ISO 16588:2002

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 16588
First edition
2002-11-01
Water quality — Determination of six
complexing agents — Gas-chromatographic
method
Qualité de l'eau — Dosage de six agents complexants — Méthode par
chromatographie en phase gazeuse

Reference number
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ii ISO 2002 – All rights reserved

Contents Page
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Principle . 2
4 Interferences . 2
5 Reagents . 2
6 Apparatus . 4
7 Sampling and sample stabilization . 4
8 Procedure . 5
9 Calibration . 7
10 Expression of results . 9
11 Test report . 9
Annex
A Examples of columns, chromatograms and mass spectra. 10
Bibliography. 12
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ISO 2002 – All rights reserved iii

Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO
member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical
committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has
the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in
liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical
Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 3.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting.
Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this International Standard may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
International Standard ISO 16588 was prepared by Technical Committee ISO/TC 147, Water quality, Subcommittee
SC 2, Physical, chemical and biochemical methods.
Annex A of this International Standard is for information only.
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iv ISO 2002 – All rights reserved

Introduction
It is essential that the test described in this International Standard be carried out by suitably qualified staff.
It should be investigated whether and to what extent particular problems will require the specification of additional
conditions.
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ISO 2002 – All rights reserved v

INTERNATIONAL STANDARD ISO 16588:2002(E)
Water quality — Determination of six complexing agents —
Gas-chromatographic method
WARNING — Persons using this International Standard should be familiar with normal laboratory practice.
This standard does not purport to address all of the safety problems, if any, associated with its use. It is the
responsibility of the user to establish appropriate safety and health practices and to ensure compliance with
any national regulatory conditions.
1 Scope
This International Standard specifies a method for the determination of the water-soluble organic complexing agents
listed in Table 1 in the concentration range from 0,5µg/l to 200µg/l, if a sample volume between 50 ml and 100 ml is
used. The concentration range may change if diluted solutions are analysed. The method is applicable to drinking,
ground, surface and waste water.
Table 1 — Complexing agents determinable by this method
a
No. Name Composition Molecular mass CAS number
1EDTA — ethylenedinitrilotetraacetic acid C H O N 292,25 60-00-4
10 16 8 2
2NTA — nitrilotriacetic acid C H O N 191,14 139-13-9
6 9 6
3DTPA — diethylenetrinitrilopentaacetic acid C H O N 393,35 67-43-6
14 23 10 3
4MGDA — methylglycinediacetic acid C H O N 205,17 29578-05-0
7 11 6
5ββ-ADA — -alaninediacetic acid C H O N 205,17 6245-75-6
7 11 6
61,3-PDTA — 1,3-propylenedinitrilotetraacetic acid C H O N 306,27 1939-36-2
11 18 8 2
a
CAS: Chemical Abstracts System
In waste water analysis, it is recommended that a smaller sample volume, e.g. 5ml or 10ml, be used in order to
reduce matrix effects.
The adsorption of the six complexing agents on solid materials is negligibly low.
Other complexing agents of similar composition may also be determined using this method, provided they behave
similarly during sample pretreatment, derivatization and gas chromatography. This shall be checked in each
individual case.
2 Normative references
The following normative documents contain provisions which, through reference in this text, constitute provisions of
this International Standard. For dated references, subsequent amendments to, or revisions of, any of these
publications do not apply. However, parties to agreements based on this International Standard are encouraged to
investigate the possibility of applying the most recent editions of the normative documents indicated below. For
undated references, the latest edition of the normative document referred to applies. Members of ISO and IEC
maintain registers of currently valid International Standards.
ISO 3696:1987, Water for analytical laboratory use — Specification and test methods
ISO 5667-1:1980, Water quality — Sampling — Part 1: Guidance on the design of sampling programmes
ISO 5667-2:1991, Water quality — Sampling — Part 2: Guidance on sampling techniques
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ISO 2002 – All rights reserved 1

