques d’acides gras obtenu selon I’ISO 5509,
en utilisant des colonnes remplies ou capillaires.
3.2.2 Air ou oxygène, ne contenant pas d’impuretés
La méthode n’est pas applicable aux acides gras
organiques.
polymérisés.
3.3 Produits d’étalonnage
2 Référence normative
Mélange d’esters méthyliques d’acides gras purs,
ou esters méthyliques d’un corps gras, de compo-
La norme suivante contient des dispositions qui, par
sition connue, si possible voisine de celle du corps
suite de la référence qui en est faite, constituent des
gras à analyser.
dispositions valables pour la présente Norme inter-
nationale. Au moment de la publication, l’édition in-
Prendre toutes précautions afin d’éviter l’oxydation
diquée était en vigueur. Toute norme est sujette à
des acides gras polyinsaturés.
révision et les parties prenantes des accords fondés
sur la présente Norme internationale sont invitées
4 Appareillage
à rechercher la possibilité d’appliquer l’édition la
plus récente de la norme indiquée ci-après. Les
Les prescriptions fournies concernent les appareils
membres de la CEI et de I’ISO possèdent le registre
usuels de chromatographie en phase gazeuse utili-
des Normes internationales en vigueur à un moment
sant des colonnes remplies et/ou capillaires et un
donné.
détecteur à ionisation de flamme. Tout appareillage
ayant la même efficacité et la même résolution que
ISO 55093978, Corps gras d’origines animale et vé-
celles définies en 5.1.2 convient.
gétale - Préparation des esters méthyliques d’aci-
des gras.
4.1 Appareil de chromatographie en phase
gazeuse.
3 Réactifs
L’appareil d-e chromatographie en phase gazeuse
doit comprendre les éléments suivants.
3.1 Gaz vecteur
4.1 .l Dispositif d’injection.
Gaz inerte (azote, hélium, argon, hydrogène, etc.)
Utiliser un dispositif d’injection
soigneusement desséché et contenant moins de
10 mg/kg d’oxygène.
a) soit avec des colonnes remplies, le dispositif
L’hydrogène que l’on utilise comme gaz vec- ayant le plus faible volume mort possible (dans
NOTE 1
teur uniquement avec les colonnes capillaires permet de
ce cas, il doit pouvoir être porté à une tempéra-

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 5508:1990(F)
polyadipate d’éthylèneglycol, etc.), cyanosili-
ture supérieure, de 20 OC à 50 OC, à celle de la
cones ou toute autre phase permettant la sépa-
colonne);
ration chromatographique (voir article 5). Le
sera compris entre
b) soit avec des colonnes capillaires, auquel cas le taux d’imprégnation
dispositif doit être spécialement concu pour 5 % (m/m) et 20 % (m/m). Pour certaines sépa-
l’utilisation de telles colonnes. Il peut être du rations, des phases apolaires pourront être utili-
type diviseur ou du type à injection totale en tête sées.
de colonne refroidie (injecteur ((on columw).
4.1.3.3 Conditionnement de la colonne.
En l’absence de corps gras contenant des
NOTE 2
acides gras 3 moins de 16 atomes de carbone, un in-
Après avoir, si possible, déconnecté la colonne du
jecteur à aiguille mobile peut être utilisé.
détecteur, porter progressivement le four à 185 OC
et maintenir la colonne venant d’être préparée, sous
un courant de gaz inerte de 20 ml/min à 60 ml/min
4.1.2 Four.
durant au moins 16 h à cette température, puis du-
Le four doit être en mesure de porter la colonne à
rant 2 h à 195 OC.
une température d’au moins 260 OC et de maintenir
la température choisie à 1 OC près avec une colonne
4.1.4 Colonne capillaire.
remplie et à 0,l OC près avec une colonne capillaire.
Cette dernière caractéristique est particulièrement
4.1.4.1 Tube, en matériau inerte vis-à-vis des corps
importante lorsqu’on utilise un tube en silice fondue.
à analyser, généralement en verre ou en silice fon-
due. Le diamètre interne doit être compris entre
L’utilisation d’un appareil équipé d’un program-
0,2 mm et 0,8 mm. Intérieurement, il devra subir des
mateur de température est recommandée dans tous
traitements appropriés (préparation de l’état de
les cas et, en particulier, en présence d’acides gras
surface, inactivation) avant de recevoir le film de
à moins de 16 atomes de carbone.
phase stationnaire. Une longueur de 25 m est suffi-
sante dans la plupart des cas.
