ISO 10872:2020

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 10872
Second edition
2020-05
Water and soil quality —
Determination of the toxic effect
of sediment and soil samples on
growth, fertility and reproduction of
Caenorhabditis elegans (Nematoda)
Qualité de l'eau et du sol — Détermination de l'effet toxique
d'échantillons de sédiment et de sol sur la croissance, la fertilité et la
reproduction de Caenorhabditis elegans (Nematodes)
Reference number
©
ISO 2020
© ISO 2020
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
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on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
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ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
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Fax: +41 22 749 09 47
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Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2020 – All rights reserved

Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Reagents and media . 3
6 Apparatus . 5
7 Reference substance . 6
8 Organisms . 7
8.1 Test organism . 7
8.2 Food organism . 7
9 Stock- and pre-cultures . 7
9.1 Stock cultures . 7
9.1.1 Caenorhabditis elegans . 7
9.1.2 Escherichia coli. 7
9.2 Pre-culture . 8
10 Procedure. 8
10.1 Preparation of food medium . 8
10.2 Preparation of test material and controls . 8
10.2.1 Soil . 8
10.2.2 Sediment . 9
10.2.3 Pore water, elutriate, extract. 9
10.2.4 Solution of reference substance . . 9
10.3 Test .10
10.4 Nematode separation .10
10.5 Measurements and calculations .10
10.5.1 Recovery .10
10.5.2 Males .10
10.5.3 Growth and fertility .11
10.5.4 Reproduction .11
10.6 Timetable of the test .12
11 Validity criteria .13
12 Expression of results .13
13 Test report .14
Annex A (informative) Determination of maximal water holding capacity (WHC ) .15
max
Annex B (informative) Figures and photos of adult worms C. elegans .16
Annex C (informative) Micropipette method (10.3) .18
Annex D (informative) Performance data .19
Bibliography .22
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/ directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/ patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see www .iso .org/
iso/ foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 147, Water quality, Subcommittee SC 5,
Biological method.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 10872:2010), which has been technically
revised. The main changes compared to the previous edition are as follows:
— the title has been changed to achieve a better perception in the field soil toxicity testing;
— for soil testing, the method has been modified in terms of a reduced water content of the test
material;
— cited references and standards have been refreshed;
— information on the control soil and restrictions for tested soils has been added;
— the document has been editorially revised.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/ members .html.
iv © ISO 2020 – All rights reserved

Introduction
[1] [2]
Nematodes are one of the most abundant and species-rich metazoans in sediments and soils and
possess key positions in benthic and soil food webs due to the evolution of various feeding types
(bacterial, algal, fungal and plant feeders, omnivores, predators see References [3] and [4]). Moreover,
they are well acknowledged as environmental indicators for assessing the toxicity of chemicals and the
quality of sediments and soils (see References [5], [6], [7], [8] and [9]).
The test organism Caenorhabditis elegans (Maupas, N2 var. Bristol) is a bacterivorous nematode that is
found primarily in microbe-rich, decaying plant material (see Reference [10]) and belongs to the family
of Rhabditidae, frequently found in terrestrial soils and aquatic sediments (see References [11] and
[12]). Moreover, individuals of C. elegans were already found in sediments of polysaprobial fresh-water
[15]
systems (see References [13] and [14]). Due to its easy cultivation and short life cycle , C. elegans has
become a well-studied model organism in biomedical and ecotoxicological research (see References [16],
[17] and [18]).
[19]
The test is designed for measurement of the response to dissolved and particle-bound substances .
It applies to the testing of sediments, soils, waste, pore water, elutriates and aqueous extracts (see
e.g. References [20], [21], [22] and [23]).
INTERNATIONAL STANDARD ISO 10872:2020(E)
Water and soil quality — Determination of the toxic effect
of sediment and soil samples on growth, fertility and
reproduction of Caenorhabditis elegans (Nematoda)
WARNING — Persons using this document should be familiar with normal laboratory practice.
This document does not purport to address all of the safety problems, if any, associated with its
use. It is the responsibility of the user to establish appropriate safety and health practices.
IMPORTANT — It is absolutely essential that tests conducted according to this document be
carried out by suitably trained staff.
1 Scope
This document specifies a method for determining the toxicity of environmental samples on growth,
fertility and reproduction of Caenorhabditis elegans. The method applies to contaminated whole
freshwater sediment (maximum salinity 5 g/l), soil and waste, as well as to pore water, elutriates and
aqueous extracts that were obtained from contaminated sediment, soil and waste.
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 10872
Deuxième édition
2020-05
Qualité de l'eau et du sol —
Détermination de l'effet toxique
d'échantillons de sédiment et de
sol sur la croissance, la fertilité et
la reproduction de Caenorhabditis
elegans (Nematodes)
Water and soil quality — Determination of the toxic effect of
sediment and soil samples on growth, fertility and reproduction of
Caenorhabditis elegans (Nematoda)
Numéro de référence
©
ISO 2020
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2020
Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2020 – Tous droits réservés

Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d'application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Réactifs et milieux . 3
6 Appareillage . 6
7 Substance de référence . 7
8 Organismes . 7
8.1 Organisme d’essai . 7
8.2 Source nutritive . 7
9 Cultures mères et pré-cultures . 8
9.1 Cultures mères . 8
9.1.1 Caenorhabditis elegans . 8
9.1.2 Escherichia coli. 8
9.2 Pré-culture . 8
10 Mode opératoire. 8
10.1 Préparation du milieu nutritif. 8
10.2 Préparation du matériau d’essai et des témoins . 9
10.2.1 Sol . 9
10.2.2 Sédiment . 9
10.2.3 Eau interstitielle, élutriat, extrait .10
10.2.4 Solution de substance de référence .10
10.3 Essai .10
10.4 Séparation des nématodes .10
10.5 Mesurages et calculs .11
10.5.1 Taux de récupération .11
10.5.2 Mâles .11
10.5.3 Croissance et fertilité .11
10.5.4 Reproduction .12
10.6 Planification de l’essai .13
11 Critères de validité .13
12 Expression des résultats.14
13 Rapport d’essai .14
Annexe A (informative) Détermination de la capacité maximale de rétention d’eau (CRE ) .16
max
Annexe B (informative) Illustrations et photos de vers adultes C. elegans .17
Annexe C (informative) Méthode micropipette (10.3) .19
Annexe D (informative) Données relatives à la performance.20
Bibliographie .24
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/ directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/ brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/ iso/ fr/ avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 147, Qualité de l’eau, sous-comité
SC 5, Méthodes biologiques.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 10872:2010), qui a fait l’objet d’une
révision technique. Les principales modifications par rapport à l’édition précédente sont les suivantes:
— modification du titre afin d’atteindre une meilleure perception dans le domaine de la toxicité du sol;
— pour les essais sur sols, modification de la méthode en termes de réduction de la teneur en eau du
matériau d’essai;
— réactualisation des références et normes citées;
— ajout d’informations sur le sol témoin et de limitations applicables aux sols soumis à essai;
— révision éditoriale du document.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/ fr/ members .html.
iv © ISO 2020 – Tous droits réservés

Introduction
Les nématodes comptent parmi les métazoaires les plus abondants et les plus riches en espèces dans
[1] [2]
les sédiments et les sols et occupent des positions clés dans les réseaux trophiques benthiques
et les réseaux trophiques terrestres, en raison du développement des différents types d’alimentation
(bactérivores, alguivores, fongivores et herbivores, omnivores, prédateurs, voir Références [3] et [4]).
De plus, ils sont tous reconnus comme des indicateurs environnementaux pour évaluer la toxicité des
produits chimiques et la qualité des sédiments et des sols (voir Références [5], [6], [7], [8] et [9]).
L’organisme d’essai Caenorhabditis elegans (Maupas, N2 var. Bristol) est un nématode bactérivore que
l’on trouve principalement dans les matières végétales en décomposition riches en microbes (voir
Référence [10]) et appartient à la famille des Rhabditidae, souvent présents dans les sols terrestres
et les sédiments aquatiques (voir Références [11] et [12]). De plus, des individus de C. elegans ont déjà
être trouvés dans les sédiments de systèmes d’eau douce polysaprobes (voir Références [13] et [14]). En
[15]
raison de sa facilité de culture et de son cycle de vie court, C. elegans est devenu un organisme modèle
bien étudié dans le domaine de la recherche biomédicale et écotoxicologique (voir Références [16], [17]
et [18]).
[19]
L’essai est conçu pour mesurer la réponse aux substances dissoutes et liées à des particules. Il
s’applique aux sédiments, aux sols, aux déchets, à l’eau interstitielle, aux élutriats et aux extraits aqueux
(voir, par exemple, Références [20], [21], [22] et [23]).
NORME INTERNATIONALE ISO 10872:2020(F)
Qualité de l'eau et du sol — Détermination de l'effet
toxique d'échantillons de sédiment et de sol sur la
croissance, la fertilité et la reproduction de Caenorhabditis
elegans (Nematodes)
AVERTISSEMENT — Il convient que l’utilisateur du présent document connaisse bien les
pratiques courantes de laboratoire. Le présent document n’a pas pour but de traiter de tous les
problèmes de sécurité qui sont, le cas échéant, liés à son utilisation. Il incombe à l’utilisateu
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 10872
Deuxième édition
2020-05
Qualité de l'eau et du sol —
Détermination de l'effet toxique
d'échantillons de sédiment et de
sol sur la croissance, la fertilité et
la reproduction de Caenorhabditis
elegans (Nematodes)
Water and soil quality — Determination of the toxic effect of
sediment and soil samples on growth, fertility and reproduction of
Caenorhabditis elegans (Nematoda)
Numéro de référence
©
ISO 2020
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2020
Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
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Tél.: +41 22 749 01 11
Fax: +41 22 749 09 47
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2020 – Tous droits réservés

Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d'application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Réactifs et milieux . 3
6 Appareillage . 6
7 Substance de référence . 7
8 Organismes . 7
8.1 Organisme d’essai . 7
8.2 Source nutritive . 7
9 Cultures mères et pré-cultures . 8
9.1 Cultures mères . 8
9.1.1 Caenorhabditis elegans . 8
9.1.2 Escherichia coli. 8
9.2 Pré-culture . 8
10 Mode opératoire. 8
10.1 Préparation du milieu nutritif. 8
10.2 Préparation du matériau d’essai et des témoins . 9
10.2.1 Sol . 9
10.2.2 Sédiment . 9
10.2.3 Eau interstitielle, élutriat, extrait .10
10.2.4 Solution de substance de référence .10
10.3 Essai .10
10.4 Séparation des nématodes .10
10.5 Mesurages et calculs .11
10.5.1 Taux de récupération .11
10.5.2 Mâles .11
10.5.3 Croissance et fertilité .11
10.5.4 Reproduction .12
10.6 Planification de l’essai .13
11 Critères de validité .13
12 Expression des résultats.14
13 Rapport d’essai .14
Annexe A (informative) Détermination de la capacité maximale de rétention d’eau (CRE ) .16
max
Annexe B (informative) Illustrations et photos de vers adultes C. elegans .17
Annexe C (informative) Méthode micropipette (10.3) .19
Annexe D (informative) Données relatives à la performance.20
Bibliographie .24
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/ directives).
L'attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/ brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/ iso/ fr/ avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 147, Qualité de l’eau, sous-comité
SC 5, Méthodes biologiques.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 10872:2010), qui a fait l’objet d’une
révision technique. Les principales modifications par rapport à l’édition précédente sont les suivantes:
— modification du titre afin d’atteindre une meilleure perception dans le domaine de la toxicité du sol;
— pour les essais sur sols, modification de la méthode en termes de réduction de la teneur en eau du
matériau d’essai;
— réactualisation des références et normes citées;
— ajout d’informations sur le sol témoin et de limitations applicables aux sols soumis à essai;
— révision éditoriale du document.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/ fr/ members .html.
iv © ISO 2020 – Tous droits réservés

Introduction
Les nématodes comptent parmi les métazoaires les plus abondants et les plus riches en espèces dans
[1] [2]
les sédiments et les sols et occupent des positions clés dans les réseaux trophiques benthiques
et les réseaux trophiques terrestres, en raison du développement des différents types d’alimentation
(bactérivores, alguivores, fongivores et herbivores, omnivores, prédateurs, voir Références [3] et [4]).
De plus, ils sont tous reconnus comme des indicateurs environnementaux pour évaluer la toxicité des
produits chimiques et la qualité des sédiments et des sols (voir Références [5], [6], [7], [8] et [9]).
L’organisme d’essai Caenorhabditis elegans (Maupas, N2 var. Bristol) est un nématode bactérivore que
l’on trouve principalement dans les matières végétales en décomposition riches en microbes (voir
Référence [10]) et appartient à la famille des Rhabditidae, souvent présents dans les sols terrestres
et les sédiments aquatiques (voir Références [11] et [12]). De plus, des individus de C. elegans ont déjà
être trouvés dans les sédiments de systèmes d’eau douce polysaprobes (voir Références [13] et [14]). En
[15]
raison de sa facilité de culture et de son cycle de vie court, C. elegans est devenu un organisme modèle
bien étudié dans le domaine de la recherche biomédicale et écotoxicologique (voir Références [16], [17]
et [18]).
[19]
L’essai est conçu pour mesurer la réponse aux substances dissoutes et liées à des particules. Il
s’applique aux sédiments, aux sols, aux déchets, à l’eau interstitielle, aux élutriats et aux extraits aqueux
(voir, par exemple, Références [20], [21], [22] et [23]).
NORME INTERNATIONALE ISO 10872:2020(F)
Qualité de l'eau et du sol — Détermination de l'effet
toxique d'échantillons de sédiment et de sol sur la
croissance, la fertilité et la reproduction de Caenorhabditis
elegans (Nematodes)
AVERTISSEMENT — Il convient que l’utilisateur du présent document connaisse bien les
pratiques courantes de laboratoire. Le présent document n’a pas pour but de traiter de tous les
problèmes de sécurité qui sont, le cas échéant, liés à son utilisation. Il incombe à l’utilisateu
...