ISO 5983-2:2009
(Main)Animal feeding stuffs — Determination of nitrogen content and calculation of crude protein content — Part 2: Block digestion and steam distillation method
Animal feeding stuffs — Determination of nitrogen content and calculation of crude protein content — Part 2: Block digestion and steam distillation method
ISO 5983-2:2009 specifies a method for the determination of nitrogen content of animal feeding stuffs according to the Kjeldahl method, and a method for the calculation of the crude protein content. It is suitable for use as a semi-micro rapid routine method using block digestion, copper catalyst, and steam distillation into boric acid. The method is applicable to the determination of greater than 0,5 % mass fraction Kjeldahl nitrogen in animal feeding stuffs, pet foods, and their raw materials. The method does not measure oxidized forms of nitrogen nor heterocyclic nitrogen compounds. The method does not distinguish between protein nitrogen and non-protein nitrogen.
Aliments des animaux — Dosage de l'azote et calcul de la teneur en protéines brutes — Partie 2: Méthode de digestion en bloc et distillation à la vapeur
L'ISO 5983‑2:2009 spécifie une méthode de détermination de la teneur en azote des aliments pour animaux suivant la méthode Kjeldahl, ainsi qu'une méthode pour le calcul de la teneur en protéines brutes. Elle peut être utilisée comme semi microméthode de routine rapide utilisant la digestion en bloc, un catalyseur au cuivre et une distillation à la vapeur dans de l'acide borique. La méthode est applicable à la détermination de l'azote Kjeldahl présent à plus de 0,5 % en fraction massique dans les aliments pour animaux, la nourriture pour animaux de compagnie et leurs matières premières. La méthode ne mesure pas les formes oxydées de l'azote ni les composés azotés hétérocycliques. La méthode ne fait pas la différence entre l'azote protéique et l'azote non protéique.
General Information
Relations
Buy Standard
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 5983-2
Second edition
2009-06-01
Animal feeding stuffs — Determination of
nitrogen content and calculation of crude
protein content —
Part 2:
Block digestion and steam distillation
method
Aliments des animaux — Dosage de l'azote et calcul de la teneur en
protéines brutes —
Partie 2: Méthode de digestion en bloc et distillation à la vapeur
Reference number
©
ISO 2009
PDF disclaimer
This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but
shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In
downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. The ISO Central Secretariat
accepts no liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.
Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation
parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies. In
the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.
© ISO 2009
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or
ISO's member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2009 – All rights reserved
Contents Page
Foreword. iv
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions. 2
4 Principle. 2
5 Reagents. 2
6 Apparatus . 4
7 Sampling. 4
8 Preparation of test sample. 5
9 Procedure . 5
9.1 General. 5
9.2 Test portion . 5
9.3 Determination. 5
9.4 Blank test. 6
9.5 Recovery tests . 7
10 Calculation and expression of results. 7
10.1 Calculation. 7
10.2 Calculation of crude protein content. 8
10.3 Expression of crude protein content results .8
11 Precision. 8
11.1 Interlaboratory tests . 8
11.2 Repeatability. 9
11.3 Reproducibility. 9
12 Test report . 9
Annex A (informative) Results of interlaboratory tests. 10
Annex B (informative) Results of a profiency test; comparison of the colorimetric and
potentiometric endpoint determination of the titration . 14
Bibliography . 15
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 5983-2 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 10, Animal
feeding stuffs.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 5983-2:2005), which has been technically
revised.
ISO 5983 consists of the following parts, under the general title Animal feeding stuffs — Determination of
nitrogen content and calculation of crude protein content:
⎯ Part 1: Kjeldahl method
⎯ Part 2: Block digestion and steam distillation method
iv © ISO 2009 – All rights reserved
INTERNATIONAL STANDARD ISO 5983-2:2009(E)
Animal feeding stuffs — Determination of nitrogen content and
calculation of crude protein content —
Part 2:
Block digestion and steam distillation method
WARNING — The use of this method may involve the use of hazardous materials, operations and
equipment. This part of ISO 5983 does not purport to address all the safety risks associated with its
use. It is the responsibility of the user of this method to establish appropriate health and safety
practices and determine the applicability of local regulatory limitations prior to use.