4.1.3 Colonne remplie.
4.1.4.2 Phase stationnaire, principalement de type
4.1.3.1 Colonne, en matériau inerte vis-à-vis des
polyglycols [poly(éthylène glycol) 20000], polyes-
corps à analyser: verre, ou, à défaut, acier inoxyda-
ters (polysuccinate de butanediol) ou polysiloxanes
ble, ayant les dimensions suivantes:
polaires (cyanosilicones). Les colonnes greffées, ou
réticulées, conviennent.
a) Longueur: de 1 m à 3 m. Une colonne rela-
Toutefois les polysiloxanes polaires risquent de
tivement courte sera utilisée dans le cas où des NOTE 5
donner des difficultés dans l’identification et la séparation
acides gras à longue chaîne (> C~O) sont pré-
de l’acide linolénique et des acides en CzO.
sents. Dans le cas de la détermination des aci-
des en C4 et en CG, il est recommandé d’utiliser
Les épaisseurs de film doivent être faibles: 0,l prn
une colonne de 2 m.
à 0,2 pm.
b) Diamètre intérieur: de 2 mm à 4 mm.
4.1.4.3 Montage et conditionnement de la colonne.
NOTES
Respecter les précautions habituelles de montage
3 Si des constituants polyinsaturés à plus de trois dou-
des colonnes capillaires, c’est-à-dire la disposition
bles liaisons sont présents, une colonne en acier inoxy-
de la colonne dans le four (support), le choix et le
dable peut provoquer leur décomposition.
montage des joints (étanchéité), le positionnement
des extrémités de la colonne dans l’injecteur et le
Un système à double colonne remplie peut être utilisé.
4
détecteur (réduction des volumes morts). Mettre la
colonne sous gaz vecteur [par exemple, 0,3 bar
4.1.3.2 Remplissage, comprenant les éléments sui-
(30 kPa) pour une colonne de 25 m de longueur et
vants:
d’un diamètre intérieur de 0,3 mm].
a) Support: terre de diatomées lavee aux acides et
Conditionner la colonne par programmation de la
silanisée, ou tout autre support inerte pouvant
température du four à 3 OC/min depuis la tempéra-
convenir, avec un étroit intervalle de granulo-
ture ambiante jusqu’à une température inférieure à
métrie (25 pm entre 125 prn et 200 pm), la di-
10 OC à la limite de décomposition de la phase sta-
moyenne étant liée au diamètre
mension
tionnaire. Maintenir à cette température 1 h, jusqu’à
intérieur et à la longueur de la colonne.
stabilisation de la ligne de base. Revenir à 180 OC
pour travailler dans des conditions isothermes.
b) Phase stationnaire: phase polaire de type poly-
ester exemple polysuccinate de
NOTE 6 Des colonnes préconditionnées adéquates sont
(par
diéthylèneglycol, polysuccinate de butanediol, disponibles commercialement.

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ISO 5508:1990(F)
4.1.5 Détecteur, de préférence capable d’être porté d) le débit du gaz vecteur;
à une température supérieure à celle de la colonne.
e) la résolution souhaitée;
4.2 Seringue.
f) l’importance de la prise d’essai, choisie de façon
La seringue doit avoir une capacité de 10 pl au telle que l’ensemble détecteur-électromètre
fournisse une réponse linéaire;
maximum et être graduée en 0,l pl.
g) la durée de l’analyse.
4.3 Enregistreur.
En général, les valeurs données dans le tableau 1
Lorsque la courbe enregistrée est utilisée pour cal-
et le tableau 2 seront celles donnant les résultats
culer la composition du mélange analysé, I’enregis-
désires, à savoir un nombre de plateaux théoriques,
treur doit être un appareil électronique de grande
au moins égal à 2000 par mètre de colonne pour le
précision, compatible avec l’appareillage utilisé, et
stéarate de méthyle, et élution de celui-ci en 15 min
ayant les caractéristiques suivantes:
environ.
a) vitesse de réponse inférieure à 1,5 s, de préfé-
Lorsque l’appareil le permet, l’injecteur devrait être
rence 1 s (la vitesse de réponse est le temps
à une température voisine de 200 OC, et le détecteur
nécessaire pour que la plume de l’enregistreur
à une température égale ou supérieure à celle de la
aille de 0 % à 90 % lors de l’introduction sou-
colonne.
daine d’un signal de 100 %);
En général, le rapport du débit d’hydrogène du dé-
b) largeur du papier, 20 cm minimum;
tecteur a ionisation de flamme à celui du gaz vec-
teur, varie de 1:2 à I:l, selon le diamètre de la
c) vitesse de déroulement du papier, réglable à des
colonne. Le débit d’oxygène est d’environ 5 à 10 fois
valeurs comprises entre 0,4 cm/min et
celui de l’hydrogène.