3Principle
A test sample is stabilized with formaldehyde and evaporated to dryness. Hydrochloric or formic acid is added and
the sample again evaporated to dryness. The complexing agents are then esterified to the n-propyl, iso-propyl or
n-butyl esters. Water is added and the esters are extracted with n-hexane, separated and identified by gas
chromatography, and determined quantitatively with a nitrogen-sensitive detector or by mass spectrometry.
For the determination of EDTA, DTPA, and 1,3-PDTA, 1,2-propylenedinitrotetraacetic acid (1,2-PDTA) is used as an
internal standard through the whole procedure. When a nitrogen-sensitive detector is used, heptadecane- and/or
octadecanenitrile is used as a control standard in the gas-chromatographic step. 1-Chorotetradecane may be used
as the control standard if detection by mass spectrometry is chosen.
Alternatively, C-labelled standards may be used.
4 Interferences
In spite of their stability, complexes of these complexing agents with heavy metals are broken up and the complexing
agents determined, except in the case of bismuth. With samples containing bismuth in concentrations > 100µg/l,
losses can be expected.
In the case of high salt concentrations (> 2 g/l of NaCl, corresponding to an electrical conductivity of about
400 mS/m), complete evaporation to dryness may be difficult. The complete removal of water is necessary, however,
for the subsequent esterification. Therefore, samples have to be diluted or smaller sample volumes have to be taken.
2+
In the presence of calcium ions in concentrations exceeding 200 mg/l of Ca , losses of EDTA will occur.
5Reagents
All reagents shall be free from impurities which could interfere with the reactions. Throughout the procedure, use only
deionized water (5.1).
5.1 Deionized water, grade 1 as specified in ISO 3696.
5.2 Gases for gas chromatography and mass spectrometry, as specified by the instrument manufacturers.
5.3 Nitrogen, of purity � 99,996 %.
5.4 n-Propanol or iso-propanol or n-butanol for the preparation of esterification reagent (5.6).
5.5 Acetyl chloride.
5.6 Esterification reagent.
Cautiously mix by swirling in a 400 ml beaker 90 ml of n-propanol or iso-propanol or n-butanol (5.4) with 10 ml of
acetyl chloride (5.5).
CAUTION — Considerable heat is evolved.
The mixture is stable for at least 1 month if stored at room temperature.
5.7 Reference compounds.
5.7.1 Nitrilotriacetic acid (NTA), C H O N, of purity � 99 %.
6 9 6
5.7.2 Ethylenedinitrilotetraacetic acid (EDTA), C H O N , of purity � 99 %.
10 16 8 2
5.7.3 Diethylenetrinitrilopentaacetic acid (DTPA), C H O N , of purity � 99 %.
14 23 10 3
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2 ISO 2002 – All rights reserved

5.7.4 Methylglycinediacetic acid (MGDA), C H O N.
7 11 6
5.7.5 ββββ-Alaninediacetic acid (ββββ-ADA), C H O N.
7 11 6
5.7.6 1,3-Propylenedinitrilotetraacetic acid (1,3-PDTA), C H O N , of purity � 99 %.
11 18 8 2
5.7.7 C-labelled reference compounds as listed in 5.7.1 to 5.7.6 (optional).
5.8 Control standards and internal standard.
5.8.1 Octadecanenitrile, C H N, of purity > 98 %.
18 35
5.8.2 Heptadecanenitrile, C H N, of purity > 98 %.
17 33
5.8.3 1-Chlorotetradecane, C H Cl, of purity > 98 %.
14 29
5.8.4 1,2-Propylenedinitrilotetraacetic acid (1,2-PDTA), C H O N , of purity > 98 %.
11 18 8 2
5.9 Formaldehyde, 37 % by volume aqueous solution.
5.10 n-Hexane.
5.11 Sodium sulfate, anhydrous.
5.12 Sodium hydroxide solution, .c(NaOH)= 1 mol/l
5.13 Hydrochloric acid, .c(HCl)= 5 mol/l
5.14 Hydrochloric acid, .c(HCl)= 1 mol/l
5.15 Formic acid, 50 % by volume aqueous solution.
5.16 Stock solutions for calibration purposes, .1 g/l
Prepare 1 g/l stock solutions as follows. Weigh 100 mg of each of the complexing agents 5.7.1 to 5.7.6 and 5.8.4 into
100 ml volumetric flasks, dissolve in 2 ml of sodium hydroxide solution (5.12) and make up to the mark with water
(5.1).
Stored in a refrigerator in brown glass bottles, the stock solutions are stable for at least 3 months.
5.17 Intermediate stock solutions, 1 mg/land 10 mg/l.
Prior to each series of analyses, prepare intermediate stock solutions of and by diluting the stock
10 mg/l 1 mg/l 1 g/l
solutions (5.16) with water (5.1).
5.18 Nitrile control standard, 0,5 mg/l solution in hexane.
Dissolve of octadecanenitrile (5.8.1) and/or heptadecanenitrile (5.8.2) in of n-hexane (5.10).
100 mg 100 ml
◦
Store the solution in a refrigerator at 4 C.
The solution is stable for at least 3 months.
Before use, dilute this solution to 0,5 mg/l.
5.19 1-Chlorotetradecane control standard, 0,5 mg/l solution in hexane.
Dissolve 100 mg of 1-chlorotetradecane (5.8.3) in 100 ml of n-hexane (5.10).
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ISO 2002 – All rights reserved 3