1 Scope
This part of ISO 5983 specifies a method for the determination of nitrogen content of animal feeding stuffs
according to the Kjeldahl method, and a method for the calculation of the crude protein content.
It is suitable for use as a semi-micro rapid routine method using block digestion, copper catalyst, and steam
distillation into boric acid.
The method is applicable to the determination of greater than 0,5 % mass fraction Kjeldahl nitrogen in animal
feeding stuffs, pet foods, and their raw materials.
The method does not measure oxidized forms of nitrogen nor heterocyclic nitrogen compounds.
The method does not distinguish between protein nitrogen and non-protein nitrogen.
NOTE If it is of importance to determine the content of non-protein nitrogen, an appropriate method can be used.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referred document
(including any amendments) applies.
ISO 1871, Food and feed products — General guidelines for the determination of nitrogen by the Kjeldahl
method
1)
ISO 6498, Animal feeding stuffs — Guidelines for sample preparation
1) To be published. (Revision of ISO 6498:1998)
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
nitrogen content
mass fraction of nitrogen determined by the procedure specified in this part of ISO 5983
NOTE The nitrogen content is expressed as a percentage mass fraction or in grams per kilogram.
3.2
crude protein content
nitrogen content (3.1) as a mass fraction multiplied by the factor 6,25
NOTE The crude protein content is expressed as a percentage mass fraction or in grams per kilogram.
4 Principle
The test portion is digested using a block digestion or equivalent apparatus. Concentrated sulfuric acid is used
to convert protein nitrogen to ammonium sulfate at a boiling point elevated by the addition of potassium sulfate.
A copper catalyst is used to enhance the reaction rate. An excess of sodium hydroxide is added to the cooled
digest to liberate ammonia.
The liberated ammonia is distilled, using a manual, semi-automatic or fully automatic steam distillation unit. In
the case of manual or semi-automatic steam distillation, distillation of the ammonia into an excess of boric
acid solution is followed by titration with hydrochloric acid solution to a colorimetric endpoint. Where a fully
automatic system is employed, automatic titration of the ammonia is carried out simultaneously with the
distillation and the endpoint of the titration can also be detected by means of a potentiometric pH system.
The nitrogen content is calculated from the amount of ammonia produced. The crude protein content is
obtained by multiplying the result by the conventional conversion factor of 6,25.
NOTE In principle, sulfuric acid can also be used for the titration.
5 Reagents
During the analysis, unless otherwise stated, use only reagents of recognized analytical grade and distilled or
demineralized water or water of equivalent purity.
5.1 Kjeldahl catalyst tablets, comprising 3,5 g of potassium sulfate and 0,4 g of copper(II) sulfate
pentahydrate per tablet.
These tablets are commercially available.
Other types of tablet may be used provided that:
a) they contain a quantity of potassium sulfate such that 7 g of potassium sulfate and 0,8 g of copper(II)
sulfate pentahydrate can be dispensed using an integral number of whole tablets; and
b) they do not contain salts of toxic metals such as selenium or mercury.
5.2 Sulfuric acid (H SO ), at least 98 % mass fraction, nitrogen-free (ρ ≈ 1,84 g/ml).
2 4 20
5.3 Hydrogen peroxide solution, containing approximately 30 g of H O per 100 ml.
2 2
2 © ISO 2009 – All rights reserved
5.4 Antifoaming agent. A silicone preparation is recommended, e.g. with a mass fraction of 30 % aqueous
emulsion.
5.5 Sodium hydroxide (NaOH) solution, approximately 40 % mass fraction, nitrogen-free (< 5 µg of
nitrogen per gram).
5.6 Indicator solutions.
5.6.1 Methyl red solution. Dissolve 100 mg of methyl red (C H N O ) in 100 ml of ethanol or methanol.
15 15 3 2
5.6.2 Bromocresol green solution. Dissolve 100 mg of bromocresol green (C H Br O S) in 100 ml of
21 14 4 5
ethanol or methanol.