2,5 cm/min.
Tableau 1
4.4 Intégrateur ou calculateur (facultatif).
Diamètre intérieur de la
Vitesse du gaz vecteur
L’emploi d’un intégrateur électronique ou d’un cal- colonne
culateur permet un calcul rapide et précis. Celui-ci
ml/min
mm
doit fournir une réponse linéaire, avoir une sensi-
bilité suffisante, et la correction de la déviation de
15à25
2
la ligne de base doit être satisfaisante.
3 20 à 40
4 40 à 60
5 Rbde opératoire
Les détails opératoires donnés en 5.1 à 5.3 concer-
Tableau 2
nent l’emploi d’un détecteur à ionisation de flamme.
Concentration de la phase Température de la
stationnaire colonne
En variante, un appareil de chromatographie en
phase gazeuse avec un détecteur à conductibilité
O/Q (m/m) OC
thermique (catharomètre) peut être utilisé. Les
conditions opératoires doivent alors être modifiées
5 175
comme décrit à l’article 7. 10 180
15 185
20 185
5.1 Conditions d’essai
Choix des conditions optimales de travail
5.1.1
5.1.1.1 Sur colonne remplie
5.1 A .2 Sur colonne capillaire
Pour choisir les conditions de travail, il y a lieu de
Les caractéristiques d’efficacité et de perméabilité
tenir compte des variables suivantes:
des colonnes capillaires font que la séparation entre
a) la longueur et le diamètre de la colonne; constituants et la durée de l’analyse sont très dé-
pendantes du débit de gaz vecteur dans la colonne.
b) la nature et la quantité de la phase stati
...

NORME
INTERNATIONALE
Deuxième édition
1990-09-l 5
Corps gras d’origines animale et végétale -
Analyse par chromatographie en phase gazeuse
des esters méthyliques d’acides gras
Animal and vegetable by gas chromafography
fats and oils - Analysis
of methyl esters of fat ‘ty acids
Numéro de référence
ISO 5508: 1990(F)

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ISO 5508:1990(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres
de I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre inté-
ressé par une étude a le droit de faire partie du comité technique créé
à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux tra-
vaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique
internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotech-
nique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techni-
ques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins
des comités membres votants.
La Norme internationale ISO 5508 a été élaborée par le comité techni-
que ISO/TC 34, Produits agrkoles alimentaires.
Cette deuxiéme édition annule et remplace la Premiere édition
(ISO 5508:1978), dont elle constitue une révision technique.
0 ISO 1990
Droits de reproduction réservés. Aucune partie de cette publication ne peut être repro-
duite pi utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou
mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord écrit de l’éditeur.
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Imprimé en Suisse
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Corps gras d’origines animale et végétale - Analyse par
chromatographie en phase gazeuse des esters méthyliques
d’acides gras
doubler la vitesse d’analyse mais présente des dangers.
1 Domaine d’application
II existe cependant des dispositifs de sécurité.
La présente Norme internationale donne des direc-
3.2 Gaz auxiliaires
tives générales pour la détermination par chro-
matographie en phase gazeuse de la composition
3.2.1 Hydrogéne (de pureté 2 99,9 %), ne conte-
qualitative et quantitative d’un mélange d’esters
nant pas d’impuretés organiques.
méthyliques d’acides gras obtenu selon I’ISO 5509,
en utilisant des colonnes remplies ou capillaires.
3.2.2 Air ou oxygène, ne contenant pas d’impuretés
La méthode n’est pas applicable aux acides gras
organiques.
polymérisés.
3.3 Produits d’étalonnage
2 Référence normative
Mélange d’esters méthyliques d’acides gras purs,
ou esters méthyliques d’un corps gras, de compo-
La norme suivante contient des dispositions qui, par
sition connue, si possible voisine de celle du corps
suite de la référence qui en est faite, constituent des
gras à analyser.
dispositions valables pour la présente Norme inter-
nationale. Au moment de la publication, l’édition in-
Prendre toutes précautions afin d’éviter l’oxydation
diquée était en vigueur. Toute norme est sujette à
des acides gras polyinsaturés.
révision et les parties prenantes des accords fondés
sur la présente Norme internationale sont invitées
4 Appareillage
à rechercher la possibilité d’appliquer l’édition la
plus récente de la norme indiquée ci-après. Les
Les prescriptions fournies concernent les appareils
membres de la CEI et de I’ISO possèdent le registre
usuels de chromatographie en phase gazeuse utili-
des Normes internationales en vigueur à un moment
sant des colonnes remplies et/ou capillaires et un
donné.
détecteur à ionisation de flamme. Tout appareillage
ayant la même efficacité et la même résolution que
ISO 55093978, Corps gras d’origines animale et vé-
celles définies en 5.1.2 convient.
gétale - Préparation des esters méthyliques d’aci-
des gras.