◦
Store the solution in a refrigerator at 4 C.
The solution is stable for at least 3 months.
Before use, dilute this solution to 0,5 mg/l.
6 Apparatus
6.1 Glassware, to be used only for the determination of complexing agents.
The use of detergents may lead to contamination. If contamination occurs, rinse the glassware with sodium
hydroxide (5.12).
6.2 Ultrasonic bath.
6.3 Heating device, preferably a drying oven, suitable for evaporating water samples to dryness.
6.4 Equipment for passing an adjustable flow of nitrogen over the surface of the water samples during
evaporation in the heating device (6.3).
6.5 Rotary evaporator.
◦
6.6 Heating block, suitable for esterifying samples in sample vials (6.8) at (90± 3) C.
During esterification, insert the sample vials into the heating block to about half of their volume (use metal rings to
hold them in place).
6.7 Pipettes, 0,1 ml to 10 ml, or dispensers.
6.8 Disposable vials with PTFE-lined septa (PTFE = polytetrafluoroethylene), 3ml and 12ml.
6.9 pH meter, accuracy ± 0,1.
6.10 Beakers, .400 ml
6.11 Gas chromatograph with mass-spectrometric detector.
6.12 Gas chromatograph with nitrogen-sensitive (NPD) detector.
6.13 Capillary column for gas chromatography, made of fused sili
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 16588
Première édition
2002-11-01
Qualité de l'eau — Dosage de six agents
complexants — Méthode par
chromatographie en phase gazeuse
Water quality — Determination of six complexing agents — Gas-
chromatographic method
Numéro de référence
PDF — Exonération de responsabilité
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être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence autorisant
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ii ISO 2002 – Tous droits réservés

Sommaire Page
1 Domaine d'application . 1
2 Références normatives . 1
3 Principe . 2
4 Interférences . 2
5 Réactifs . 2
6 Appareillage . 4
7 Échantillonnage et stabilisation des échantillons . 5
8 Mode opératoire . 5
9 Étalonnage . 8
10 Expression des résultats . 9
11 Rapport d'essai . 10
Annexe
A Exemples de colonnes, d’un chromatogramme et de spectres de masse. 11
Bibliographie. 13
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ISO 2002 – Tous droits réservés iii

Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison
avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique
internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI, Partie 3.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour
vote. Leur publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments de la présente Norme internationale peuvent faire l'objet
de droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas
avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
La Norme internationale ISO 16588 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 147, Qualité de l'eau, sous-
comité SC 2, Méthodes physiques, chimiques et biochimiques.
L'annexe A de la présente Norme internationale est donnée uniquement à titre d'information.
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iv ISO 2002 – Tous droits réservés

