Microbiology of the food chain - Methods for the detection of Anisakidae L3 larvae in fish and fishery products - Part 2: Artificial digestion method (ISO 23036-2:2021)

This document specifies a method for the detection of Anisakidae L3 larvae commonly found in marine and anadromous fishes. The method is applicable to fresh fish and/or frozen fish, as well as lightly processed fish products, such as marinated, salted or smoked. It is also suitable for visceral organs as a confirmatory method for a visual inspection scheme.
The artificial digestion method[4][5][6] is applicable to quantifying parasitic infections by estimating the number of parasites in the fish musculature and, when applied to fresh fish or lightly processed fish products (never frozen before processing), determining the viability of Anisakidae L3, which can be present.
This method does not apply to determining the species or genotype of detected parasites. Final identification is made by morphological and/or molecular methods.

Mikrobiologie der Lebensmittelkette - Verfahren zum Nachweis von Anisakidae L3-Larven in Fisch und Fischereierzeugnissen - Teil 2: Verfahren der künstlichen Verdauung (ISO 23036-2:2021)

Dieses Dokument legt ein Verfahren für den Nachweis von L3 Anisakidaelarven, die häufig in marinen und anadromen Fischen vorkommen, fest. Das Verfahren ist anwendbar bei frischem und/oder gefrorenem Fisch sowie bei leicht verarbeiteten Fischprodukten, wie etwa marinierten, gesalzenen oder geräucherten Fischprodukten. Es ist auch als bestätigendes Verfahren bei einer Sichtprüfung von inneren Organen geeignet.
Das Verfahren der künstlichen Verdauung [4],[5],[6] ist anwendbar für die Quantifizierung parasitärer Infektionen durch Schätzung der Anzahl der in der Fischmuskulatur vorhandenen Parasiten. Bei der Anwendung mit frischem Fisch oder leicht verarbeiteten Fischprodukten (die vor der Verarbeitung nie eingefroren waren) kann zudem die Lebensfähigkeit der gegebenenfalls vorhandenen L3 Anisakidaelarven bestimmt werden.
Dieses Verfahren ist jedoch nicht für die Bestimmung der Art oder des Genotyps der nachgewiesenen Parasiten anwendbar. Eine endgültige Identifizierung erfolgt mittels morphologischer und/oder molekularer Verfahren.

Microbiologie de la chaîne alimentaire - Méthodes de recherche des larves L3 d'Anisakidae dans les poissons et produits de la pêche - Partie 2: Méthode de digestion artificielle (ISO 23036-2:2021)

Le présent document spécifie une méthode de détection des larves L3 d’Anisakidae qui se trouvent fréquemment dans les poissons marins et anadromes. La méthode s’applique aux poissons frais et/ou surgelés, ainsi qu’aux produits à base de poisson légèrement transformés, c’est-à-dire marinés, salés ou fumés. Cette méthode peut également servir de méthode de confirmation dans le cadre d’une inspection visuelle des organes viscéraux.
La méthode de digestion artificielle[4][5][6] s’applique à la quantification des infestations parasitaires en estimant le nombre de parasites dans les tissus musculaires des poissons et, en cas d’utilisation sur des poissons frais ou des produits à base de poisson légèrement transformés (jamais congelés avant traitement), à la détermination de la viabilité des larves L3 d’Anisakidae, susceptibles d’être présentes.
Cette méthode ne s’applique pas à la détermination des espèces ou du génotype des parasites détectés. Des méthodes morphologiques et/ou moléculaires permettent une identification définitive.

Mikrobiologija v prehranski verigi - Metode ugotavljanja prisotnosti ličink Anisakidae L3 v ribah in ribjih proizvodih – 2. del: Metoda umetne prebave (ISO 23036-2:2021)

General Information

Status
Published
Publication Date
11-May-2021
Withdrawal Date
29-Nov-2021
Current Stage
6060 - Definitive text made available (DAV) - Publishing
Start Date
12-May-2021
Completion Date
12-May-2021

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Standards Content (Sample)