4.1 Appareil de chromatographie en phase
gazeuse.
3 Réactifs
L’appareil d-e chromatographie en phase gazeuse
doit comprendre les éléments suivants.
3.1 Gaz vecteur
4.1 .l Dispositif d’injection.
Gaz inerte (azote, hélium, argon, hydrogène, etc.)
Utiliser un dispositif d’injection
soigneusement desséché et contenant moins de
10 mg/kg d’oxygène.
a) soit avec des colonnes remplies, le dispositif
L’hydrogène que l’on utilise comme gaz vec- ayant le plus faible volume mort possible (dans
NOTE 1
teur uniquement avec les colonnes capillaires permet de
ce cas, il doit pouvoir être porté à une tempéra-

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polyadipate d’éthylèneglycol, etc.), cyanosili-
ture supérieure, de 20 OC à 50 OC, à celle de la
cones ou toute autre phase permettant la sépa-
colonne);
ration chromatographique (voir article 5). Le
sera compris entre
b) soit avec des colonnes capillaires, auquel cas le taux d’imprégnation
dispositif doit être spécialement concu pour 5 % (m/m) et 20 % (m/m). Pour certaines sépa-
l’utilisation de telles colonnes. Il peut être du rations, des phases apolaires pourront être utili-
type diviseur ou du type à injection totale en tête sées.
de colonne refroidie (injecteur ((on columw).
4.1.3.3 Conditionnement de la colonne.
En l’absence de corps gras contenant des
NOTE 2
acides gras 3 moins de 16 atomes de carbone, un in-
Après avoir, si possible, déconnecté la colonne du
jecteur à aiguille mobile peut être utilisé.
détecteur, porter progressivement le four à 185 OC
et maintenir la colonne venant d’être préparée, sous
un courant de gaz inerte de 20 ml/min à 60 ml/min
4.1.2 Four.
durant au moins 16 h à cette température, puis du-
Le four doit être en mesure de porter la colonne à
rant 2 h à 195 OC.
une température d’au moins 260 OC et de maintenir
la température choisie à 1 OC près avec une colonne
4.1.4 Colonne capillaire.
remplie et à 0,l OC près avec une colonne capillaire.
Cette dernière caractéristique est particulièrement
4.1.4.1 Tube, en matériau inerte vis-à-vis des corps
importante lorsqu’on utilise un tube en silice fondue.
à analyser, généralement en verre ou en silice fon-
due. Le diamètre interne doit être compris entre
L’utilisation d’un appareil équipé d’un program-
0,2 mm et 0,8 mm. Intérieurement, il devra subir des
mateur de température est recommandée dans tous
traitements appropriés (préparation de l’état de
les cas et, en particulier, en présence d’acides gras
surface, inactivation) avant de recevoir le film de
à moins de 16 atomes de carbone.
phase stationnaire. Une longueur de 25 m est suffi-
sante dans la plupart des cas.
4.1.3 Colonne remplie.
4.1.4.2 Phase stationnaire, principalement de type
4.1.3.1 Colonne, en matériau inerte vis-à-vis des
polyglycols [poly(éthylène glycol) 20000], polyes-
corps à analyser: verre, ou, à défaut, acier inoxyda-
ters (polysuccinate de butanediol) ou polysiloxanes
ble, ayant les dimensions suivantes:
polaires (cyanosilicones). Les colonnes greffées, ou
réticulées, conviennent.
a) Longueur: de 1 m à 3 m. Une colonne rela-
Toutefois les polysiloxanes polaires risquent de
tivement courte sera utilisée dans le cas où des NOTE 5
donner des difficultés dans l’identification et la séparation
acides gras à longue chaîne (> C~O) sont pré-
de l’acide linolénique et des acides en CzO.
sents. Dans le cas de la détermination des aci-
des en C4 et en CG, il est recommandé d’utiliser
Les épaisseurs de film doivent être faibles: 0,l prn
une colonne de 2 m.
à 0,2 pm.
b) Diamètre intérieur: de 2 mm à 4 mm.