Introduction
Il est essentiel que l'essai conduit selon la présente Norme internationale soit effectué par un personnel
convenablement qualifié.
Il convient de vérifier si des problèmes particuliers nécessitent la spécification de conditions supplémentaires, et
dans quelle mesure.
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NORME INTERNATIONALE ISO 16588:2002(F)
Qualité de l'eau — Dosage de six agents complexants — Méthode
par chromatographie en phase gazeuse
AVERTISSEMENT —Il convient que les personnes utilisant la présente Norme internationale soient
familières des pratiques courantes de laboratoire. La présente Norme internationale ne prétend pas aborder
tous les éventuels problèmes de sécurité liés à son utilisation. Il est de la responsabilité de l'utilisateur
d'établir des pratiques de santé et de sécurité appropriées et de s'assurer de la conformité aux exigences
réglementaires nationales.
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale spécifie une méthode pour le dosage des agents complexants organiques
solubles dans l’eau répertoriés au Tableau 1, dans la gamme de concentrations allant de 0,5µg/l à 200µg/lsi un
volume d'échantillon compris entre 50 ml et 100 ml est utilisé. Il est possible de modifier la gamme de concentrations
pour l'analyse de dilutions. La méthode est applicable à l'eau potable, aux eaux souterraines, aux eaux de surface et
aux eaux usées.
Pour l'analyse d'eaux usées, il est recommandé de diluer un volume d'échantillon plus petit, par exemple 5ml à
10 ml, pour réduire les effets de matrices.
L'adsorption des six agents complexants par les matières solides est négligeable.
La présente méthode permet également d’effectuer le dosage d'autres agents complexants de composition similaire,
sous réserve qu'ils réagissent de la même manière lors du prétraitement des échantillons, de la dérivation et de la
chromatographie en phase gazeuse. Cela doit faire l'objet d'un contrôle dans chaque cas individuel.
Tableau 1 — Agents complexants pouvant être dosés par la présente méthode
Masse
o a
N Nom Composition Numéro CAS
moléculaire
1EDTA – acide éthylènedinitrilotétraacétique C H O N 292,25 60-00-4
10 16 8 2
2NTA – acide nitrilotriacétique C H O N 191,14 139-13-9
6 9 6
3DTPA – acide diéthylènetrinitrilopentaacétique C H O N 393,35 67-43-6
14 23 10 3
4MGDA – acide méthylglyacinediacétique C H O N 205,17 29578-05-0
7 11 6
5-ββADA – acide -alaninediacétique C H O N 205,17 6245-75-6
7 11 6
61,3-PDTA – acide 1,3-propylènedinitrilotétraacétique C H O N 306,27 1939-36-2
11 18 8 2
a
CAS: Chemical Abstracts System (= Système d’abréviations chimiques).
2Références normatives
Les documents normatifs suivants contiennent des dispositions qui, par suite de la référence qui y est faite,
constituent des dispositions valables pour la présente Norme internationale. Pour les références datées, les
amendements ultérieurs ou les révisions de ces publications ne s'appliquent pas. Toutefois, les parties prenantes
aux accords fondés sur la présente Norme internationale sont invitées à rechercher la possibilité d'appliquer les
éditions les plus récentes des documents normatifs indiqués ci-après. Pour les références non datées, la dernière
édition du document normatif en référence s'applique. Les membres de l'ISO et de la CEI possèdent le registre des
Normes internationales en vigueur.
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ISO 2002 – Tous droits réservés 1