SLOVENSKI STANDARD
01-september-2021
Mikrobiologija v prehranski verigi - Metode ugotavljanja prisotnosti ličink
Anisakidae L3 v ribah in ribjih proizvodih – 2. del: Metoda umetne prebave (ISO
23036-2:2021)
Microbiology of the food chain - Methods for the detection of Anisakidae L3 larvae in fish
and fishery products - Part 2: Artificial digestion method (ISO 23036-2:2021)
Mikrobiologie der Lebensmittelkette - Verfahren zum Nachweis von Anisakidae L3-
Larven in Fisch und Fischereierzeugnissen - Teil 2: Verfahren der künstlichen Verdauung
(ISO 23036-2:2021)
Microbiologie de la chaîne alimentaire - Méthodes de recherche des larves L3
d'Anisakidae dans les poissons et produits de la pêche - Partie 2: Méthode de digestion
artificielle (ISO 23036-2:2021)
Ta slovenski standard je istoveten z: EN ISO 23036-2:2021
ICS:
07.100.30 Mikrobiologija živil Food microbiology
67.120.30 Ribe in ribji proizvodi Fish and fishery products
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

EN ISO 23036-2
EUROPEAN STANDARD
NORME EUROPÉENNE
May 2021
EUROPÄISCHE NORM
ICS 07.100.30
English Version
Microbiology of the food chain - Methods for the detection
of Anisakidae L3 larvae in fish and fishery products - Part
2: Artificial digestion method (ISO 23036-2:2021)
Microbiologie de la chaîne alimentaire - Méthodes de Mikrobiologie der Lebensmittelkette - Verfahren zum
recherche des larves L3 d'Anisakidae dans les poissons Nachweis von Anisakidae L3-Larven in Fisch und
et produits de la pêche - Partie 2: Méthode de digestion Fischereierzeugnissen - Teil 2: Verfahren der
artificielle (ISO 23036-2:2021) künstlichen Verdauung (ISO 23036-2:2021)
This European Standard was approved by CEN on 24 March 2021.

CEN members are bound to comply with the CEN/CENELEC Internal Regulations which stipulate the conditions for giving this
European Standard the status of a national standard without any alteration. Up-to-date lists and bibliographical references
concerning such national standards may be obtained on application to the CEN-CENELEC Management Centre or to any CEN
member.
This European Standard exists in three official versions (English, French, German). A version in any other language made by
translation under the responsibility of a CEN member into its own language and notified to the CEN-CENELEC Management
Centre has the same status as the official versions.

CEN members are the national standards bodies of Austria, Belgium, Bulgaria, Croatia, Cyprus, Czech Republic, Denmark, Estonia,
Finland, France, Germany, Greece, Hungary, Iceland, Ireland, Italy, Latvia, Lithuania, Luxembourg, Malta, Netherlands, Norway,
Poland, Portugal, Republic of North Macedonia, Romania, Serbia, Slovakia, Slovenia, Spain, Sweden, Switzerland, Turkey and
United Kingdom.
EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION
COMITÉ EUROPÉEN DE NORMALISATION

EUROPÄISCHES KOMITEE FÜR NORMUNG

CEN-CENELEC Management Centre: Rue de la Science 23, B-1040 Brussels
© 2021 CEN All rights of exploitation in any form and by any means reserved Ref. No. EN ISO 23036-2:2021 E
worldwide for CEN national Members.

Contents Page
European foreword . 3

European foreword
This document (EN ISO 23036-2:2021) has been prepared by Technical Committee ISO/TC 34 "Food
products" in collaboration with Technical Committee CEN/TC 463 “Microbiology of the food chain” the
secretariat of which is held by AFNOR.
This European Standard shall be given the status of a national standard, either by publication of an
identical text or by endorsement, at the latest by November 2021, and conflicting national standards
shall be withdrawn at the latest by November 2021.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. CEN shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
According to the CEN-CENELEC Internal Regulations, the national standards organizations of the
following countries are bound to implement this European Standard: Austria, Belgium, Bulgaria,
Croatia, Cyprus, Czech Republic, Denmark, Estonia, Finland, France, Germany, Greece, Hungary, Iceland,
Ireland, Italy, Latvia, Lithuania, Luxembourg, Malta, Netherlands, Norway, Poland, Portugal, Republic of
North Macedonia, Romania, Serbia, Slovakia, Slovenia, Spain, Sweden, Switzerland, Turkey and the
United Kingdom.
Endorsement notice
The text of ISO 23036-2:2021 has been approved by CEN as EN ISO 23036-2:2021 without any
modification.
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 23036-2
First edition
2021-04
Microbiology of the food chain —
Methods for the detection of
Anisakidae L3 larvae in fish and
fishery products —
Part 2:
Artificial digestion method
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Méthodes de recherche des
larves L3 d'Anisakidae dans les poissons et produits de la pêche —
Partie 2: Méthode de digestion artificielle
Reference number
ISO 23036-2:2021(E)
©
ISO 2021
ISO 23036-2:2021(E)
© ISO 2021
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: +41 22 749 01 11
Email: copyright@iso.org
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2021 – All rights reserved