4.1.4.3 Montage et conditionnement de la colonne.
NOTES
Respecter les précautions habituelles de montage
3 Si des constituants polyinsaturés à plus de trois dou-
des colonnes capillaires, c’est-à-dire la disposition
bles liaisons sont présents, une colonne en acier inoxy-
de la colonne dans le four (support), le choix et le
dable peut provoquer leur décomposition.
montage des joints (étanchéité), le positionnement
des extrémités de la colonne dans l’injecteur et le
Un système à double colonne remplie peut être utilisé.
4
détecteur (réduction des volumes morts). Mettre la
colonne sous gaz vecteur [par exemple, 0,3 bar
4.1.3.2 Remplissage, comprenant les éléments sui-
(30 kPa) pour une colonne de 25 m de longueur et
vants:
d’un diamètre intérieur de 0,3 mm].
a) Support: terre de diatomées lavee aux acides et
Conditionner la colonne par programmation de la
silanisée, ou tout autre support inerte pouvant
température du four à 3 OC/min depuis la tempéra-
convenir, avec un étroit intervalle de granulo-
ture ambiante jusqu’à une température inférieure à
métrie (25 pm entre 125 prn et 200 pm), la di-
10 OC à la limite de décomposition de la phase sta-
moyenne étant liée au diamètre
mension
tionnaire. Maintenir à cette température 1 h, jusqu’à
intérieur et à la longueur de la colonne.
stabilisation de la ligne de base. Revenir à 180 OC
pour travailler dans des conditions isothermes.
b) Phase stationnaire: phase polaire de type poly-
ester exemple polysuccinate de
NOTE 6 Des colonnes préconditionnées adéquates sont
(par
diéthylèneglycol, polysuccinate de butanediol, disponibles commercialement.

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ISO 5508:1990(F)
4.1.5 Détecteur, de préférence capable d’être porté d) le débit du gaz vecteur;
à une température supérieure à celle de la colonne.
e) la résolution souhaitée;
4.2 Seringue.
f) l’importance de la prise d’essai, choisie de façon
La seringue doit avoir une capacité de 10 pl au telle que l’ensemble détecteur-électromètre
fournisse une réponse linéaire;
maximum et être graduée en 0,l pl.
g) la durée de l’analyse.
4.3 Enregistreur.
En général, les valeurs données dans le tableau 1
Lorsque la courbe enregistrée est utilisée pour cal-
et le tableau 2 seront celles donnant les résultats
culer la composition du mélange analysé, I’enregis-
désires, à savoir un nombre de plateaux théoriques,
treur doit être un appareil électronique de grande
au moins égal à 2000 par mètre de colonne pour le
précision, compatible avec l’appareillage utilisé, et
stéarate de méthyle, et élution de celui-ci en 15 min
ayant les caractéristiques suivantes:
environ.
a) vitesse de réponse inférieure à 1,5 s, de préfé-
Lorsque l’appareil le permet, l’injecteur devrait être
rence 1 s (la vitesse de réponse est le temps
à une température voisine de 200 OC, et le détecteur
nécessaire pour que la plume de l’enregistreur
à une température égale ou supérieure à celle de la
aille de 0 % à 90 % lors de l’introduction sou-
colonne.
daine d’un signal de 100 %);
En général, le rapport du débit d’hydrogène du dé-
b) largeur du papier, 20 cm minimum;
tecteur a ionisation de flamme à celui du gaz vec-
teur, varie de 1:2 à I:l, selon le diamètre de la
c) vitesse de déroulement du papier, réglable à des
colonne. Le débit d’oxygène est d’environ 5 à 10 fois
valeurs comprises entre 0,4 cm/min et
celui de l’hydrogène.
2,5 cm/min.
Tableau 1
4.4 Intégrateur ou calculateur (facultatif).
Diamètre intérieur de la
Vitesse du gaz vecteur
L’emploi d’un intégrateur électronique ou d’un cal- colonne
culateur permet un calcul rapide et précis. Celui-ci
ml/min
mm
doit fournir une réponse linéaire, avoir une sensi-
bilité suffisante, et la correction de la déviation de
15à25
2
la ligne de base doit être satisfaisante.
3 20 à 40
4 40 à 60
5 Rbde opératoire
Les détails opératoires donnés en 5.1 à 5.3 concer-
Tableau 2
nent l’emploi d’un détecteur à ionisation de flamme.