ISO 3696:1987, Eau pour laboratoire à usage analytique — Spécification et méthodes d'essai
ISO 5667-1:1980, Qualité de l'eau — Échantillonnage — Partie1: Guide général pour l'établissement des
programmes d'échantillonnage
ISO 5667-2:1991, Qualité de l'eau — Échantillonnage — Partie2: Guide général sur les techniques
d'échantillonnage
3Principe
Stabilisation de l'échantillon pour essai avec du formaldéhyde et évaporation jusqu'à siccité. Ajout d'acide
chlorhydrique ou d'acide formique et nouvelle évaporation jusqu’à siccité. Estérification des agents complexants en
esters n-propyle, iso-propyle ou n-butyle. Addition d'eau et extraction des esters au n-hexane. Séparation par
chromatographie en phase gazeuse, puis identification et quantification avec un détecteur sensible à l'azote ou par
spectrométrie de masse.
Pour le dosage d’EDTA, de DTPA et de 1,3-PDTA, utiliser de l'acide 1,2-propylènedinitrilotétraacétique (1,2-PDTA)
comme étalon interne pour l'ensemble du mode opératoire. En cas d'utilisation d'un détecteur sensible à l'azote,
utiliser du nitrile d'hepta- et/ou octadécane comme étalon témoin pour l'étape de chromatographie en phase
gazeuse. Il est possible d'utiliser du 1-chlorotétradécane comme étalon témoin si une détection par spectrométrie de
masse est choisie.
Des témoins marqués au C peuvent être utilisés comme solution alternative.
4Interférences
En dépit de leur stabilité, les complexes de ces agents complexants avec des métaux lourds sont résolus et les
agents complexants sont dosés, sauf dans le cas du bismuth. Avec les échantillons contenant du bismuth dans des
concentrations > 100µg/l, il est possible d'avoir des pertes.
En cas de fortes concentrations en sel (> 2 g/l de NaCl, ce qui correspond à une conductivité électrique de l'ordre
de 400 mS/m), la réduction jusqu'à siccité peut se révéler difficile. L'élimination complète de l'eau est cependant
nécessaire pour procéder ensuite à l'estérification. Il est donc nécessaire de diluer les échantillons ou de prélever de
2+
plus petits volumes d'échantillon. En présence d'ions calcium en concentrations excédant 200 mg/l de Ca , des
pertes d'EDTA se produiront.
5Réactifs
Tous les réactifs doivent être exempts d'impuretés, lesquelles sont susceptibles d’interférer avec les réactions. Tout
au long du présent mode opératoire, utiliser uniquement de l’eau déionisée (5.1).
5.1 Eau déionisée, conforme à la qualité 1 telle que définie dans l'ISO 3696.
5.2 Gaz pour chromatographie en phase gazeuse et spectrométrie de masse, tels que définis par les
fabricants des instruments.
5.3 Azote, de pureté .� 99,996 %
5.4 n-Propanol, ou iso-propanol, ou n-butanol, pour la préparation du réactif d'estérification (5.6).
5.5 Chlorure d'acétyle.
©
2 ISO 2002 – Tous droits réservés

5.6 Réactif d'estérification.
Dans un bécher de 400 ml, mélanger soigneusement, en tournant, 90 ml de n-propanol ou d’iso-propanol ou de
n-butanol (5.4) avec 10 ml de chlorure d'acétyle (5.5).
AVERTISSEMENT — Un fort dégagement de chaleur est généré.
Le mélange est stable pendant au moins 1 mois à température ambiante.
5.7 Composés de référence.
5.7.1 Acide nitrilotriacétique (NTA), C H O N, de pureté .� 99 %
6 9 6
5.7.2 Acide éthylènediaminetétraacétique (EDTA), C H O N , de pureté .� 99 %
10 16 8 2
� 99 %
5.7.3 Acide diéthylènetrinitrilopentaacétique (DTPA), C H O N , de pureté .
14 23 10 3
5.7.4 Acide méthylglycinediacétique (MGDA), C H O N.
7 11 6
5.7.5 Acide ββββ-alaninediacétique (ββββ-ADA), C H O N.
7 11 6
� 99 %
5.7.6 Acide 1,3-propylènedinitrilotétraacétique (1,3-PDTA), C H O N , de pureté .
11 18 8 2
5.7.7 Composés de référence (5.7.1 à 5.7.6) marqués au C (facultatifs).
5.8 Étalons de contrôle et étalon interne.
5.8.1 Nitrile d'octadécane, C H N, de pureté .> 98 %
18 35
5.8.2 Nitrile d'heptadécane, C H N, de pureté .> 98 %
17 33
5.8.3 1-Chlorotétradécane, C H Cl, de pureté .> 98 %
14 29
5.8.4 Acide 1,2-propylènedinitrilotétraacétique (1,2-PDTA), C H N O , de pureté .> 98 %
11 18 2 8
5.9 Formaldéhyde, solution aqueuse à 37 % en volume.
5.10 n-Hexane.
5.11 Sulfate de sodium, anhydre.
5.12 Solution d'hydroxyde de sodium, c(NaOH)= 1 mol/l.
5.13 Acide chlorhydrique, c(HCl)= 5 mol/l.
5.14 Acide chlorhydrique, c(HCl)= 1 mol/l.
5.15 Acide formique, solution aqueuse à 50 % en volume.
5.16 Solutions mères pour étalonnage, .1 g/l
Préparer des solutions mères dans des concentrations en masse de 1 g/l comme suit. Peser 100 mg de chacun des
agents complexants 5.7.1 à 5.7.6 et 5.8.4 dans des fioles graduées de 100 ml, dissoudre dans 2 ml de solution
d'hydroxyde de sodium (5.12) et compléter au volume avec de l'eau (5.1).
Stockées au réfrigérateur dans des flacons en verre brun, les solutions mères sont stables pendant au moins 3 mois.
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ISO 2002 – Tous droits réservés 3