5.7 Concentrated boric acid solution, c(H BO ) = 40,0 g/l.
3 3
Dissolve 400 g of boric acid in about 5 l to 6 l of hot water. Mix and add more hot water to a volume of about
9 l. Allow to cool to room temperature. Add 70 ml of the methyl red solution (5.6.1) and 100 ml of the
bromocresol green solution (5.6.2) and mix. Dilute to a final volume of 10 l with water and mix well. Depending
on the water used, the pH of the boric acid solution can differ from batch to batch. Often an adjustment with a
small volume of alkali is necessary to obtain a positive blank (0,05 ml to 0,15 ml of titrant). The colour should
turn green when 100 ml of water are added to 25 ml of the boric acid solution. If still red, titrate with 0,1 mol/l
NaOH until “neutral grey” and calculate the amount of alkali needed for the 10 l batch.
Store the solution, which is red in colour, at room temperature and protect the solution from light and sources
of ammonia fumes during storage.
5.8 Dilute boric acid solution, c(H BO ) = 10,0 g/l (optional trapping solution for titrators that automatically
3 3
begin titration when distillation begins).
Dissolve 100 g of boric acid in about 5 l to 6 l of hot water, mix and add more hot water to a volume of about
9 l. Allow to cool to room temperature. Add 70 ml of the methyl red solution (5.6.1) and 100 ml of the
bromocresol green solution (5.6.2) and mix. Dilute to a final volume of
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 5983-2
Deuxième édition
2009-06-01
Aliments des animaux — Dosage de
l'azote et calcul de la teneur en protéines
brutes —
Partie 2:
Méthode de digestion en bloc et
distillation à la vapeur
Animal feeding stuffs — Determination of nitrogen content and
calculation of crude protein content —
Part 2: Block digestion and steam distillation method
Numéro de référence
©
ISO 2009
PDF – Exonération de responsabilité
Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier
peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
autorisant l'utilisation de ces polices et que celles-ci y soient installées. Lors du téléchargement de ce fichier, les parties concernées
acceptent de fait la responsabilité de ne pas enfreindre les conditions de licence d'Adobe. Le Secrétariat central de l'ISO décline toute
responsabilité en la matière.
Adobe est une marque déposée d'Adobe Systems Incorporated.
Les détails relatifs aux produits logiciels utilisés pour la création du présent fichier PDF sont disponibles dans la rubrique General Info
du fichier; les paramètres de création PDF ont été optimisés pour l'impression. Toutes les mesures ont été prises pour garantir
l'exploitation de ce fichier par les comités membres de l'ISO. Dans le cas peu probable où surviendrait un problème d'utilisation,
veuillez en informer le Secrétariat central à l'adresse donnée ci-dessous.
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2009
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
de l'ISO à l'adresse ci-après ou du comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2009 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos. iv
1 Domaine d'application.1
2 Références normatives .1
3 Termes et définitions.2
4 Principe.2
5 Réactifs .2
6 Appareillage .4
7 Échantillonnage .5
8 Préparation de l'échantillon pour essai.5
9 Mode opératoire.5
9.1 Généralités .5
9.2 Prise d'essai .5
9.3 Détermination.5
9.4 Essai à blanc .7
9.5 Essais de récupération .7
10 Calcul et expression des résultats.8
10.1 Calcul .8
10.2 Calcul de la teneur en protéines brutes .8
10.3 Expression des résultats de teneur en protéines brutes .9
11 Fidélité .9
11.1 Essais interlaboratoires .9
11.2 Répétabilité.9
11.3 Reproductibilité.9
12 Rapport d'essai .10
Annexe A (informative) Résultats des essais interlaboratoires .11
Annexe B (informative) Résultats d'un essai d'aptitude; comparaison de la détermination par
virage coloré et de la détermination potentiométrique du point d'arrêt d'un titrage .15
Bibliographie .16
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 5983-2 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 10,
Aliments des animaux.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 5983-2:2005), qui a fait l'objet d'une
révision technique.
L'ISO 5983 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Aliments des animaux — Dosage
de l'azote et calcul de la teneur en protéines brutes:
⎯ Partie 1: Méthode Kjeldahl
⎯ Partie 2: Méthode de digestion en bloc et distillation à la vapeur
iv © ISO 2009 – Tous droits réservés
NORME INTERNATIONALE ISO 5983-2:2009(F)
Aliments des animaux — Dosage de l'azote et calcul de la
teneur en protéines brutes —
Partie 2:
Méthode de digestion en bloc et distillation à la vapeur
ATTENTION — La mise en œuvre de cette méthode peut impliquer l'emploi de matériaux, d'opérations
et d'équipements dangereux. La présente partie de l'ISO 5983 n'a pas pour but d'aborder tous les
problèmes de sécurité liés à son utilisation. Il incombe à l'utilisateur d'établir, avant de l'utiliser, des
pratiques d'hygiène et de sécurité appropriées et de déterminer l'applicabilité des restrictions
réglementaires.
