ISO 16303:2013

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 16303
First edition
2013-12-01
Water quality — Determination of
toxicity of fresh water sediments using
Hyalella azteca
Qualité de l’eau — Détermination de la toxicité des sédiments d’eau
douce vis-à-vis de Hyalella azteca
Reference number
©
ISO 2013
© ISO 2013
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized otherwise in any form
or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on the internet or an intranet, without prior
written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below or ISO’s member body in the country of
the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2013 – All rights reserved

Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Test environment . 3
5.1 Facilities . 3
5.2 Lighting . 3
6 Reagents, test organisms, and materials . 3
6.1 Test organism . 3
6.2 Control sediment . 3
6.3 Overlying water . 4
6.4 Food . 5
6.5 Reference substance . 6
7 Apparatus . 6
8 Treatment and preparation of samples . 7
8.1 General . 7
8.2 Test sediment . 7
8.3 Preparation of sediment samples . 8
9 Test procedure . 8
9.1 Preparing the test containers . 8
9.2 Introducing the organisms . 9
9.3 Test conditions . 9
9.4 Renewal of overlying water.10
9.5 Test observations and measurements .10
10 Expression of results .10
10.1 Survival .10
10.2 Growth .11
10.3 Validity of the test .11
11 Analysis and interpretation of results .11
11.1 Data analysis .11
11.2 Non-contaminant factors .11
12 Reference substance .12
12.1 Water-only test .12
12.2 Whole sediment test.12
13 Test report .13
Annex A (informative) Description of Hyalella azteca.14
Annex B (informative) Culturing Hyalella azteca .18
Annex C (informative) Sources of Hyalella azteca .20
Annex D (normative) Procedure for preparing YCT .22
Annex E (informative) 42-day sediment reproduction test .23
Annex F (informative) 14-day water-only survival-and-growth test.24
Annex G (informative) Performance data .25
Bibliography .26
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the meaning of ISO specific terms and expressions related to conformity
assessment, as well as information about ISO’s adherence to the WTO principles in the Technical Barriers
to Trade (TBT) see the following URL: Foreword - Supplementary information
The committee responsible for this document is ISO/TC 147, Water quality, Subcommittee SC 5,
Biological methods.
iv © ISO 2013 – All rights reserved

Introduction
Sediment in the aquatic environment serves as a reservoir for agricultural, industrial, and municipal
contaminants. Contaminated sediment adversely affects the benthic community directly and acts as
a source of contamination for the overlying water, often negatively impacting pelagic communities as
well. Sediment toxicity tests are used globally to determine and monitor the toxic effects of discrete
substances or complex mixtures that might be harmful to indigenous life in the aquatic and benthic
environments. This International Standard outlines procedures for conducting 14 d and/or 28 d tests
for sediment toxicity, using the fresh water amphipod Hyalella azteca. The biological end points for the
tests include mortality and growth.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 16303:2013(E)
Water quality — Determination of toxicity of fresh water
sediments using Hyalella azteca
WARNING — Persons using this International Standard should be familiar with normal laboratory
practice. This International Standard does not purport to address all of the safety problems, if
any, associated with its use. It is the responsibility of the user to establish appropriate safety and
health practices and to ensure compliance with any national regulatory conditions.
IMPORTANT — It is absolutely essential that tests conducted in accordance with this International
Standard be carried out by suitably trained staff.
1 Scope
This International Standard specifies a method for the determination of toxicity to young Hyalella azteca
in whole sediment based on survival and growth inhibition after 14 d and/or 28 d.
The method is applicable to
a) samples of contaminated whole fresh water sediment,
b) chemical, industrial, or municipal sludge, or other solid wastes that may combine with fresh water
sediments, and
c) chemicals or preparations spiked into clean sediment.
This International Standard is applicable to the testing of sediment samples from the fresh water
environment. Hyalella azteca can be used in the testing of brackish waters up to a maximum of 15 ‰,
with careful acclimation. This International Standard is not applicable to the testing of sediment samples
from the marine and estuarine environment with a salinity of > 15 ‰.
This method is a 14 d and/or 28 d survival-and-growth test applicable to the sediment sample types
described above.
2 Normative references
The following documents, in whole or in part, are normatively referenced in this document and are
indispensable for its application. F
...