5.17 Solutions mères intermédiaires, 1 mg/let 10 mg/l.
Avant chaque série d'analyses, préparer des solutions mères intermédiaires de 10 mg/l et de 1 mg/l en diluant les
solutions mères (5.16) avec de l'eau (5.1).
5.18 Étalon de contrôle au nitrile, .0,5 mg/l
Dissoudre 100 mg de nitrile d'octadécane (5.8.1) et/ou de nitrile d'heptadécane (5.8.2) dans 100 ml de n-hexane
(5.10).
◦
Stocker la solution au réfrigérateur à .4 C
La solution est stable pendant au moins 3 mois.
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 16588
Première édition
2002-11-01
Qualité de l'eau — Dosage de six agents
complexants — Méthode par
chromatographie en phase gazeuse
Water quality — Determination of six complexing agents — Gas-
chromatographic method
Numéro de référence
PDF — Exonération de responsabilité
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ii ISO 2002 – Tous droits réservés

Sommaire Page
1 Domaine d'application . 1
2 Références normatives . 1
3 Principe . 2
4 Interférences . 2
5 Réactifs . 2
6 Appareillage . 4
7 Échantillonnage et stabilisation des échantillons . 5
8 Mode opératoire . 5
9 Étalonnage . 8
10 Expression des résultats . 9
11 Rapport d'essai . 10
Annexe
A Exemples de colonnes, d’un chromatogramme et de spectres de masse. 11
Bibliographie. 13
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ISO 2002 – Tous droits réservés iii

Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison
avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique
internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI, Partie 3.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour
vote. Leur publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments de la présente Norme internationale peuvent faire l'objet
de droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas
avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
La Norme internationale ISO 16588 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 147, Qualité de l'eau, sous-
comité SC 2, Méthodes physiques, chimiques et biochimiques.
L'annexe A de la présente Norme internationale est donnée uniquement à titre d'information.
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iv ISO 2002 – Tous droits réservés

Introduction
Il est essentiel que l'essai conduit selon la présente Norme internationale soit effectué par un personnel
convenablement qualifié.
Il convient de vérifier si des problèmes particuliers nécessitent la spécification de conditions supplémentaires, et
dans quelle mesure.
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ISO 2002 – Tous droits réservés v