Concentration de la phase Température de la
stationnaire colonne
En variante, un appareil de chromatographie en
phase gazeuse avec un détecteur à conductibilité
O/Q (m/m) OC
thermique (catharomètre) peut être utilisé. Les
conditions opératoires doivent alors être modifiées
5 175
comme décrit à l’article 7. 10 180
15 185
20 185
5.1 Conditions d’essai
Choix des conditions optimales de travail
5.1.1
5.1.1.1 Sur colonne remplie
5.1 A .2 Sur colonne capillaire
Pour choisir les conditions de travail, il y a lieu de
Les caractéristiques d’efficacité et de perméabilité
tenir compte des variables suivantes:
des colonnes capillaires font que la séparation entre
a) la longueur et le diamètre de la colonne; constituants et la durée de l’analyse sont très dé-
pendantes du débit de gaz vecteur dans la colonne.
b) la nature et la quantité de la phase stati
...

SLOVENSKI SIST ISO 5508
prva izdaja
STANDARD
junij 1995
Rastlinske in `ivalske ma{~obe in olja - Dolo~anje sestave
ma{~obnih kislin z metodo plinske kromatografije (prevzet standard
ISO 5508:1990 z metodo platnice)
Animal and vegetable fats and oils - Analysis by gas chromatography of
methyl esters of fatty acids
Corps gras d'origines animale et végétale - Analyse par chromatographie
en phase gazeuse des esters méthyliques d'acides gras
Deskriptorji: kmetijski pridelki, ma{~obe, `ivalske ma{~obe, rastlinske ma{~obe, olja,
`ivalska olja, rastlinska olja, ma{~obne kisline, metil ester, plinska
kromatografija
Referen~na {tevilka
ICS 67.200.10 SIST ISO 5508:1995 (en)
Nadaljevanje na straneh od II do III in 1 do 7
© Standard je zalo`il in izdal Urad Republike Slovenije za standardizacijo in meroslovje pri Ministrstvu za znanost in tehnologijo.
Razmno`evanje ali kopiranje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

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SIST ISO 5508 : 1995
UVOD
Standard SIST ISO 5508, Rastlinske in `ivalske ma{~obe in olja - Dolo~anje sestave
ma{~obnih kislin z metodo plinske kromatografije, prva izdaja, 1995, ima status slovenskega
standarda in je z metodo platnice prevzet mednarodni standard ISO 5508, Animal and
vegetable fats and oils - Analysis by gas chromatography of methyl esters of fatty acids,
second edition, 1990-09-15.
PREDGOVOR
Mednarodni standard ISO 5508:1990 je pripravil tehni~ni odbor Mednarodne organizacije za
standardizacijo ISO/TC 34 Kmetijski pridelki in `ivilski proizvodi.
Odlo~itev za prevzem tega standarda po metodi platnice je sprejela delovna skupina WG 2
Oljnice ter rastlinske in `ivalske ma{~obe in olja v okviru tehni~nega odbora USM/TC
Kmetijski pridelki in `ivilski proizvodi.
Ta slovenski standard je dne 1995-06-16 odobril direktor USM.
ZVEZA S STANDARDI
Ta standard skupaj z naslednjimi slovenskimi standardi, prevzetimi mednarodnimi standardi
ISO, ureja kontrolo kakovosti oljnic ter rastlinskih in `ivalskih ma{~ob in olj:
SIST ISO 542 (en) Oljnice - Vzor~enje
SIST ISO 658 (en) Oljnice - Dolo~anje vsebnosti ne~isto~
SIST ISO 659 (en) Oljnice - Dolo~anje heksanskega (ali petroleterskega)
ekstrakta, imenovanega "vsebnost olja"
SIST ISO 661 (en) Rastlinske in `ivalske ma{~obe in olja - Priprava preskusnega
vzorca
SIST ISO 664 (en) Oljnice - Zmanj{anje laboratorijskega vzorca na preskusni
vzorec
SIST ISO 665 (en) Oljnice - Dolo~anje vsebnosti vlage in hlapnih snovi
SIST ISO 729 (en) Oljnice - Dolo~anje kislosti olja
SIST ISO 5509 (en) Rastlinske in `ivalske ma{~obe in olja - Priprava metil estrov
ma{~obnih kislin
SIST ISO 5555 (en) Rastlinske in `ivalske ma{~obe in olja - Vzor~enje
OSNOVA ZA IZDAJO STANDARDA
- Prevzem standarda ISO 5508:1990.
- Ta slovenski standard pokriva podro~je JUS E.K8.039:90.
II

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SIST ISO 5508 : 1995
OPOMBI
- Povsod, kjer se v besedilu standarda uporablja izraz "mednarodni standard", to pomeni
v SIST ISO 5508:1995 "slovenski standard".