1 Domaine d'application
La présente partie de l'ISO 5983 spécifie une méthode de détermination de la teneur en azote des aliments
pour animaux suivant la méthode Kjeldahl, ainsi qu'une méthode pour le calcul de la teneur en protéines
brutes.
Elle peut être utilisée comme semi-microméthode de routine rapide utilisant la digestion en bloc, un catalyseur
au cuivre et une distillation à la vapeur dans de l'acide borique.
La méthode est applicable à la détermination de l'azote Kjeldahl présent à plus de 0,5 % en fraction massique
dans les aliments pour animaux, la nourriture pour animaux de compagnie et leurs matières premières.
La méthode ne mesure pas les formes oxydées de l'azote ni les composés azotés hétérocycliques.
La méthode ne fait pas la différence entre l'azote protéique et l'azote non protéique.
NOTE S'il est nécessaire de déterminer la teneur en azote non protéique, une méthode appropriée peut être utilisée.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document référencé (y compris tous ses amendements) s'applique.
ISO 1871, Produits alimentaires — Lignes directrices générales pour le dosage de l'azote selon la méthode
de Kjeldahl
1)
ISO 6498, Aliments des animaux — Lignes directrices pour la préparation d'échantillons
1) À publier. (Révision de l’ISO 6498:1998)
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
teneur en azote
fraction massique d'azote déterminée par le mode opératoire spécifié dans la présente partie de l'ISO 5983
NOTE La teneur en azote est exprimée sous forme de fraction massique en pourcentage ou en grammes par
kilogramme.
3.2
teneur en protéines brutes
teneur en azote (3.1) exprimée en fraction massique multipliée par le facteur 6,25
NOTE La teneur en protéines brutes est exprimée sous forme de fraction massique en pourcentage ou en grammes
par kilogramme.
4 Principe
La prise d'essai est digérée en utilisant un bloc de digestion ou un appareillage équivalent. L'acide sulfurique
concentré sert à convertir l'azote protéique en sulfate d'ammonium à un point d'ébullition élevé par l'addition
de sulfate de potassium. Un catalyseur au cuivre est employé pour accélérer la réaction. De l'hydroxyde de
sodium est ajouté en excès au digestat refroidi afin de libérer l'ammoniac.
L'ammoniac libéré est distillé au moyen d'une unité de distillation à la vapeur, soit manuelle, soit partiellement
ou entièrement automatisée. Dans le cas d'une distillation à la vapeur manuelle ou semi-automatique, la
distillation de l'ammoniac dans un excès de solution d'acide borique est suivie du titrage avec une solution
d'acide chlorhydrique jusqu'à un point de virage coloré. Lorsqu'un système entièrement automatique est
employé, le titrage automatique de l'ammoniac est effectué simultanément à la distillation et le point d'arrêt du
titrage peut également être détecté à l'aide d'un système potentiométrique de mesure du pH.
La teneur en azote est calculée à partir de la quantité d'ammoniac produite. La teneur en protéines brutes est
obtenue en multipliant le résultat par le facteur de conversion conventionnel de 6,25.
NOTE En principe, de l'acide sulfurique peut aussi être utilisé pour le titrage.
5 Réactifs
Au cours de l'analyse, sauf indication contraire, utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique
reconnue et de l'eau distillée ou déminéralisée ou de pureté équivalente.
5.1 Comprimés de catalyseur Kjeldahl, contenant 3,5 g de sulfate de potassium et 0,4 g de sulfate de
cuivre(II) pentahydraté par comprimé.
Ces comprimés sont disponibles dans le commerce.