NORME INTERNATIONALE ISO 16588:2002(F)
Qualité de l'eau — Dosage de six agents complexants — Méthode
par chromatographie en phase gazeuse
AVERTISSEMENT —Il convient que les personnes utilisant la présente Norme internationale soient
familières des pratiques courantes de laboratoire. La présente Norme internationale ne prétend pas aborder
tous les éventuels problèmes de sécurité liés à son utilisation. Il est de la responsabilité de l'utilisateur
d'établir des pratiques de santé et de sécurité appropriées et de s'assurer de la conformité aux exigences
réglementaires nationales.
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale spécifie une méthode pour le dosage des agents complexants organiques
solubles dans l’eau répertoriés au Tableau 1, dans la gamme de concentrations allant de 0,5µg/l à 200µg/lsi un
volume d'échantillon compris entre 50 ml et 100 ml est utilisé. Il est possible de modifier la gamme de concentrations
pour l'analyse de dilutions. La méthode est applicable à l'eau potable, aux eaux souterraines, aux eaux de surface et
aux eaux usées.
Pour l'analyse d'eaux usées, il est recommandé de diluer un volume d'échantillon plus petit, par exemple 5ml à
10 ml, pour réduire les effets de matrices.
L'adsorption des six agents complexants par les matières solides est négligeable.
La présente méthode permet également d’effectuer le dosage d'autres agents complexants de composition similaire,
sous réserve qu'ils réagissent de la même manière lors du prétraitement des échantillons, de la dérivation et de la
chromatographie en phase gazeuse. Cela doit faire l'objet d'un contrôle dans chaque cas individuel.
Tableau 1 — Agents complexants pouvant être dosés par la présente méthode
Masse
o a
N Nom Composition Numéro CAS
moléculaire
1EDTA – acide éthylènedinitrilotétraacétique C H O N 292,25 60-00-4
10 16 8 2
2NTA – acide nitrilotriacétique C H O N 191,14 139-13-9
6 9 6
3DTPA – acide diéthylènetrinitrilopentaacétique C H O N 393,35 67-43-6
14 23 10 3
4MGDA – acide méthylglyacinediacétique C H O N 205,17 29578-05-0
7 11 6
5-ββADA – acide -alaninediacétique C H O N 205,17 6245-75-6
7 11 6
61,3-PDTA – acide 1,3-propylènedinitrilotétraacétique C H O N 306,27 1939-36-2
11 18 8 2
a
CAS: Chemical Abstracts System (= Système d’abréviations chimiques).
2Références normatives
Les documents normatifs suivants contiennent des dispositions qui, par suite de la référence qui y est faite,
constituent des dispositions valables pour la présente Norme internationale. Pour les références datées, les
amendements ultérieurs ou les révisions de ces publications ne s'appliquent pas. Toutefois, les parties prenantes
aux accords fondés sur la présente Norme internationale sont invitées à rechercher la possibilité d'appliquer les
éditions les plus récentes des documents normatifs indiqués ci-après. Pour les références non datées, la dernière
édition du document normatif en référence s'applique. Les membres de l'ISO et de la CEI possèdent le registre des
Normes internationales en vigueur.
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ISO 2002 – Tous droits réservés 1

ISO 3696:1987, Eau pour laboratoire à usage analytique — Spécification et méthodes d'essai
ISO 5667-1:1980, Qualité de l'eau — Échantillonnage — Partie1: Guide général pour l'établissement des
programmes d'échantillonnage
ISO 5667-2:1991, Qualité de l'eau — Échantillonnage — Partie2: Guide général sur les techniques
d'échantillonnage
3Principe
Stabilisation de l'échantillon pour essai avec du formaldéhyde et évaporation jusqu'à siccité. Ajout d'acide
chlorhydrique ou d'acide formique et nouvelle évaporation jusqu’à siccité. Estérification des agents complexants en
esters n-propyle, iso-propyle ou n-butyle. Addition d'eau et extraction des esters au n-hexane. Séparation par
chromatographie en phase gazeuse, puis identification et quantification avec un détecteur sensible à l'azote ou par
spectrométrie de masse.
Pour le dosage d’EDTA, de DTPA et de 1,3-PDTA, utiliser de l'acide 1,2-propylènedinitrilotétraacétique (1,2-PDTA)
comme étalon interne pour l'ensemble du mode opératoire. En cas d'utilisation d'un détecteur sensible à l'azote,
utiliser du nitrile d'hepta- et/ou octadécane comme étalon témoin pour l'étape de chromatographie en phase
gazeuse. Il est possible d'utiliser du 1-chlorotétradécane comme étalon témoin si une détection par spectrométrie de
masse est choisie.
Des témoins marqués au C peuvent être utilisés comme solution alternative.
4Interférences
En dépit de leur stabilité, les complexes de ces agents complexants avec des métaux lourds sont résolus et les
agents complexants sont dosés, sauf dans le cas du bismuth. Avec les échantillons contenant du bismuth dans des
concentrations > 100µg/l, il est possible d'avoir des pertes.
En cas de fortes concentrations en sel (> 2 g/l de NaCl, ce qui correspond à une conductivité électrique de l'ordre
de 400 mS/m), la réduction jusqu'à siccité peut se révéler difficile. L'élimination complète de l'eau est cependant
nécessaire pour procéder ensuite à l'estérification. Il est donc nécessaire de diluer les échantillons ou de prélever de
2+
plus petits volumes d'échantillon. En présence d'ions calcium en concentrations excédant 200 mg/l de Ca , des
pertes d'EDTA se produiront.
5Réactifs
Tous les réactifs doivent être exempts d'impuretés, lesquelles sont susceptibles d’interférer avec les réactions. Tout
au long du présent mode opératoire, utiliser uniquement de l’eau déionisée (5.1).
5.1 Eau déionisée, conforme à la qualité 1 telle que définie dans l'ISO 3696.
5.2 Gaz pour chromatographie en phase gazeuse et spectrométrie de masse, tels que définis par les
fabricants des instruments.
5.3 Azote, de pureté .� 99,996 %
5.4 n-Propanol, ou iso-propanol, ou n-butanol, pour la préparation du réactif d'estérification (5.6).
5.5 Chlorure d'acétyle.
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2 ISO 2002 – Tous droits réservés