- Uvod in predgovor nista sestavni del standarda.
Po mnenju Ministrstva za informiranje Republike Slovenije z dne 18. februarja 1992, {tev. 23/96-92, spada ta publikacija med
proizvode informativne narave iz 13. to~ke tarifne {tevilke 3, za katere se pla~uje 5-odstotni prometni davek.
III

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ISO
INTERNATIONAL
STANDARD 5508
Second edition
1990-09-15
Animal and vegetable fats and oils - Analysis
by gas chromatography of methyl esters of fatty
acids
Corps gras d ’origines animale et vegetale - Analyse par
Chromatographie en Phase gazeuse des esters mbthyliques d ’acides gras
Reference number
ISO 5508: 199O(E)

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ISO 5508:1990(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide
federation of national Standards bodies (ISO member bodies). The work
of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Esch member body interested in a subject for
which a technical committee has been established has the right to be
represented on that committee. International organizations, govern-
mental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the
work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are
circulated to the member bodies for voting. Publication as an Interna-
tional Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies
casting a vote.
International Standard ISO 5508 was prepared by Technical Committee
ISO/TC 34, Agricultural food products.
This second edition cancels and replaces the first edition
(ISO 5508:1978), of which it constitutes a technical revision.
0 ISO 1990
All rights reserved. No part of this publication may be reproduced or utilized in any form
or by any means, electronie or mechanical, including photocopying and microfilm, without
Permission in writing from the publisher.
International Organization for Standardization
Case Postale 56 l CH-121 1 Geneve 20 0 Switzerland
Printed in Switzerland
ii

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ISO 5508:1990(E)
INTERNATIONAL STANDARD
Animal and vegetable fats and oils - Analysis by gas
chromatography of methyl esters of fatty acids
3.2.2 Air or Oxygen, free from organic impurities.
1 Scope
This International Standard gives general guidance
3.3 Reference Standard
for the application of gas chromatography, using
packed or capillary columns, to determine the qual-
A mixture of methyl esters of pure fatty acids, or the
itative and quantitative composition of a mixture of
methyl esters of a fat of known composition, prefer-
fatty acid methyl esters obtained in accordance with
ably similar to that of the fatty matter to be analysed.
the method specified in ISO 5509.
Care shall be taken to prevent the Oxidation of
The method is not applicable to polymerized fatty
polyunsaturated fatty acids.
acids.
2 Normative reference
4 Apparatus
The following Standard contains provisions which,
The instructions given relate to the usual equipment
through reference in this text, constitute provisions
used for gas chromatography, employing packed
of this International Standard. At the time of publi-
and/or capillary columns and a flame-ionization de-
cation, the edition indicated was valid. All Standards
tector. Any apparatus giving the efficiency and re-
are subject to revision, and Parties to agreements
Solution specified in 5.1.2 is suitable.
based on this International Standard are encour-
aged to investigate the possibility of applying the
most recent edition of the Standard indicated below.
4.1 Gas chromatograph.
Members of IEC and ISO maintain registers of cur-
The gas chromatograph shall comprise the following
rently valid International Standards.
elements.
ISO 5509:1978, Animal and vegetable fats and oils -
Reparation of methyl esters of fatty acids.
4.1.1 Injection System.
Use an injection System either
3 Reagents
a) with packed columns, having the least dead-
3.1 Carrier gas
space possible (in this case the injection System
shall be capable of being heated to a temper-
Inert gas (nitrogen, helium, argon, hydrogen, etc.),
ature 20 OC to 50 OC higher than that of the col-
thorougly dried and with an Oxygen content of less
umn), or
than 10 mg/kg.
b) with capillary columns, in which case the in-
NOTE 1 Hydrogen, which is used as a carrier gas only
jection System shall be specially designed for
with capillary columns, tan double the Speed of analysis
use with such columns. lt may be of the Split type
but is hazardous. Safety devices are available.
or it may be of the splitless on column injector
tY Pe-
3.2 Auxiliary gases
N(ITE 2 In the absence of fatty acids with less than
3.2.1 Hydrogen (purity 2 99,9 %), free from or- 16 carbon atoms, a moving needle injector may be
used.
ganic impurities.

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ISO 5508:1990(E)
4.1.4 Capilfary column.
4.1.2 Oven.
The oven shall be capable of heating the column to
4.1.4.1 Tube, made of a material inert to the sub-
a temperature of at least 260 OC and of maintaining
stances to be analysed (usually glass or fused
the desired temperature to within 1 OC with a packed
silica). The internal diameter shall be between
column and within 0,l OC with a capillary column.