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 16303
First edition
2013-12-01
Water quality — Determination of
toxicity of fresh water sediments using
Hyalella azteca
Qualité de l’eau — Détermination de la toxicité des sédiments d’eau
douce vis-à-vis de Hyalella azteca
Reference number
©
ISO 2013
© ISO 2013
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized otherwise in any form
or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting on the internet or an intranet, without prior
written permission. Permission can be requested from either ISO at the address below or ISO’s member body in the country of
the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2013 – All rights reserved

Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Test environment . 3
5.1 Facilities . 3
5.2 Lighting . 3
6 Reagents, test organisms, and materials . 3
6.1 Test organism . 3
6.2 Control sediment . 3
6.3 Overlying water . 4
6.4 Food . 5
6.5 Reference substance . 6
7 Apparatus . 6
8 Treatment and preparation of samples . 7
8.1 General . 7
8.2 Test sediment . 7
8.3 Preparation of sediment samples . 8
9 Test procedure . 8
9.1 Preparing the test containers . 8
9.2 Introducing the organisms . 9
9.3 Test conditions . 9
9.4 Renewal of overlying water.10
9.5 Test observations and measurements .10
10 Expression of results .10
10.1 Survival .10
10.2 Growth .11
10.3 Validity of the test .11
11 Analysis and interpretation of results .11
11.1 Data analysis .11
11.2 Non-contaminant factors .11
12 Reference substance .12
12.1 Water-only test .12
12.2 Whole sediment test.12
13 Test report .13
Annex A (informative) Description of Hyalella azteca.14
Annex B (informative) Culturing Hyalella azteca .18
Annex C (informative) Sources of Hyalella azteca .20
Annex D (normative) Procedure for preparing YCT .22
Annex E (informative) 42-day sediment reproduction test .23
Annex F (informative) 14-day water-only survival-and-growth test.24
Annex G (informative) Performance data .25
Bibliography .26
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the meaning of ISO specific terms and expressions related to conformity
assessment, as well as information about ISO’s adherence to the WTO principles in the Technical Barriers
to Trade (TBT) see the following URL: Foreword - Supplementary information
The committee responsible for this document is ISO/TC 147, Water quality, Subcommittee SC 5,
Biological methods.
iv © ISO 2013 – All rights reserved

Introduction
Sediment in the aquatic environment serves as a reservoir for agricultural, industrial, and municipal
contaminants. Contaminated sediment adversely affects the benthic community directly and acts as
a source of contamination for the overlying water, often negatively impacting pelagic communities as
well. Sediment toxicity tests are used globally to determine and monitor the toxic effects of discrete
substances or complex mixtures that might be harmful to indigenous life in the aquatic and benthic
environments. This International Standard outlines procedures for conducting 14 d and/or 28 d tests
for sediment toxicity, using the fresh water amphipod Hyalella azteca. The biological end points for the
tests include mortality and growth.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 16303:2013(E)
Water quality — Determination of toxicity of fresh water
sediments using Hyalella azteca
WARNING — Persons using this International Standard should be familiar with normal laboratory
practice. This International Standard does not purport to address all of the safety problems, if
any, associated with its use. It is the responsibility of the user to establish appropriate safety and
health practices and to ensure compliance with any national regulatory conditions.
IMPORTANT — It is absolutely essential that tests conducted in accordance with this International
Standard be carried out by suitably trained staff.
1 Scope
This International Standard specifies a method for the determination of toxicity to young Hyalella azteca
in whole sediment based on survival and growth inhibition after 14 d and/or 28 d.
The method is applicable to
a) samples of contaminated whole fresh water sediment,
b) chemical, industrial, or municipal sludge, or other solid wastes that may combine with fresh water
sediments, and
c) chemicals or preparations spiked into clean sediment.
This International Standard is applicable to the testing of sediment samples from the fresh water
environment. Hyalella azteca can be used in the testing of brackish waters up to a maximum of 15 ‰,
with careful acclimation. This International Standard is not applicable to the testing of sediment samples
from the marine and estuarine environment with a salinity of > 15 ‰.
This method is a 14 d and/or 28 d survival-and-growth test applicable to the sediment sample types
described above.
2 Normative references
The following documents, in whole or in part, are normatively referenced in this document and are
indispensable for its application. F
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 16303
Première édition
2013-12-01
Qualité de l’eau — Détermination de
la toxicité des sédiments d’eau douce
vis-à-vis de Hyalella azteca
Water quality — Determination of toxicity of fresh water sediments
using Hyalella azteca
Numéro de référence
©
ISO 2013
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2013
Droits de reproduction réservés. Sauf indication contraire, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée
sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie, l’affichage sur
l’internet ou sur un Intranet, sans autorisation écrite préalable. Les demandes d’autorisation peuvent être adressées à l’ISO à
l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2013 – Tous droits réservés