D'autres types de comprimés peuvent être utilisés à condition:
a) qu'ils contiennent une quantité de sulfate de potassium telle que 7 g de sulfate de potassium et 0,8 g de
sulfate de cuivre(II) pentahydraté puissent être libérés par un nombre entier de comprimés entiers, et
b) qu'ils ne contiennent pas de sels de métaux toxiques tels que du sélénium ou du mercure.
5.2 Acide sulfurique (H SO ), d'au moins 98 % en fraction massique, sans azote (ρ ≈ 1,84 g/ml).
2 4 20
5.3 Solution de peroxyde d'hydrogène, contenant environ 30 g de H O pour 100 ml.
2 2
2 © ISO 2009 – Tous droits réservés
5.4 Agent antimousse. Une préparation à base de silicone est recommandée, par exemple une émulsion
aqueuse à 30 % en fraction massique.
5.5 Hydroxyde de sodium (NaOH) en solution, à environ 40 % en fraction massique, sans azote
(< 5 µg d'azote par gramme).
5.6 Solutions d'indicateurs.
5.6.1 Solution de rouge de méthyle. Dissoudre 100 mg de rouge de méthyle (C H N O ) dans 100 ml
15 15 3 2
d'éthanol ou de méthanol.
5.6.2 Solution de vert de bromocrésol. Dissoudre 100 mg de vert de bromocrésol (C H Br O S) dans
21 14 4 5
100 ml d'éthanol ou de méthanol.
5.7 Solution d'acide borique concentrée, c(H BO ) = 40,0 g/l.
3 3
Dissoudre 400 g d'acide borique dans environ 5 l à 6 l d'eau chaude. Mélanger et ajouter encore de l'eau
chaude jusqu'à un volume d'environ 9 l. Laisser refroidir à la température ambiante. Ajouter 70 ml de solution
de rouge de méthyle (5.6.1) et 100 ml de solution de vert de bromocrésol (5.6.2) puis mélanger. Diluer avec
de l'eau jusqu'à un volume
...
МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 5983-2
Второе издание
2009-06-01
Корма для животных. Определение
содержания азота и расчет содержания
сырого белка.
Часть 2.
Метод с использованием блока для
озоления и перегонки с водяным
паром
Animal feeding stuffs – Determination of nitrogen content and
calculation of crude protein content –
Part 2: Block digestion and steam distillation method
Ответственность за подготовку русской версии несёт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава ISO
Ссылочный номер
©
ISO 2009
Отказ от ответственности при работе в PDF
Настоящий файл PDF может содержать интегрированные шрифты. В соответствии с условиями лицензирования, принятыми
фирмой Adobe, этот файл можно распечатать или смотреть на экране, но его нельзя изменить, пока не будет получена
лицензия на интегрированные шрифты и они не будут установлены на компьютере, на котором ведется редактирование. В
случае загрузки настоящего файла заинтересованные стороны принимают на себя ответственность за соблюдение
лицензионных условий фирмы Adobe. Центральный секретариат ISO не несет никакой ответственности в этом отношении.
Adobe – торговый знак фирмы Adobe Systems Incorporated.
Подробности, относящиеся к программным продуктам, использованные для создания настоящего файла PDF, можно найти в
рубрике General Info файла; параметры создания PDF были оптимизированы для печати. Были приняты во внимание все
меры предосторожности с тем, чтобы обеспечить пригодность настоящего файла для использования комитетами-членами
ISO. В редких случаях возникновения проблемы, связанной со сказанным выше, просьба проинформировать Центральный
секретариат по адресу, приведенному ниже.