5.6 Réactif d'estérification.
Dans un bécher de 400 ml, mélanger soigneusement, en tournant, 90 ml de n-propanol ou d’iso-propanol ou de
n-butanol (5.4) avec 10 ml de chlorure d'acétyle (5.5).
AVERTISSEMENT — Un fort dégagement de chaleur est généré.
Le mélange est stable pendant au moins 1 mois à température ambiante.
5.7 Composés de référence.
5.7.1 Acide nitrilotriacétique (NTA), C H O N, de pureté .� 99 %
6 9 6
5.7.2 Acide éthylènediaminetétraacétique (EDTA), C H O N , de pureté .� 99 %
10 16 8 2
� 99 %
5.7.3 Acide diéthylènetrinitrilopentaacétique (DTPA), C H O N , de pureté .
14 23 10 3
5.7.4 Acide méthylglycinediacétique (MGDA), C H O N.
7 11 6
5.7.5 Acide ββββ-alaninediacétique (ββββ-ADA), C H O N.
7 11 6
� 99 %
5.7.6 Acide 1,3-propylènedinitrilotétraacétique (1,3-PDTA), C H O N , de pureté .
11 18 8 2
5.7.7 Composés de référence (5.7.1 à 5.7.6) marqués au C (facultatifs).
5.8 Étalons de contrôle et étalon interne.
5.8.1 Nitrile d'octadécane, C H N, de pureté .> 98 %
18 35
5.8.2 Nitrile d'heptadécane, C H N, de pureté .> 98 %
17 33
5.8.3 1-Chlorotétradécane, C H Cl, de pureté .> 98 %
14 29
5.8.4 Acide 1,2-propylènedinitrilotétraacétique (1,2-PDTA), C H N O , de pureté .> 98 %
11 18 2 8
5.9 Formaldéhyde, solution aqueuse à 37 % en volume.
5.10 n-Hexane.
5.11 Sulfate de sodium, anhydre.
5.12 Solution d'hydroxyde de sodium, c(NaOH)= 1 mol/l.
5.13 Acide chlorhydrique, c(HCl)= 5 mol/l.
5.14 Acide chlorhydrique, c(HCl)= 1 mol/l.
5.15 Acide formique, solution aqueuse à 50 % en volume.
5.16 Solutions mères pour étalonnage, .1 g/l
Préparer des solutions mères dans des concentrations en masse de 1 g/l comme suit. Peser 100 mg de chacun des
agents complexants 5.7.1 à 5.7.6 et 5.8.4 dans des fioles graduées de 100 ml, dissoudre dans 2 ml de solution
d'hydroxyde de sodium (5.12) et compléter au volume avec de l'eau (5.1).
Stockées au réfrigérateur dans des flacons en verre brun, les solutions mères sont stables pendant au moins 3 mois.
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5.17 Solutions mères intermédiaires, 1 mg/let 10 mg/l.
Avant chaque série d'analyses, préparer des solutions mères intermédiaires de 10 mg/l et de 1 mg/l en diluant les
solutions mères (5.16) avec de l'eau (5.1).
5.18 Étalon de contrôle au nitrile, .0,5 mg/l
Dissoudre 100 mg de nitrile d'octadécane (5.8.1) et/ou de nitrile d'heptadécane (5.8.2) dans 100 ml de n-hexane
(5.10).
◦
Stocker la solution au réfrigérateur à .4 C
La solution est stable pendant au moins 3 mois.
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