Sommaire Page
Avant-propos .v
Introduction .vi
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Environnement d’essai . 3
5.1 Installation d’essai . 3
5.2 Éclairage . 3
6 Réactifs, organismes et matériaux d’essai . 3
6.1 Organisme d’essai . 3
6.2 Sédiment témoin . 4
6.3 Colonne d’eau . 5
6.4 Alimentation des organismes . 6
6.5 Substance de référence . 7
7 Matériel . 7
8 Traitement et préparation des échantillons. 8
8.1 Généralités . 8
8.2 Sédiment d’essai . 8
8.3 Préparation des échantillons de sédiments . 8
9 Mode opératoire. 9
9.1 Préparation des récipients d’essai . 9
9.2 Introduction des organismes .10
9.3 Conditions d’essai .10
9.4 Renouvellement de la colonne d’eau.11
9.5 Mesurages et observations d’essai .11
10 Expression des résultats.12
10.1 Survie .12
10.2 Croissance .12
10.3 Validité de l’essai .12
11 Analyse et interprétation des résultats .12
11.1 Analyse des données .12
11.2 Facteurs autres que les contaminants .13
12 Substance de référence .13
12.1 Essai uniquement en milieu aqueux.13
12.2 Essai sur sédiment entier .14
13 Rapport d’essai .14
Annexe A (informative) Description d’Hyalella azteca .16
Annexe B (informative) Élevage de Hyalella azteca .19
Annexe C (informative) Sources d’Hyalella azteca .21
Annexe D (normative) Préparation de l’aliment LCT .23
Annexe E (informative) Essai de reproduction dans les sédiments d’une durée de 42 jours .25
Annexe F (informative) Essai de survie et de croissance en colonne d’eau d’une durée de 14 jours .
Annexe G (informative) Données de performance .27
Bibliographie .29
iv © ISO 2013 – Tous droits réservés

Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne
la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/CEI, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/CEI, Partie 2 (voir www.
iso.org/directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant les
références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de l’élaboration
du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou sur la liste ISO des déclarations de brevets reçues
(voir www.iso.org/brevets).
Les éventuelles appellations commerciales utilisées dans le présent document sont données pour
information à l’intention des utilisateurs et ne constituent pas une approbation ou une recommandation.
Pour une explication de la signification des termes et expressions spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation
de la conformité, aussi bien que pour des informations au sujet de l’adhésion de l’ISO aux principes de
l’OMC concernant les obstacles techniques au commerce (OTC) voir le lien suivant: Avant-propos —
Informations supplémentaires.
Le comité chargé de l’élaboration du présent document est l’ISO/TC 147, Qualité de l’eau, sous-comité
SC 5, Méthodes biologiques.
Introduction
Dans l’environnement aquatique, le sédiment sert de réservoir pour les contaminants agricoles,
industriels et municipaux. Un sédiment contaminé affecte directement les organismes benthiques et agit
comme une source de contamination pour la colonne d’eau, impactant souvent de manière négative les
organismes pélagiques. Les essais de toxicité sur sédiments sont généralement utilisés pour déterminer
et contrôler les effets toxiques de substances distinctes ou de mélanges complexes pouvant s’avérer
nocifs pour la santé des populations indigènes dans les environnements aquatiques et benthiques. La
présente méthode décrit des modes opératoires pour réaliser des essais d’une durée de 14 jours et/ou
28 jours destinés à évaluer la toxicité des sédiments vis-à-vis de l’amphipode d’eau douce, Hyalella azteca.
Pour ces essais, les critères d’effets biologiques comprennent la mortalité et la croissance.
vi © ISO 2013 – Tous droits réservés

NORME INTERNATIONALE ISO 16303:2013(F)
Qualité de l’eau — Détermination de la toxicité des
sédiments d’eau douce vis-à-vis de Hyalella azteca
AVERTISSEMENT — Il convient que l’utilisateur du présent document connaisse bien les pratiques
courantes de laboratoire. Le présent document n’a pas pour but de traiter tous les problèmes
de sécurité qui sont, le cas échéant, liés à son utilisation. Il incombe à l’utilisateur d’établir des
pratiques appropriées en matière d’hygiène et de sécurité et de s’assurer de la conformité à la
réglementation nationale en vigueur.
IMPORTANT — Il est absolument essentiel que les essais réalisés conformément à la présente
Norme internationale soient exécutés par du personnel ayant reçu une formation adéquate.
1 Domaine d’application
La présente Norme internationale définit une méthode de détermination de la toxicité d’un sédiment
entier vis-à-vis de jeunes amphipodes Hyalella azteca, fondée sur la survie et l’inhibition de la croissance
après 14 jours et/ou 28 jours.
La méthode s’applique
a) aux échantillons de sédiments d’eau douce contaminés,
b) aux boues chimiques, industrielles, urbaines, ou autres déchets solides pouvant se combiner à des
sédiments d’eau douce, ou
c) à des produits chimiques ou des préparations ajouté(e)s à un sédiment propre.
La présente Norme internationale est applicable aux échantillons de sédiments d’eau douce. L’amphipode
Hyalella aztec
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 16303
Première édition
2013-12-01
Qualité de l’eau — Détermination de
la toxicité des sédiments d’eau douce
vis-à-vis de Hyalella azteca
Water quality — Determination of toxicity of fresh water sediments
using Hyalella azteca
Numéro de référence
©
ISO 2013
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2013
Droits de reproduction réservés. Sauf indication contraire, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée
sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie, l’affichage sur
l’internet ou sur un Intranet, sans autorisation écrite préalable. Les demandes d’autorisation peuvent être adressées à l’ISO à
l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2013 – Tous droits réservés