ДОКУМЕНТ ОХРАНЯЕТСЯ АВТОРСКИМ ПРАВОМ
Все права сохраняются. Если не указано иное, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия ISO, которое должно быть получено после запроса о разрешении, направленного по
адресу, приведенному ниже, или в комитет-член ISO в стране запрашивающей стороны.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO 2009 – Все права сохраняются
Содержание Страница
Предисловие .iv
1 Область применения .1
2 Нормативные ссылки .1
3 Термины и определения .2
4 Принцип.2
5 Реактивы .2
6 Аппаратура.4
7 Отбор проб.5
8 Приготовление пробы для испытания.5
9 Методика .5
9.1 Общие положения .5
9.2 Проба для анализа .5
9.3 Определение.6
9.4 Контрольный опыт.7
9.5 Испытания на извлечение .7
10 Расчет и выражение результатов .8
10.1 Расчет .8
10.2 Расчет содержания сырого белка.9
10.3 Выражение результатов содержания сырого белка.9
11 Прецизионность.10
11.1 Межлабораторное испытание.10
11.2 Повторяемость .10
11.3 Воспроизводимость .10
12 Протокол испытания.10
Приложение А (информативное) Результаты межлабораторных испытаний.12
Приложение B (информативное) Результаты квалификационного испытания; сравнение
результатов определения конечной точки при колориметрическом и
потенциометрическом титровании.16
Библиография.17
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) является всемирной федерацией национальных
организаций по стандартизации (комитетов-членов ISO). Разработка международных стандартов
обычно осуществляется техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член ISO, заинтересованный
в деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть представленным в
этом комитете. Международные организации, правительственные и неправительственные, имеющие
связи с ISO, также принимают участие в работах. ISO непосредственно сотрудничает с
Международной электротехнической комиссией (IEC) по всем вопросам электротехнической
стандартизации.
Международные стандарты разрабатываются в соответствии с правилами, приведенными в
Директивах ISO/IEC, Часть 2.
Основная задача технических комитетов состоит в подготовке международных стандартов. Проекты
международных стандартов, одобренные техническими комитетами, рассылаются комитетам-членам
на голосование. Их опубликование в качестве международных стандартов требует одобрения, по
меньшей мере, 75 % комитетов-членов, принимающих участие в голосовании.
Следует иметь в виду, что некоторые элементы настоящего документа могут быть объектом патентных
прав. ISO не должен нести ответственность за идентификацию какого-либо одного или всех патентных
прав.
Международный стандарт ISO 5983-2 был подготовлен Техническим комитетом ISO/TC 34, Пищевые
продукты, Подкомитетом SC 10, Корма для животных.
Настоящее второе издание отменяет и заменяет первое издание (ISO 5983-2:2005), которое было
подвергнуто техническому пересмотру.
ISO 5983 состоит из следующих частей под общим названием Корма для животных. Определение
содержания азота и расчет содержания сырого белка:
⎯ Часть 1. Метод Кьельдаля
⎯ Часть 2. Метод с использованием блока для озоления и перегонки с водяным паром
iv © ISO 2009 – Все права сохраняются
МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ ISO 5983-2:2009(R)
Корма для животных. Определение содержания азота и
расчет содержания сырого белка.
Часть 2.
Метод с использованием блока для озоления и перегонки с
водяным паром
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ — Использование этого стандарта может включать опасные материалы,
процессы и оборудование. Настоящая часть ISO 5983 не ставит своей целью рассмотрение всех
рисков для безопасности, связанных с её применением. Установление соответствующих
правил по технике безопасности и охране здоровья и определение применимости
регламентных ограничений перед его использованием является обязанностью пользователя
данного стандарта.
1 Область применения
Настоящая часть ISO 5983 устанавливает метод определения содержания азота в кормах для
животных в соответствии с методом Къельдаля, а также метод расчета содержания сырого белка.
В стандарте рассматривается практический полумикро-экспресс-метод с использованием блока для
озоления, медного катализатора и перегонки с водяным паром в борную кислоту.
Данный метод применим для определения более 0,5 % (массовая доля) азота по Къельдалю в кормах
для скота и домашних животных, а также в сырье для них.
Данным методом не определяются окисленные формы азота или гетероциклические соединения азота.
Этим методом нельзя различить белковый и небелковый азот.
ПРИМЕЧАНИЕ Если важно определить содержание небелкового азота, можно использовать
соответствующий метод.
2 Нормативные ссылки
Следующие ссылочные нормативные документы являются обязательными при применении данного
документа. Для жестких ссылок применяется только цитированное издание документа. Для плавающих
ссылок необходимо использовать самое последнее издание нормативного ссылочного документа
(включая любые изменения).
ISO 1871, Продукты пищевые и кормовые. Определение содержания азота методом Кьельдаля.
Общие руководящие указания
1)
ISO 6498:1998, Корма для животных. Руководящие указания по подготовке проб
1) Будет опубликован. (Пересмотр ISO 6498:1998)
3 Термины и определения
Применительно к данному документу используются следующие термины и определения.
