ISO 17244:2015
(Main)Water quality — Determination of the toxicity of water samples on the embryo-larval development of Japanese oyster (Crassostrea gigas) and mussel (Mytilus edulis or Mytilus galloprovincialis)
Water quality — Determination of the toxicity of water samples on the embryo-larval development of Japanese oyster (Crassostrea gigas) and mussel (Mytilus edulis or Mytilus galloprovincialis)
ISO 17244:2015 specifies a method for determining the effects of chemical and aqueous samples on the embryo-larval development of marine bivalves. It allows the determination of the concentration levels that result in an abnormality in embryo-larval development. This test is suitable for salinity ranges between 20 and 40 for mussels and between 25 and 35 for oysters. This method applies to - chemical substances and preparations, - marine and brackish waters, - streams and aqueous effluents (urban, agricultural, industrial effluents, etc.) as long as the salinity is adjusted and/or dilution is limited so that the aforementioned salinity ranges are respected, and - aqueous extracts (pore water, elutriates, eluates, and leachates) from sediments and petroleum products.
Qualité de l'eau — Détermination de la toxicité d'échantillons aqueux sur le développement embryo-larvaire de l'huître creuse (Crassostrea gigas) et de la moule (Mytilus edulis ou Mytilus galloprovincialis)
ISO 17244:2015 spécifie une méthode de détermination des effets de substances chimiques et d'échantillons aqueux sur le développement embryo-larvaire de bivalves marins. Elle permet de déterminer les concentrations induisant une anomalie du développement embryo-larvaire. Cet essai convient pour des gammes de salinité allant de 20 à 40 pour les moules et de 25 à 35 pour les huîtres. Cette méthode est applicable: - aux substances et préparations chimiques, - aux eaux marines et estuariennes, - aux cours d'eau et aux effluents aqueux (urbains, agricoles, industriels, etc.) sous réserve d'ajuster la salinité et/ou de limiter la dilution afin de respecter les gammes de salinité définies ci-dessus, et - aux extraits aqueux (eau interstitielle, élutriats, éluats et lixiviats) de sédiments et de produits pétroliers.
General Information
Relations
Buy Standard
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 17244
First edition
2015-09-15
Water quality — Determination of
the toxicity of water samples on
the embryo-larval development of
Japanese oyster (Crassostrea gigas)
and mussel (Mytilus edulis or Mytilus
galloprovincialis)
Qualité de l’eau — Détermination de la toxicité d’échantillons
aqueux sur le développement embryo-larvaire de l’huître creuse
(Crassostrea gigas) et de la moule (Mytilus edulis ou Mytilus
galloprovincialis)
Reference number
©
ISO 2015
© ISO 2015, Published in Switzerland
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized otherwise in any form
or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on the internet or an intranet, without prior
written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below or ISO’s member body in the country of
the requester.
ISO copyright office
Ch. de Blandonnet 8 • CP 401
CH-1214 Vernier, Geneva, Switzerland
Tel. +41 22 749 01 11
Fax +41 22 749 09 47
copyright@iso.org
www.iso.org
ii © ISO 2015 – All rights reserved
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Test organisms and seawater . 2
5.1 Spawning stock or mature bivalves. 2
5.2 Reference seawater . 3
5.2.1 Natural seawater . 3
5.2.2 Synthetic seawater . 3
5.2.3 Hypersaline brine (HSB) . 4
6 Equipment . 4
7 Reference substance . 5
8 Test procedure . 5
8.1 Collection, preparation, and preservation of aqueous samples . 5
8.2 Preparation of test samples . 5
8.2.1 Chemicals . 5
8.2.2 Aqueous samples . 5
8.3 Selection of concentration/dilution range . 6
8.4 Collecting gametes . 6
8.4.1 General. 6
8.4.2 Thermal stimulation . 6
8.4.3 Stripping the gametes . . 8
8.5 Measurement of egg density . 8
8.6 Fertilization and inoculation of fertilized eggs . 8
8.7 Incubation . 9
8.8 Observation . 9
8.9 Analytical measurements .10
9 Expression of results .10
10 Validity criteria .12
11 Test report .12
Annex A (informative) Overview of the test applied to the Japanese oyster Crassostrea gigas .13
Annex B (informative) Performance data .14
Bibliography .22
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the meaning of ISO specific terms and expressions related to conformity
assessment, as well as information about ISO’s adherence to the WTO principles in the Technical
Barriers to Trade (TBT), see the following URL: Foreword — Supplementary Information.