Sommaire Page
Avant-propos .v
Introduction .vi
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Environnement d’essai . 3
5.1 Installation d’essai . 3
5.2 Éclairage . 3
6 Réactifs, organismes et matériaux d’essai . 3
6.1 Organisme d’essai . 3
6.2 Sédiment témoin . 4
6.3 Colonne d’eau . 5
6.4 Alimentation des organismes . 6
6.5 Substance de référence . 7
7 Matériel . 7
8 Traitement et préparation des échantillons. 8
8.1 Généralités . 8
8.2 Sédiment d’essai . 8
8.3 Préparation des échantillons de sédiments . 8
9 Mode opératoire. 9
9.1 Préparation des récipients d’essai . 9
9.2 Introduction des organismes .10
9.3 Conditions d’essai .10
9.4 Renouvellement de la colonne d’eau.11
9.5 Mesurages et observations d’essai .11
10 Expression des résultats.12
10.1 Survie .12
10.2 Croissance .12
10.3 Validité de l’essai .12
11 Analyse et interprétation des résultats .12
11.1 Analyse des données .12
11.2 Facteurs autres que les contaminants .13
12 Substance de référence .13
12.1 Essai uniquement en milieu aqueux.13
12.2 Essai sur sédiment entier .14
13 Rapport d’essai .14
Annexe A (informative) Description d’Hyalella azteca .16
Annexe B (informative) Élevage de Hyalella azteca .19
Annexe C (informative) Sources d’Hyalella azteca .21
Annexe D (normative) Préparation de l’aliment LCT .23
Annexe E (informative) Essai de reproduction dans les sédiments d’une durée de 42 jours .25
Annexe F (informative) Essai de survie et de croissance en colonne d’eau d’une durée de 14 jours .
Annexe G (informative) Données de performance .27
Bibliographie .29
iv © ISO 2013 – Tous droits réservés

Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne
la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/CEI, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/CEI, Partie 2 (voir www.
iso.org/directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant les
références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de l’élaboration
du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou sur la liste ISO des déclarations de brevets reçues
(voir www.iso.org/brevets).
Les éventuelles appellations commerciales utilisées dans le présent document sont données pour
information à l’intention des utilisateurs et ne constituent pas une approbation ou une recommandation.
Pour une explication de la signification des termes et expressions spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation
de la conformité, aussi bien que pour des informations au sujet de l’adhésion de l’ISO aux principes de
l’OMC concernant les obstacles techniques au commerce (OTC) voir le lien suivant: Avant-propos —
Informations supplémentaires.
Le comité chargé de l’élaboration du présent document est l’ISO/TC 147, Qualité de l’eau, sous-comité
SC 5, Méthodes biologiques.
Introduction
Dans l’environnement aquatique, le sédiment sert de réservoir pour les contaminants agricoles,
industriels et municipaux. Un sédiment contaminé affecte directement les organismes benthiques et agit
comme une source de contamination pour la colonne d’eau, impactant souvent de manière négative les
organismes pélagiques. Les essais de toxicité sur sédiments sont généralement utilisés pour déterminer
et contrôler les effets toxiques de substances distinctes ou de mélanges complexes pouvant s’avérer
nocifs pour la santé des populations indigènes dans les environnements aquatiques et benthiques. La
présente méthode décrit des modes opératoires pour réaliser des essais d’une durée de 14 jours et/ou
28 jours destinés à évaluer la toxicité des sédiments vis-à-vis de l’amphipode d’eau douce, Hyalella azteca.
Pour ces essais, les critères d’effets biologiques comprennent la mortalité et la croissance.
vi © ISO 2013 – Tous droits réservés