3.1
содержание азота
nitrogen content
массовая доля азота, определенная по методике, установленной в настоящей части ISO 5983
ПРИМЕЧАНИЕ Содержание азота выражают в виде массовой доли в процентах или граммах на килограмм.
3.2
содержание сырого белка
crude protein content
содержание азота (3.1) в виде массовой доли, умноженное на коэффициент 6,25
ПРИМЕЧАНИЕ Содержание сырого белка выражают в виде массовой доли в процентах или граммах на
килограмм.
4 Принцип
Пробу для анализа разлагают в блоке для озоления или эквивалентном аппарате. Концентрированную
серную кислоту используют для превращения белкового азота в сульфат аммония при повышенной
температуре кипения в результате добавления сульфата калия. Медный катализатор используется
для увеличения скорости реакции. Для выделения аммиака к охлажденному продукту разложения
добавляют избыток гидроксида натрия.
Выделяемый аммиак отгоняют, используя ручной, полуавтоматический или полностью автоматический
аппарат для перегонки с водяным паром. В случае использования ручной или полуавтоматической
перегонки с водяным паром после отгонки аммиака в избыток раствора борной кислоты выполняют
титрование раствором соляной кислоты до достижения колориметрической конечной точки. В случае
использования полностью автоматической системы автоматическое титрование аммиака выполняют
одновременно с перегонкой, а конечная точка титрования может быть также определена с помощью
потенциометрической рН-системы.
Содержание азота рассчитывают исходя из количества полученного аммиака. Содержание сырого
белка получают, умножая результат на переводной коэффициент 6,25.
ПРИМЕЧАНИЕ В принципе, для титрования можно также использовать серную кислоту.
5 Реактивы
При анализе используют реактивы только признанного аналитического качества, если не оговорено
иначе, и дистиллированную или деионизированную воду или воду эквивалентной чистоты.
5.1 Таблетки катализатора Къельдаля, содержащие 3,5 г сульфата калия и 0,4 г пентагидрата
сульфата меди(II) на таблетку.
Эти таблетки имеются в продаже.
Могут использоваться и другие типы таблеток при условии, что
a) они содержат такое количество сульфата калия, что может быть распределено 7 г сульфата калия
и 0,8 г пентагидрата сульфата меди(II), используя целое число целых таблеток, и
b) они не содержат солей токсичных металлов, таких как селен или ртуть.
2 © ISO 2009 – Все права сохраняются
5.2 Серная кислота (H SO ), с массовой долей, по меньшей мере, 98 %, не содержащая азот
2 4
(приблизительно ρ ≈ 1,84 г/мл).
5.3 Раствор пероксида водорода, содержащий приблизительно 30 г H O на 100 мл.
2 2
5.4 Противовспенивающий агент. Рекомендуются составы на основе силикона, например,
водная эмульсия с массовой долей 30 %.
5.5 Раствор гидроксида натрия (NaOH), приблизительно 40 % (массовая доля), не содержащий
азот (< 5 мкг N на грамм).
5.6 Растворы индикаторов.
5.6.1 Раствор метилового красного. Растворяют 100 мг метилового красного (C H N O ) в
15 15 3 2
100 мл этанола или метанола.
5.6.2 Бромкрезоловый зеленый. Растворяют 100 мг бромкрезолового зеленого (C H Br O S) в
21 14 4 5
100 мл этанола или метанола.
5.7 Концентрированный раствор борной кислоты, c(H BO ) = 40,0 г/л.
3 3
Растворяют 400 г борной кислоты приблизительно в 5 л - 6 л горячей воды. Перемешивают и
добавляют еще горячей воды до объема приблизительно 9 л. Оставляют охлаждаться до комнатной
температуры. Добавляют 70 мл раствора метилового красного (5.6.1) и 100 мл раствора
бромкрезолового зеленого (5.6.2) и перемешивают. Разбавляют водой до конечного объема 10 л и
хорошо перемешивают. В зависимости от используемой воды pH раствора борной кислоты может
изменяться от партии к партии. Часто необходимо сделать корректировку небольшим объемом щелочи,
чтобы получить положительный результат при контрольном опыте (от 0,05 мл до 0,15 мл титров
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.