The committee responsible for this document is ISO/TC 147, Water quality, Subcommittee SC 5,
Biological methods.
iv © ISO 2015 – All rights reserved
Introduction
Traditionally, the level of pollution affecting a marine environment is shown in terms of the concentration
levels of the contaminants present in the environment of interest. However, these measurements do
not provide an estimation of the harmful effects on organisms and have to be complemented with the
biological responses obtained through biotests (see Reference [5]).
Among the marine organisms used to assess the potential impact of chemicals or discharges into the
environment, bivalve embryos and larvae are, together with sea urchins, among the organisms which
are most frequently used in biotests. This has been the case since the first research undertaken by Lillies
(1921) (see Reference [18]) on the sea urchin Arbacia and by Prytherch (1924) (see Reference [21]) on
the oyster Crassostrea virginica. The embryos and larvae are less tolerant to pollutants than the adults
of the same species. They therefore represent the critical stages for the toxicity tests (see References
[19] and [30]). Since 1972, Woelke (see Reference [35]) has recommended the use of the Pacific oyster,
Crassostrea gigas, to assess the quality of seawater. Furthermore, their worldwide distribution in
coastal waters, as well as their commercial importance (see Reference [10]), make bivalves the species
of choice for the undertaking of biotests.
The results of these biotests demonstrate the necessity to determine the potential toxicity thresholds
of chemicals which could enter the marine environment either accidentally or chronically, as well as the
“biological quality” of an environment or the potential toxicity of river water or a discharge that reach
the sea. Quiniou et al. (1993, 1997) (see References [27] and [26]) and His et. al (1999) (see Reference
[11]) defined potential toxicity on the basis of teratological effects.
This International Standard specifies a method based on the embryo-larval development of bivalves
(oyster or mussel). It can be routinely used to assess development abnormalities caused by the possible
presence of chemicals and mixtures in seawater. It also allows to assess the toxicity of aqueous samples
like seawater, surface water, effluents (urban, agricultural, industrial effluents, etc.), aqueous extracts
from sediments, and petroleum products that could be leached in the water column at the time of their
resuspension or discharge and presence in the sea.
This test can be performed throughout the year with mature bivalves sampled from the natural
environment during their reproduction periods or mature bivalves which come from a hatchery where
they have been conditioned.
This toxicity test, recommended by the International Council for the Exploration of the Sea (ICES), (see
Reference [14]), has been the subject of the first European inter-calibration test performed in 1991 (see
Reference [31]). The protocol described in this International Standard corresponds to a modification
and simplification of the ASTM standard method (1994) (see Reference [3]).
The toxicity assessment of metals performed on C. gigas and Mytilus edulis demonstrated that both
organisms had a similar level of sensitivity (see References [19] and [15]). Two other studies performed
on urban effluents showed similar findings for both species (see References [16] and [28]). These
observations have been confirmed by the work carried out on mercury by Beiras and His (1994) (see
Reference [4]), who compared the findings of four embryo-larval tests: M. edulis, M. galloprovincialis,
C. gigas, and C. virginica. Another study showed that the embryos of C. gigas are more sensitive to metals
and hydrocarbons than the other marine organisms which are commonly used, for example, polychaete,
amphipods, fish, and crustaceans (see Reference [8]).