0,2 mm and 0,8 mm. The internal surface shall un-
The last requirement is particularly important when
dergo an appropriate treatment (e.g. surface prepa-
a fused silica tube is used.
ration, inactivation) before receiving the stationary
Phase coating. A length of 25 m is sufficient in most
The use of temperature-programmed heating is re-
cases.
commended in all cases, and in particular for fatty
acids with less than 16 carbon atoms.
4.1.4.2 Stationary Phase, usually of the type
polyglycol [poly(ethylene glycol) 20 000], Polyester
4.1.3 Packed column, (butanediol polysuccinate) or polar polysiloxane
(cyanosilicones). Bonded (cross-linked) columns are
suitable.
4.1.3.1 Column, constructed of a material inert to
the substances to be analysed (i.e. glass or stain-
NOTE 5 There is a risk of polar polysiloxanes giving rise
less steel) having the following dimensions.
to difficulties in the identification and Separation of
linolenic acid and Czo acids.
a) Length: 1 m to 3 m. A relatively short column
should be used when long-chain fatty acids
The coatings shall be thin, i.e. 0,l Fm to 0,2 Pm.
(above C&) are present. When analysing acids
with 4 or 6 carbon atoms, it is recommended that
4.1.4.3 Assembly and conditioning of the column.
a column 2 m in length is used.
Observe the normal precautions for assembling
b) Internal diameter: 2 mm to 4 mm.
capillary columns, i.e. arrangement of the column in
the oven (support), choice and assembly of joints
NOTES
(leak tightness), positioning of the ends of the col-
umn in the injector and the detector (reduction of
3 If polyunsaturated components with more than three
dead-spaces). Place the column under a flow of
double bonds are present, they may be decomposed in a
carrier gas [e.g. 0,3 bar (30 kPa) for a column of
stainless steel column.
length 25 mm and internal diameter 0,3 mm].
4 A System with packed,twin columns may be used.
Condition the column by temperature programming
of the oven at 3 “Umin from ambient temperature
4.1.3.2 Packing, comprising the following elements.
to a temperature 10 “C below the decomposure limit
of the stationary Phase. Maintain the oven at this
a) Support: Acid-washed and silanized diatom-
temperature for 1 h until stabilization of the base-
aceous earth, or other suitable inert support with
line. Return it to 180 OC to work under isothermal
a narrow range of grain size (25 pm range be-
conditions.
tween the limits 125 Pm to 200 Pm), the average
grain size being related to the internal diameter
pre-conditioned columns are available
NOTE 6 Suitably
and length of the column.
commercially.
b) Stationary Phase: Polyester type of polar liquid
4.15 Detector, preferably capable of being heated
(e.g. diethylene glycol polysuccinate, butanediol
to a temperature above that of the column.
polysuccinate, ethyleneglycol polyadipate, etc.),
cyanosilicones or any other liquid permitting the
4.2 Syringe.
chromatographic Separation required (see
clause 5). The *stationary Phase should amount
The Syringe shall have a maximum capacity of
to 5 % (m/m) to 20 % (mlm) of the packing. A
10 pl, and be graduated in 0,l pl divisions.
non-polar stationary Phase tan be used for cer-
tain Separations.
4.3 Recorder.
If the recorder curve is to be used to calculate the
4.1.3.3 Conditioning of the column.
composition of the mixture analysed, an electronie
recorder of high precision, compatible with the ap-
With the column disconnected, if possible, from the
paratus used, is required. The recorder shall have
detector, gradually heat the oven to 185 OC and pass
the following characteristics:
a current of inert gas through the freshly prepared
column at a rate of 20 ml/min to 60 ml/min for at
a) rate of response, below 1,5 s, preferably 1 s (the
least 16 h at this temperature, and for a further 2 h
rate of response is the time taken for the re-
at 195 OC.
2

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ISO 5508:1990(E)
cording pen to pass from 0 % to 90 % following at a temperature equal to or higher than that of the
the sudden introduction of a 100 % Signal); column.
As a rule, the ratio of the flow-rate of the hydrogen
b) width of the Paper, 20 cm minimum;
supplied to the flame-ionization detector to that of
the carrier gas varies from 1:2 to 1:l depending on
c) Paper Speed, adjustable to values between
the diameter of the column. The flow of Oxygen is
0,4 cm/min and 2,5 cm/min.
about 5 to IO times that of the hydrogen.
4.4 Integrator or calculator (optional).
Table 1
Rapid and accurate calculation tan be performed
Internat diameter
with the help of an electronie integrat
...