ISO 23036-2:2021(E)
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
4.1 General . 2
4.2 Sample size . 2
4.3 Sample preparation . 2
4.4 Digestion of the sample . 2
4.5 Filtration of the digest fluid . 2
4.6 V erification of findings . 2
5 Reagents . 3
6 Equipment and consumables . 3
7 Sampling . 4
8 Procedure. 4
8.1 Preparation of the sample . 4
8.2 Preparation of the digest fluid . 4
8.3 Digestion of the sample in the glass beaker . 5
8.4 Filtration of the digest fluid . 5
8.5 Microscopic examination . 5
9 Expression of the results . 5
10 Performance characteristics of the method . 6
11 Test report . 6
12 Quality assurance . 6
Annex A (informative) Sample collection . 7
Annex B (informative) Example of a laboratory worksheet for recording data when testing
fish fillets with the artificial digestion method . 8
Bibliography . 9
ISO 23036-2:2021(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/ directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/ patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see www .iso .org/
iso/ foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9,
Microbiology, in collaboration with the European Committee for Standardization (CEN) Technical
Committee CEN/TC 275, Food analysis — Horizontal methods, in accordance with the Agreement on
technical cooperation between ISO and CEN (Vienna Agreement).
A list of all parts
...


SLOVENSKI STANDARD
01-september-2021
Mikrobiologija v prehranski verigi - Metode ugotavljanja prisotnosti ličink
Anisakidae L3 v ribah in ribjih proizvodih – 2. del: Metoda umetne prebave (ISO
23036-2:2021)
Microbiology of the food chain - Methods for the detection of Anisakidae L3 larvae in fish
and fishery products - Part 2: Artificial digestion method (ISO 23036-2:2021)
Mikrobiologie der Lebensmittelkette - Verfahren zum Nachweis von Anisakidae L3-
Larven in Fisch und Fischereierzeugnissen - Teil 2: Verfahren der künstlichen
Verdauung (ISO 23036-2:2021)
Microbiologie de la chaîne alimentaire - Méthodes de recherche des larves L3
d'Anisakidae dans les poissons et produits de la pêche - Partie 2: Méthode de digestion
artificielle (ISO 23036-2:2021)
Ta slovenski standard je istoveten z: EN ISO 23036-2:2021
ICS:
07.100.30 Mikrobiologija živil Food microbiology
67.120.30 Ribe in ribji proizvodi Fish and fishery products
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

EN ISO 23036-2
EUROPÄISCHE NORM
EUROPEAN STANDARD
Mai 2021
NORME EUROPÉENNE
ICS 07.100.30
Deutsche Fassung
Mikrobiologie der Lebensmittelkette - Verfahren zum
Nachweis von Anisakidae L3-Larven in Fisch und
Fischereierzeugnissen - Teil 2: Verfahren der künstlichen
Verdauung (ISO 23036-2:2021)
Microbiology of the food chain - Methods for the Microbiologie de la chaîne alimentaire - Méthodes de
detection of Anisakidae L3 larvae in fish and fishery recherche des larves L3 d'Anisakidae dans les poissons
products - Part 2: Artificial digestion method (ISO et produits de la pêche - Partie 2: Méthode de digestion
23036-2:2021) artificielle (ISO 23036-2:2021)
Diese Europäische Norm wurde vom CEN am 24. März 2021 angenommen.

Die CEN-Mitglieder sind gehalten, die CEN/CENELEC-Geschäftsordnung zu erfüllen, in der die Bedingungen festgelegt sind, unter
denen dieser Europäischen Norm ohne jede Änderung der Status einer nationalen Norm zu geben ist. Auf dem letzten Stand
befindliche Listen dieser nationalen Normen mit ihren bibliographischen Angaben sind beim CEN-CENELEC-Management-
Zentrum oder bei jedem CEN-Mitglied auf Anfrage erhältlich.

Diese Europäische Norm besteht in drei offiziellen Fassungen (Deutsch, Englisch, Französisch). Eine Fassung in einer anderen
Sprache, die von einem CEN-Mitglied in eigener Verantwortung durch Übersetzung in seine Landessprache gemacht und dem
Management-Zentrum mitgeteilt worden ist, hat den gleichen Status wie die offiziellen Fassungen.

CEN-Mitglieder sind die nationalen Normungsinstitute von Belgien, Bulgarien, Dänemark, Deutschland, Estland, Finnland,
Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Kroatien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, den Niederlanden, Norwegen,
Österreich, Polen, Portugal, der Republik Nordmazedonien, Rumänien, Schweden, der Schweiz, Serbien, der Slowakei, Slowenien,
Spanien, der Tschechischen Republik, der Türkei, Ungarn, dem Vereinigten Königreich und Zypern.