The sensitivity of the bivalve embryo-larval development confirms the suitability of this test to assess
the toxicity of chemicals and aqueous samples. The pH, salinity, and temperature ranges acceptable
to bivalves make them easy to use in ecotoxicity studies, particularly when assessing the quality of
coastal and estuarine environments (see Reference [11]).
INTERNATIONAL STANDARD ISO 17244:2015(E)
Water quality — Determination of the toxicity of water
samples on the embryo-larval development of Japanese
oyster (Crassostrea gigas) and mussel (Mytilus edulis or
Mytilus galloprovincialis)
WARNING — Persons using this International Standard should be
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 17244
Première édition
2015-09-15
Qualité de l’eau — Détermination de
la toxicité d’échantillons aqueux sur
le développement embryo-larvaire de
l’huître creuse (Crassostrea gigas) et
de la moule (Mytilus edulis ou Mytilus
galloprovincialis)
Water quality — Determination of the toxicity of water samples on
the embryo-larval development of Japanese oyster (Crassostrea
gigas) and mussel (Mytilus edulis or Mytilus galloprovincialis)
Numéro de référence
©
ISO 2015
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2015, Publié en Suisse
Droits de reproduction réservés. Sauf indication contraire, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée
sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie, l’affichage sur
l’internet ou sur un Intranet, sans autorisation écrite préalable. Les demandes d’autorisation peuvent être adressées à l’ISO à
l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Ch. de Blandonnet 8 • CP 401
CH-1214 Vernier, Geneva, Switzerland
Tel. +41 22 749 01 11
Fax +41 22 749 09 47
copyright@iso.org
www.iso.org
ii © ISO 2015 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Organismes d’essai et eau de mer . 2
5.1 Géniteurs ou bivalves matures . 2
5.2 Eau de mer de référence . 3
5.2.1 Eau de mer naturelle . 3
5.2.2 Eau de mer artificielle . 3
5.2.3 Saumure hyper saline (HSB) . 4
6 Matériel . 4
7 Substance de référence . 5
8 Mode opératoire d’essai. 5
8.1 Prélèvement, préparation et conservation des échantillons aqueux . 5
8.2 Préparation des échantillons pour essai . 6
8.2.1 Substances chimiques . 6
8.2.2 Échantillons aqueux . 6
8.3 Choix de la gamme de concentration/dilution . 6
8.4 Obtention de gamètes . 6
8.4.1 Généralités . 6
8.4.2 Stimulation thermique . . . 7
8.4.3 Stripping des gamètes . 8
8.5 Mesurage de la densité des œufs . 9
8.6 Fécondation et ensemencement des œufs fécondés . 9
8.7 Incubation .10
8.8 Observation .10
8.9 Mesurages analytiques .10
9 Expression des résultats.10
10 Critères de validité .12
11 Rapport d’essai .12
Annexe A (informative) Vue d’ensemble de l’essai appliqué à l’huître creuse Crassostrea gigas .14
Annexe B (informative) Données de performance .15
Bibliographie .22
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre noter des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www.
iso.org/directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www.iso.org/patents).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer
un engagement.
Pour une explication de la signification des termes et expressions spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation
de la conformité, et pour toute autre information au sujet de l’adhésion de l’ISO aux principes de
l’OMC concernant les obstacles techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: Avant-propos –
Informations supplémentaires
Le comité chargé de l’élaboration du présent document est l’ISO/TC 147, Qualité de l’eau, sous-comité
SC 5, Méthodes biologiques.
iv © ISO 2015 – Tous droits réservés
Introduction
Le niveau de contamination du milieu marin est traditionnellement présenté en termes de concentrations
des contaminants présents dans le milieu. Cependant, ces mesures ne donnent pas une estimation des
effets néfastes sur les organismes et doivent être complétées par les réponses biologiques obtenues au
moyen de bio-essais (voir la Référence [5]).