NORME INTERNATIONALE ISO 16303:2013(F)
Qualité de l’eau — Détermination de la toxicité des
sédiments d’eau douce vis-à-vis de Hyalella azteca
AVERTISSEMENT — Il convient que l’utilisateur du présent document connaisse bien les pratiques
courantes de laboratoire. Le présent document n’a pas pour but de traiter tous les problèmes
de sécurité qui sont, le cas échéant, liés à son utilisation. Il incombe à l’utilisateur d’établir des
pratiques appropriées en matière d’hygiène et de sécurité et de s’assurer de la conformité à la
réglementation nationale en vigueur.
IMPORTANT — Il est absolument essentiel que les essais réalisés conformément à la présente
Norme internationale soient exécutés par du personnel ayant reçu une formation adéquate.
1 Domaine d’application
La présente Norme internationale définit une méthode de détermination de la toxicité d’un sédiment
entier vis-à-vis de jeunes amphipodes Hyalella azteca, fondée sur la survie et l’inhibition de la croissance
après 14 jours et/ou 28 jours.
La méthode s’applique
a) aux échantillons de sédiments d’eau douce contaminés,
b) aux boues chimiques, industrielles, urbaines, ou autres déchets solides pouvant se combiner à des
sédiments d’eau douce, ou
c) à des produits chimiques ou des préparations ajouté(e)s à un sédiment propre.
La présente Norme internationale est applicable aux échantillons de sédiments d’eau douce. L’amphipode
Hyalella aztec
...

МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 16303
Первое издание
2013-12-01
Качество воды. Определение
токсичности осаждений пресной воды
с использованием Hyalella azteca
Water quality —Determination of toxicity of fresh water sediments using
Hyalella azteca
Ответственность за подготовку русской версии несёт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава ISO
Ссылочный номер
©
ISO 2013
ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ

©  ISO 2013
Все права сохраняются. Если не задано иначе, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия офиса ISO по адресу, указанному ниже, или членов ISO в стране регистрации
пребывания.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO 2013 – Все права сохраняются

Содержание Страница
Предисловие .iv
Введение .v
1 Область применения .1
2 Нормативные ссылки .1
3 Термины и определения .2
4 Сущность метода.3
5 Испытательная среда.3
5.1 Оборудование .3
5.2 Освещение.3
6 Реактивы, испытательные организмы и материалы.3
6.1 Испытательный организм.3
6.2 Контрольный осадок .4
6.3 Вышележащая вода.5
6.4 Кормление .6
6.5 Стандартное вещество.7
7 Оборудование .7
8 Обработка и подготовка проб.8
8.1 Общие вопросы.8
8.2 Испытательный осадок.8
8.3 Подготовка проб осадков .9
9 Процедура испытания .10
9.1 Приготовление испытательных емкостей.10
9.2 Введение организмов .10
9.3 Условия испытания.11
9.4 Обновление вышележащей воды .11
9.5 Тестовые наблюдения и измерения.11
10 Выражение результатов .12
10.1 Выживание.12
10.2 Рост .12
10.3 Валидность теста.12
11 Анализ и интерпретация результатов.12
11.1 Анализ данных .12
11.2 Факторы, не относящиеся к загрязнению .13
12 Стандартное вещество.13
12.1 Тест только с водой .14
12.2 Испытание цельного осадка .14
13 Протокол испытания.14
Приложение А (информативное) Описание Hyalella azteca.16
Приложение В (информативное) Культивирование Hyalella azteca.18
Приложение С (информативное) Источники Hyalella azteca .20
Приложение D (нормативное) Процедура для приготовления комбинированных кормов YCT.22
Приложение Е (информативное) 42-дневное испытание осадка на размножение .23
Приложение F (информативное) 14-дневный тест только с водой на выживание и рост .24
Приложение G (информативное) Рабочие результаты .25
Библиография.26
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является Всемирной федерацией национальных
организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных стандартов
обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член, заинтересованный в
деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть представленным в этом
комитете. Международные правительственные и неправительственные организации, имеющие связи с
ISO, также принимают участие в работах. Что касается стандартизации в области электротехники, ISO
работает в тесном сотрудничестве с Международной электротехнической комиссией (IEC).
Процедуры, используемые для разработки настоящего документа, и процедуры, предназначенные для
его дальнейшего ведения, описаны в Директивах ISO/IEC, Часть 1. В частности, следует отметить
различные критерии одобрения для различных типов документов ISO. Проект данного документа был
разработан по правилам, указанным в Директивах ISO/IEC, Часть 2 (см. www.iso.org/directives).
Обращается внимание на то, что некоторые элементы данного документа могут быть объектом
патентных прав. ISO не несет ответственности за идентификацию какого-либо одного или всех таких
патентных прав. Детали любых патентных прав, установленные в процессе подготовки этого
документа, будут указаны во Введении и/или в списке патентных заявок, полученных ISO (см.
www.iso.org/patents).
Любое фирменное название, используемое в этом документе, указывается только как информация для
удобства пользователей и не является рекомендацией.
Для объяснения специфических терминов ISO и выражений, относящихся к оценке соответствия, а
также информации о соблюдении ISO принципов WTO относительно Технических барьеров в торговле
(TBT) см. следующую гиперссылку URL: Предисловие – Дополнительная информация
Настоящий документ разработан Техническим комитетом ISO/TC 147, Качество воды, Подкомитетом
SC 5, Биологические методы.
iv © ISO 2013 – Все права сохраняются