EUROPÄISCHES KOMITEE FÜR NORMUNG
EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION

COMITÉ EUROPÉEN DE NORMALISATION

CEN-CENELEC Management-Zentrum: Rue de la Science 23, B-1040 Brüssel
© 2021 CEN Alle Rechte der Verwertung, gleich in welcher Form und in welchem Ref. Nr. EN ISO 23036-2:2021 D
Verfahren, sind weltweit den nationalen Mitgliedern von CEN
vorbehalten.
Inhalt
Seite
Europäisches Vorwort . 3
Vorwort . 4
Einleitung . 5
1 Anwendungsbereich . 6
2 Normative Verweisungen . 6
3 Begriffe . 6
4 Kurzbeschreibung . 7
4.1 Allgemeines . 7
4.2 Probenumfang . 7
4.3 Vorbereitung der Probe . 7
4.4 Verdauung der Probe . 7
4.5 Filtration der Verdauungsflüssigkeit . 7
4.6 Verifizierung der Ergebnisse . 7
5 Reagenzien . 8
6 Geräte und Verbrauchsmaterialien . 8
7 Probenahme . 9
8 Durchführung . 9
8.1 Vorbereitung der Probe . 9
8.2 Herstellung der Verdauungsflüssigkeit . 9
8.3 Verdauung der Probe im Becherglas . 10
8.4 Filtration der Verdauungsflüssigkeit . 10
8.5 Mikroskopische Untersuchung . 11
9 Angabe der Ergebnisse . 11
10 Leistungsmerkmale des Verfahrens . 11
11 Untersuchungsbericht . 11
12 Qualitätssicherung . 11
Anhang A (informativ) Probenahme . 12
Anhang B (informativ) Beispiel für ein Labor-Arbeitsblatt zur Aufzeichnung von Daten bei der
Prüfung von Fischfilets mittels künstlicher Verdauung. 13
Literaturhinweise . 14
Europäisches Vorwort
Dieses Dokument (EN ISO 23036-2:2021) wurde vom Technischen Komitee ISO/TC 34 „Food products“ in
Zusammenarbeit mit dem Technischen Komitee CEN/TC 463 „Mikrobiologie der Lebensmittelkette“
erarbeitet, dessen Sekretariat von AFNOR gehalten wird.
Diese Europäische Norm muss den Status einer nationalen Norm erhalten, entweder durch Veröffentlichung
eines identischen Textes oder durch Anerkennung bis November 2021, und etwaige entgegenstehende
nationale Normen müssen bis November 2021 zurückgezogen werden.
Es wird auf die Möglichkeit hingewiesen, dass einige Elemente dieses Dokuments Patentrechte berühren
können. CEN ist nicht dafür verantwortlich, einige oder alle diesbezüglichen Patentrechte zu identifizieren.
Entsprechend der CEN-CENELEC-Geschäftsordnung sind die nationalen Normungsinstitute der folgenden
Länder gehalten, diese Europäische Norm zu übernehmen: Belgien, Bulgarien, Dänemark, Deutschland, die
Republik Nordmazedonien, Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Kroatien,
Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, Niederlande, Norwegen, Österreich, Polen, Portugal, Rumänien,
Schweden, Schweiz, Serbien, Slowakei, Slowenien, Spanien, Tschechische Republik, Türkei, Ungarn,
Vereinigtes Königreich und Zypern.
Anerkennungsnotiz
Der Text von ISO 23036-2:2021 wurde von CEN als EN ISO 23036-2:2021 ohne irgendeine Abänderung
genehmigt.
Vorwort
ISO (die Internationale Organisation für Normung) ist eine weltweite Vereinigung nationaler
Normungsinstitute (ISO-Mitgliedsorganisationen). Die Erstellung von Internationalen Normen wird
üblicherweise von Technischen Komitees von ISO durchgeführt. Jede Mitgliedsorganisation, die Interesse an
einem Thema hat, für welches ein Technisches Komitee gegründet wurde, hat das Recht, in diesem Komitee
vertreten zu sein. Internationale staatliche und nichtstaatliche Organisationen, die in engem Kontakt mit ISO
stehen, nehmen ebenfalls an der Arbeit teil. ISO arbeitet bei allen elektrotechnischen Normungsthemen eng
mit der Internationalen Elektrotechnischen Kommission (IEC) zusammen.
Die Verfahren, die bei der Entwicklung dieses Dokuments angewendet wurden und die für die weitere Pflege
vorgesehen sind, werden in den ISO/IEC-Direktiven, Teil 1 beschrieben. Es sollten insbesondere die
unterschiedlichen Annahmekriterien für die verschiedenen ISO-Dokumentenarten beachtet werden. Dieses
Dokument wurde in Übereinstimmung mit den Gestaltungsregeln der ISO/IEC-Direktiven, Teil 2 erarbeitet
(siehe www.iso.org/directives).
Es wird auf die Möglichkeit hingewiesen, dass einige Elemente dieses Dokuments Patentrechte berühren
können. ISO ist nicht dafür verantwortlich, einige oder alle diesbezüglichen Patentrechte zu identifizieren.
Details zu allen während der Entwicklung des Dokuments identifizierten Patentrechten finden sich in der
Einleitung und/oder in der ISO-Liste der erhaltenen Patenterklärungen (siehe www.iso.org/patents).
Jeder in diesem Dokument verwendete Handelsname dient nur zur Unterrichtung der Anwender und
bedeutet keine Anerkennung.
Für eine Erläuterung des freiwilligen Charakters von Normen, der Bedeutung ISO-spezifischer Begriffe und
Ausdrücke in Bezug auf Konformitätsbewertungen sowie Informationen darüber, wie ISO die Grundsätze der
Welthandelsorganisation (WTO, en: World Trade Organization) hinsichtlich technischer Handelshemmnisse
(TBT, en: Technical Barriers to Trade) berücksichtigt, siehe www.iso.org/iso/foreword.html.
Dieses Dokument wurde vom Technischen Komitee ISO/TC 34, Food products, Unterkomitee SC 9,
Microbiology, in Zusammenarbeit mit dem Europäischen Komitee für Normung (CEN), Technisches Komitee
N1
CEN/TC 275 , Lebensmittelanalytik – Horizontale Verfahren, in Übereinstimmung mit der Vereinbarung zur
technischen Zusammenarbeit zwischen ISO und CEN (Wiener Vereinbarung) erarbeitet.
Eine Auflistung aller Teile der Normenreihe ISO 23036 ist auf der ISO-Internetseite abrufbar.
Rückmeldungen oder Fragen zu diesem Dokument sollten an das jeweilige nationale Normungsinstitut des
Anwenders gerichtet werden. Eine vollständige Auflistung dieser Institute ist unter
www.iso.org/members.html zu finden.