Parmi les organismes marins utilisés pour évaluer l’impact potentiel des substances ou rejets arrivant
dans l’environnement, les embryons et larves de bivalves sont, avec les oursins, parmi les organismes
les plus fréquemment employés dans les bio-essais, depuis les premiers travaux de Lillies (1921) (voir
la Référence [18]) sur l’oursin Arbacia et de Prytherch (1924) (voir la Référence [21]) sur l’huître
Crassostrea virginica. Les embryons et les larves sont moins tolérants aux polluants que les adultes
des mêmes espèces. Ils représentent donc les stades critiques pour les essais de toxicité (voir les
Références [19] et [30]). Dès 1972, Woelke (voir la Référence [35]) préconise l’utilisation de l’huître
creuse, Crassostrea gigas, pour l’évaluation de la qualité de l’eau de mer. De plus, leur répartition dans
les franges d’eaux côtières ainsi que leur importance commerciale (voir la Référence [10]), font des
bivalves des espèces de choix pour la réalisation de bio-essais.
Les résultats de ces bio-essais permettent de déterminer les seuils de toxicité potentielle des substances
chimiques susceptibles d’arriver dans le milieu marin, de manière accidentelle ou chronique, ainsi
que la «qualité biologique» d’un milieu ou la toxicité potentielle d’une eau de rivière ou d’un rejet
arrivant en mer. Quiniou et al. (1993, 1997) (voir les Références [27] et [26]) et His et. al (1999) (voir la
Référence [11]) définissent la toxicité potentielle à partir des effets tératologiques.
La présente Norme internationale spécifie une méthode basée sur le développement embryo-larvaire
de bivalves (huître creuse ou moule); elle est utilisable en routine pour l’évaluation des anomalies de
développement dues à la présence éventuelle de substances chimiques et de mélanges présents dans
l’eau de mer. Elle permet également d’évaluer la toxicité d’échantillons aqueux tels que les eaux marines,
les eaux de surface, les effluents (urbains, agricoles, industriels, etc.), les extraits aqueux de sédiments et
les produits pétroliers susceptibles d’être relargués dans la colonne d’eau lors de remise en suspension
ou de leur déversement et séjour en mer.
Cet essai est réalisable durant toute l’année, en utilisant des bivalves matures prélevés dans le milieu
naturel pendant leurs périodes de reproduction ou des bivalves matures provenant d’écloserie où ils
ont été conditionnés.
Cet essai de toxicité, préconisé par le Conseil International pour l’Exploration de la Mer (CIEM),
(voir la Référence [14]), a fait l’objet du premier essai d’intercalibration européen dès 1991 (voir
la Référence [31]). Le protocole décrit dans la présente Norme internationale correspond à une
modification et simplification de la méthode normalisée proposée par l’ASTM (1994) (voir la
Référence [3]).
L’évaluation de la toxicité de métaux sur C. gigas et Mytilus edulis a permis de conclure à une sensibilité
similaire des deux organismes (voir les Références [19] et [15]). Deux autres études effectuées sur
des effluents urbains ont mis en évidence des réponses similaires pour les deux espèces (voir les
Références [16] et [28]). Ces observations sont confirmées par les travaux réalisés sur le mercure par
Beiras et His (1994) (voir la Référence [4]), qui ont comparé les résultats de quatre essais embryo-
larvaires: M. edulis, M. galloprovincialis, C. gigas et C. virginica. Les embryons de C. gigas se révèlent plus
sensibles aux métaux et aux hydrocarbures que les autres organismes marins couramment utilisés, par
exemple les polychètes, les amphipodes, les poissons et les crustacés (voir la Référence [8]).
La sensibilité de la phase embryo-larvaire des bivalves souligne l’adéquation de cet essai pour
l’évaluation de la toxicité de substances chimiques et d’échantillons aqueux. Les gammes de pH,
de salinité et de température tolérées par les bivalves permettent leur emploi aisé dans les études
d’écotoxicité, en particulier pour l’é
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.