Введение
Осаждение в водной среде служит резервуаром-отстойником для сельскохозяйственных,
промышленных и городских загрязнений. Загрязненные отложения оказывают непосредственное
вредное воздействие на донное сообщество и действуют как источник загрязнения для вышележащей
воды, часто также отрицательно влияя на пелагические сообщества. Испытания отложений на
токсичность проводятся в мировом масштабе для определения и мониторинга токсических
воздействий отдельных веществ или сложных смесей, которые могут быть вредными для
существования местных сообществ в водных или донных средах. В настоящем международном
стандарте описываются процедуры для проведения 14-дневных и/или 28-дневных
испытаний осаждений на токсичность с использованием бокоплавов отряда амфиподов Hyalella azteca.
Биологические конечные точки для испытаний включают смертность и рост.

МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ ISO 16303:2013(R)

Качество воды. Определение токсичности осаждений
пресной воды с использованием Hyalella azteca
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ — Лица, использующие этот международный стандарт, должны быть
знакомы с нормальной лабораторной практикой. В настоящем международном стандарте не
предусматривается рассмотрение всех проблем безопасности, если таковые имеются,
связанных с его использованием. Пользователь сам должен установить надлежащие
нормативы по технике безопасности и защите здоровья и обеспечить их соответствие
условиям национального регулирования.
ВАЖНО — Абсолютно необходимо, чтобы испытания согласно этой части ISO 13165
проводились соответственно обученным персоналом.
1 Область применения
Настоящий международный стандарт устанавливает метод определения токсичности для молодых
бокоплавов Hyalella azteca в цельном осадке на основе их выживания и замедления роста через
14 дней и/или 28 дней.
Метод применим
a) для проб загрязненного цельного отложения в пресной воде,
b) для химических, промышленных или городских шламов либо других твердых отходов, которые
можно объединить с пресноводными отложениями, и
c) для химикатов или препаратов, введенных в чистое отложение.
Настоящий международный стандарт применяется для испытания проб отложений в пресноводной
среде. Hyalella azteca можно использовать для тестирования в солоноватых водах вплоть до
максимальной солености 15 ‰ при тщательной акклимации. данный международный стандарт не
распространяется на испытания проб отложения в морской и речной устьевой среде с
соленостью > 15 %.
Этот метод представляет 14-дневное и/или 28-дневное испытание на выживание и рост, применяемое
для проб отложений, типы которых описаны выше.
2 Нормативные ссылки
Следующие ссылочные нормативные документы целиком или частично являются обязательными при
применении данного документа. Для жестких ссылок применяется только цитированное издание
документа. Для плавающих ссылок необходимо использовать самое последнее издание нормативного
ссылочного документа (включая любые изменения).
ISO 5814, Качество воды. Определение растворенного кислорода. Электрохимический метод с
применением зонда
ISO 6059, Качество воды. Определение суммарного содержания кальция и магния.
Титриметрический метод с применением ЭДТА
ISO 10523, Качество воды. Определение pH
3 Термины и определения
Применительно к настоящему документу используются условные обозначения, определения, единицы
и сокращения, определенные в ISO 80000-10, ISO/IEC Guide 98-3, и нижеследующие.
3.1
искусственный осадок
artificial sediment
смесь материалов, которые имитируют физические компоненты естественного отложения
Примечание 1 к статье: См. 6.2.1.
3.2
контрольный осадок
control sediment
проба отложения (естественного или искусственного), которая используется для оценки свойств
тестируемых организмов и приемлемости испытания (т.е. чистый осадок)
Примечание 1 к статье: Результаты испытаний контрольного осадка используются для сравнения с реакцией
организмов в загрязненных испытательных осадках и для оценивания валидности испытания.
Примечание 2 к статье: Контрольный осадок используется повседневно для оценки приемлемости испытания (6.2).
3.3
испытательный осадок
test sediment
отдельная порция отложения (собранного в естественных условиях или обогащенного), подлежащая
тестированию для оценки возможных воздействий на бокоплавы, обусловленных загрязнением
3.4
обогащенный осадок
spiked sediment
проба отложения, в которую для тестирования вводится какой-либо материал
3.5
стандартный осадок
reference sediment
проба отложения, собранная в естественных условиях в заданном участке, свойства которого
достаточно соответствуют свойствам проб(ы) испытательного осадка, кроме степени загрязнения
Примечание 1 к статье: Эту пробу часто отбирают на участке, который не подвержен источнику(ам) загрязнения,
но в непосредственной близости от участков, где отбирается испытательная проба. Поэтому результаты
испытания для определения токсичности являются специфичными для участка.
3.6
периодическое обновление
intermittent renewal
испытания, в ходе которых испытательные растворы или вышележащая вода обновляются из-за
ухудшения качества воды
3.7
вышележащая вода
overlying water
вода, расположенная над осадком в испытательн
...

МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 16303
Первое издание
2013-12-01
Качество воды. Определение
токсичности осаждений пресной воды
с использованием Hyalella azteca
Water quality —Determination of toxicity of fresh water sediments using
Hyalella azteca
Ответственность за подготовку русской версии несёт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава ISO
Ссылочный номер
©
ISO 2013
ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ

©  ISO 2013
Все права сохраняются. Если не задано иначе, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия офиса ISO по адресу, указанному ниже, или членов ISO в стране регистрации
пребывания.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO 2013 – Все права сохраняются

Содержание Страница
Предисловие .iv
Введение .v
1 Область применения .1
2 Нормативные ссылки .1
3 Термины и определения .2
4 Сущность метода.3
5 Испытательная среда.3
5.1 Оборудование .3
5.2 Освещение.3
6 Реактивы, испытательные организмы и материалы.3
6.1 Испытательный организм.3
6.2 Контрольный осадок .4
6.3 Вышележащая вода.5
6.4 Кормление .6
6.5 Стандартное вещество.7
7 Оборудование .7
8 Обработка и подготовка проб.8
8.1 Общие вопросы.8
8.2 Испытательный осадок.8
8.3 Подготовка проб осадков .9
9 Процедура испытания .10
9.1 Приготовление испытательных емкостей.10
9.2 Введение организмов .10
9.3 Условия испытания.11
9.4 Обновление вышележащей воды .11
9.5 Тестовые наблюдения и измерения.11
10 Выражение результатов .12
10.1 Выживание.12
10.2 Рост .12
10.3 Валидность теста.12
11 Анализ и интерпретация результатов.12
11.1 Анализ данных .12
11.2 Факторы, не относящиеся к загрязнению .13
12 Стандартное вещество.13
12.1 Тест только с водой .14
12.2 Испытание цельного осадка .14
13 Протокол испытания.14
Приложение А (информативное) Описание Hyalella azteca.16
Приложение В (информативное) Культивирование Hyalella azteca.18
Приложение С (информативное) Источники Hyalella azteca .20
Приложение D (нормативное) Процедура для приготовления комбинированных кормов YCT.22
Приложение Е (информативное) 42-дневное испытание осадка на размножение .23
Приложение F (информативное) 14-дневный тест только с водой на выживание и рост .24
Приложение G (информативное) Рабочие результаты .25
Библиография.26
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является Всемирной федерацией национальных
организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных стандартов
обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член, заинтересованный в
деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть представленным в этом
комитете. Международные правительственные и неправительственные организации, имеющие связи с
ISO, также принимают участие в работах. Что касается стандартизации в области электротехники, ISO
работает в тесном сотрудничестве с Международной электротехнической комиссией (IEC).
Процедуры, используемые для разработки настоящего документа, и процедуры, предназначенные для
его дальнейшего ведения, описаны в Директивах ISO/IEC, Часть 1. В частности, следует отметить
различные критерии одобрения для различных типов документов ISO. Проект данного документа был
разработан по правилам, указанным в Директивах ISO/IEC, Часть 2 (см. www.iso.org/directives).
Обращается внимание на то, что некоторые элементы данного документа могут быть объектом
патентных прав. ISO не несет ответственности за идентификацию какого-либо одного или всех таких
патентных прав. Детали любых патентных прав, установленные в процессе подготовки этого
документа, будут указаны во Введении и/или в списке патентных заявок, полученных ISO (см.
www.iso.org/patents).
Любое фирменное название, используемое в этом документе, указывается только как информация для
удобства пользователей и не является рекомендацией.
Для объяснения специфических терминов ISO и выражений, относящихся к оценке соответствия, а
также информации о соблюдении ISO принципов WTO относительно Технических барьеров в торговле
(TBT) см. следующую гиперссылку URL: Предисловие – Дополнительная информация
Настоящий документ разработан Техническим комитетом ISO/TC 147, Качество воды, Подкомитетом
SC 5, Биологические методы.
iv © ISO 2013 – Все права сохраняются

Введение
Осаждение в водной среде служит резервуаром-отстойником для сельскохозяйственных,
промышленных и городских загрязнений. Загрязненные отложения оказывают непосредственное
вредное воздействие на донное сообщество и действуют как источник загрязнения для вышележащей
воды, часто также отрицательно влияя на пелагические сообщества. Испытания отложений на
токсичность проводятся в мировом масштабе для определения и мониторинга токсических
воздействий отдельных веществ или сложных смесей, которые могут быть вредными для
существования местных сообществ в водных или донных средах. В настоящем международном
стандарте описываются процедуры для проведения 14-дневных и/или 28-дневных
испытаний осаждений на токсичность с использованием бокоплавов отряда амфиподов Hyalella azteca.
Биологические конечные точки для испытаний включают смертность и рост.

МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ ISO 16303:2013(R)

Качество воды. Определение токсичности осаждений
пресной воды с использованием Hyalella azteca
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ — Лица, использующие этот международный стандарт, должны быть
знакомы с нормальной лабораторной практикой. В настоящем международном стандарте не
предусматривается рассмотрение всех проблем безопасности, если таковые имеются,
связанных с его использованием. Пользователь сам должен установить надлежащие
нормативы по технике безопасности и защите здоровья и обеспечить их соответствие
условиям национального регулирования.
ВАЖНО — Абсолютно необходимо, чтобы испытания согласно этой части ISO 13165
проводились соответственно обученным персоналом.
1 Область применения
Настоящий международный стандарт устанавливает метод определения токсичности для молодых
бокоплавов Hyalella azteca в цельном осадке на основе их выживания и замедления роста через
14 дней и/или 28 дней.
Метод применим
a) для проб загрязненного цельного отложения в пресной воде,
b) для химических, промышленных или городских шламов либо других твердых отходов, которые
можно объединить с пресноводными отложениями, и
c) для химикатов или препаратов, введенных в чистое отложение.
Настоящий международный стандарт применяется для испытания проб отложений в пресноводной
среде. Hyalella azteca можно использовать для тестирования в солоноватых водах вплоть до
максимальной солености 15 ‰ при тщательной акклимации. данный международный стандарт не
распространяется на испытания проб отложения в морской и речной устьевой среде с
соленостью > 15 %.
Этот метод представляет 14-дневное и/или 28-дневное испытание на выживание и рост, применяемое
для проб отложений, типы которых описаны выше.
2 Нормативные ссылки
Следующие ссылочные нормативные документы целиком или частично являются обязательными при
применении данного документа. Для жестких ссылок применяется только цитированное издание
документа. Для плавающих ссылок необходимо использовать самое последнее издание нормативного
ссылочного документа (включая любые изменения).
ISO 5814, Качество воды. Определение растворенного кислорода. Электрохимический метод с
применением зонда
ISO 6059, Качество воды. Определение суммарного содержания кальция и магния.
Титриметрический метод с применением ЭДТА
ISO 10523, Качество воды. Определение pH
3 Термины и определения
Применительно к настоящему документу используются условные обозначения, определения, единицы
и сокращения, определенные в ISO 80000-10, ISO/IEC Guide 98-3, и нижеследующие.
3.1
искусственный осадок
artificial sediment
смесь материалов, которые имитируют физические компоненты естественного отложения
Примечание 1 к статье: См. 6.2.1.
3.2
контрольный осадок
control sediment
проба отложения (естественного или искусственного), которая используется для оценки свойств
тестируемых организмов и приемлемости испытания (т.е. чистый осадок)
Примечание 1 к статье: Результаты испытаний контрольного осадка используются для сравнения с реакцией
организмов в загрязненных испытательных осадках и для оценивания валидности испытания.
Примечание 2 к статье: Контрольный осадок используется повседневно для оценки приемлемости испытания (6.2).
3.3
испытательный осадок
test sediment
отдельная порция отложения (собранного в естественных условиях или обогащенного), подлежащая
тестированию для оценки возможных воздействий на бокоплавы, обусловленных загрязнением
3.4
обогащенный осадок
spiked sediment
проба отложения, в которую для тестирования вводится какой-либо материал
3.5
стандартный осадок
reference sediment
проба отложения, собранная в естественных условиях в заданном участке, свойства которого
достаточно соответствуют свойствам проб(ы) испытательного осадка, кроме степени загрязнения
Примечание 1 к статье: Эту пробу часто отбирают на участке, который не подвержен источнику(ам) загрязнения,
но в непосредственной близости от участков, где отбирается испытательная проба. Поэтому результаты
испытания для определения токсичности являются специфичными для участка.
3.6
периодическое обновление
intermittent renewal
испытания, в ходе которых испытательные растворы или вышележащая вода обновляются из-за
ухудшения качества воды
3.7
вышележащая вода
overlying water
вода, расположенная над осадком в испытательн
...