N1
Nationale Fußnote: Fehler in der Referenzfassung, dieses Dokument wurde in Zusammenarbeit mit dem CEN/TC
463, Mikrobiologie der Lebensmittelkette erarbeitet.
Einleitung
Nematoden der Familie Anisakidae haben einen komplexen Lebenszyklus, der eine Vielzahl von Wirtstieren
umfasst. Adulte Vertreter der Anisakidae leben im Magen von Meeressäugern, wo sie sich in die Schleimhaut
einbetten. Von den adulten Weibchen produzierte, nicht embryonierte Eier werden mit den Fäkalien der
Meeressäuger ausgeschieden und im Meerwasser embryoniert, sodass sich Larven des ersten Stadiums (L1)
in den Eiern entwickeln. Die Larven häuten sich und werden zu freischwimmenden Larven des zweiten
Stadiums (L2). Werden sie von Krebstieren gefressen, entwickeln sie sich zu Larven des dritten Stadiums
(L3). In diesem Stadium sind sie infektiös für Fische und Kalmare. Durch Prädation werden die Larven von
Fisch zu Fisch übertragen, wobei sie im L3 Stadium verbleiben. Manche Larven wandern aus der Bauchhöhle
ins Muskelgewebe. Menschen sind Fehlwirte. Sie können sich durch den Verzehr von rohen oder nicht
ausreichend gegarten Fischen und Kopffüßern, die lebensfähige L3 enthalten, infizieren.
Nematoden der Familie Anisakidae sind Erreger der humanen Anisakidose, einer Krankheit, die nicht nur
eine Gefahr für die Gesundheit der Bevölkerung darstellt, sondern auch zu wirtschaft¬lichen Problemen für
Fischerei und Lebensmittelsicherheit führt (auch die Bezeichnung „Anisakiasis“ für die von Vertretern der
Gattung Anisakis hervorgerufene Krankheit ist geläufig). Weltweit fungieren marine und freilebende
anadrome Fische als Zwischenwirte der Anisakidae, dagegen sind Meeressäuger d
...

Questions, Comments and Discussion

Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.